茯苓多糖提取工艺的优化及开发利用研究

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1、贵州大学硕士学位论文茯苓多糖提取工艺的优化及开发利用研究姓名：陈莉申请学位级别：硕士专业：生物化学与分子生物学指导教师：郁建平20070401附：学位论文原创性声明和关于学位论文使用授权的声明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究在做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：卫堑扯日期：上业L』豳L月一

2、关于学位论文使用授权的声明本人完全了解贵州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权贵州大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：丑墅垂坠导师签名辎憾——礤士学位论文摘要摘要对茯苓多糖的浸提、分离、纯化工艺及其单糖组分等进行了研究，结果如下：L茯苓多糖的热水浸提工艺优化：首先对溶剂的用量、溶剂pH、浸提温度、浸提

3、时间、浸提次数进行单因素实验，然后选取灵敏因素进行正交实验优化。确定热水浸提的最佳工艺条件为：浸提时间：3小时，浸提温度：80"0，浸提次数：2次，浸提固液比1：40。2．茯苓多糖的酶解+热水浸提法工艺研究首先对酶加入量、酶解液pH值、酶解温度、酶解时间、固液比等进行单因素实验，然后选取灵敏因素进行正交实验优化。确定酶解+热水浸提法的最佳工艺条件为：固液比1：10，温度：48℃，时间：90rain，pH值=5，加酶量：1％。酶解反应和热水浸提两个阶段。酶解后热水浸提温度确定为80℃，酶解后热水浸提时间为90min

4、，酶解后热水浸提时的固液比为1：30，酶解后热水浸提次数为一次。实验结果表明，利用酶解+热水浸提法提取茯苓多糖，能显著提高茯苓多糖的浸出率，是热水浸提法的2．32倍，并且具有浸提时间缩短，提取条件温和，所得茯苓多糖立体结构不易被破坏、生物活性高等优点。3．乙醇沉淀工艺研究，，通过实验探讨上述两种方法的浸提液浓缩比和乙醇加量对多糖沉淀率的影响，结果表明热水浸提液醇沉醇沉最佳工艺条件为浓缩液占原体积的1／10，乙醇浓度为80％时，沉淀率达到82．03％，沉淀中多糖的含量为20．16％。酶解+热水浸提液醇沉醇沉最佳工艺

5、条件为浓缩液占原体积的1／5，乙醇浓度为80％时，沉淀率达到83．15％，沉淀中多糖的含量为29．13％。4．除蛋白质方法的比较本文比较了的Sevag法和酶解+Sevag法、10％三氯乙酸和鞣酸沉淀法去除茯苓多糖提取物中的蛋白质成分。综合考虑蛋白质清除率和多糖损失率后确定采用酶解+Sevag法去除茯苓多糖提取物中的蛋白质。去蛋白后醇沉所得的多糖含量为：55．82％。5．大孔树脂纯化茯苓多糖：在9种大孔吸附树脂中进行筛选确定用AB．8大孔吸附树脂进行茯苓多糖的继续纯化。详细研究AB．8大孔吸附树脂纯化茯苓多糖的过程

6、，确定条件为：洗脱速度：2ml／min，NaCl溶液浓度：O．2mg／ml。硕士学位论文摘要6．茯苓多糖的DEAE．纤维素分离取纯化茯苓多糖上DEAE-纤维素柱，结果蒸馏水洗脱得一种中性多糖PPSl，O．1、O．2、0．3mol／LNaCl溶液分别洗脱得三种不同的酸性多糖PPS2、PPS3、PPS4。7．茯苓多糖的单糖组分研究采用气相色谱法测定PPS2的单糖组分，结果表明主要是由半乳糖、甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、阿拉伯糖五种单糖组分组成。8．茯苓多糖的开发利用研究利用纯化茯苓多糖制得茯苓多糖的片剂。并确定其主辅料配

7、比及制作工艺。关键词：茯苓；多糖；植物复合酶；提取；纯化；优化工艺2硕士学位论文摘要AbstractThemainjobofthispaperistooptimizetheextractionprocessofporiacocospolysaccharide(PPS)andtopurifyandisolatethePPS．Theresultsofresearchareshownasthefollowing：1)Optimumprocessofextractingpolysaccharideofporiacocos

8、(Schw．)wolfbyhotwater：Theoptimizationprocessconditionsofextractingtemperature，ratioofsolid-liquid，thedurationoftimeandtheextractingtimesinextractingpolysaccharidesfromporiacoens(Schw．)wol