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1、第!"卷第#期浙江大学学报&工学版’>).?!"@)?#$%%!年#月()*+,-.)/01234-,56,472+849:&;,54,22+4,5<=42,=2’(-,?$%%!螺旋藻基因克隆研究进展苏忠亮G王勇G钱凯先&浙江大学生物技术系G浙江杭州!#%%$"’摘要A螺旋藻是一种具有重要经济价值和开发前景的原核生物G许多国家已相继建立了螺旋藻的大规模工业生产系统G我国在D%年代一跃而成为世界第一生产大国?当前G加强螺旋藻基因工程的研究G对进一步提高其天然产物表达和开创以螺旋藻作为表达载体G建立基因工程新的高效原核光合表达系统日渐迫切?由于螺旋藻的
2、遗传背景尚不清楚G其基因工程尚难突破?本文仅对有关的螺旋藻基因克隆研究进行了阐述和展望G以期为推进螺旋藻基因工程研究提供参考?关键词A螺旋藻O基因克隆O基因工程中图分类号APQ#$文献标识码AI文章编号A#%%QBD"!R&$%%!’%#B%##"B%CSTUVTWXXYZVWZW[Y\]UZYZVU^_‘abcdaefl<601),5B.4-,5GgI@hi),5GPjI@N-4Bk4-,&mnopqrsntruvwxurnyztu{u
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6、’{xtp48-14512=),)H4=7-.*.2-+)M-+:)92.1)822k-.)49-94),1-8-J+4519/*9*+2?/-,:=)*,9+4281-728*==288472.:289-J.481204,0*89+4-.4K20-+)0*=94),8:892H)/,oxq’{xtp),-.-+528=-.2G-,084,=2912#DD%8)*+=)*,9+:1-8J2=)H2912J455289-+)0*=2+)/,oxq’{xtp?11289+2,5912,4,5)/+282-+=14,52,22,54,22+4,5)/,ox
7、q’{xtp=-,2,1-,=29122k-+2884),)/,-9*+-.-+)0*=9)/,oxq’{xtpG4,494-92*82)/,oxq’{xtp-8-J4).)54=-.+2-=9)+G-,0289-J.481-,2.1451.:2//4=42,9-+)M-+:)94=-,0-1)9)8:,91294=2kB-+2884),8:892H?22=-*8291252,294=J-=M5+)*,0)/,oxq’{xtp1-8,)9J22,=.-+4/420:29G494804//4=*.99)-=14272J+2-M91+)*514,+282
8、-+=1),52,22,54,22+4,5)/,oxq’{xtp?1148+2742.)/52,2=.),4,5)/,oxq’{xBtpG.4..J25))0+2/2+2,=2/)+-+)H)94),)/+282-+=14,52,22,54,22+4,5)/,oxq’{xtp?3W45UT6XA,oxq’{xtpOh2,294==.),4,5Oh2,22,54,22+4,5藻7@I片段连到特定的载体中G转化大肠杆菌相应的突变体G经过筛选克隆特定的目的基因?&!’用#螺旋藻基因克隆研究其他原核生物相应基因的保守序列设计引物G通过螺旋藻遗传背景的研究受到
9、关注?目前G用于螺89:技术克隆出螺旋藻特定的目的基因?通过以上旋藻分子遗传学研究的主要方法有A&#’用遗传背景方法G螺旋藻在基因克隆;定位;测序及基因的转移较清楚的原核生物如A大肠杆菌或亲缘关系较近的表达等方面取得了进展?其他蓝细菌的相关基因制成探针G通过7@I杂交
10、旋藻基因工程研究?;BH-4.AI.J2+98K1.L8)1*?=)H万方数据通讯作者A钱凯先教授G;BH-4.AM=74N-4$%%#L1K=,=?=)H++d浙江大学学报$工学版)第7#卷为探针!通过与限制性内切酶消化的螺旋藻基因组杆菌89+:+!经检测后!克隆出了螺旋藻丝氨酸酯片段杂交!克隆得到了螺旋藻核糖体蛋白"#基因酶基因!其基因序列已被测定5该基因在大肠杆菌的$%&’()*"+,基因$%&’-)及蛋白合成延长因子./0(表达产物为一约,7^X的蛋白!与对照相比!转化子基因$12’)*./032基因$421)5并推测这四个基因在具有更高的酯
11、酶活性;p<5螺旋藻中也是以操纵子的形式存在!其在染色体上_5q与螺旋藻信号转导有关的基因克隆的排列顺序为6
