药学毕业论文--正交设计法优化野菊花中蒙花苷的提取工艺

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1、正交设计法优化野菊花中蒙花苷的提取工艺作者:张明,程文明*,李俊,陆维丽,张云静,张群林【摘要】目的为野菊花中主要黄酮成分蒙花苷提取工艺的确定提供实验依据。方法采用正交设计的方法优化提取方案,RP-HPLC法测定蒙花苷的质量分数。结果最终确定优化提取方案为80%乙醇,按8倍药材质量的溶剂量,提取3次,每次2h。结论提取溶剂量和提取时间对提取效率具有显著影响,应加以控制。优化方案提取效率明显高于正交设计中所有9个实验的提取效率。【关键词】正交设计;野菊花;蒙花苷;RP-HPLC;提取工艺  Abstract

2、:ObjectiveToprovideabasisfortheoptimumextractiontechnologyofLinarinfromChrysanthemumindicumL..  MethodsTheorthogonaldesignandRP-HPLCmethodwereused.  ResultsTheoptimumextractionconditionwasselectedaseighttimesamountof80%alcoholandrefluxing2h7repeatedlyfor3

3、times.  ConclusionThevolumeofsolventandextractingtimehadobviouseffectontheextractingefficiencyofthethreeflavonoidsinChrysanthemumindicumL.Theoptimalmethodissuperiortothenineexperimentsinorthogonaldesign.  Keywords:Orthogonaldesign;Chrysanthemumindicum;Lin

4、arin;RP-HPLC;Extractiontechnology  野菊花为菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL.的头状花序,别名为野黄菊花、苦薏、山菊花、甘菊花,作为常用药材收录于2005版《中国药典》(Ⅰ部)中。其性凉,味苦、辛,归肺、肝经,具有清热解毒、消散痈肿、疏风平肝之功效,在我国的药用历史悠久。现代药理证明:野菊花具有广谱抗菌、抗病毒、降压、增加冠脉血流量、清除活性氧自由基等作用。现今临床上已将野菊花应用于风热感冒、高血压病、肺炎、口疮、痈疖等疾病的治疗[1]。蒙花苷为野菊

5、花中黄酮化合物的代表成分,在野菊花中有较高的含量。本实验以其质量分数为指标,采用正交设计法,从提取溶剂、提取时间、溶剂量以及提取次数入手,对蒙花苷的提取工艺进行优化。  17试剂与仪器  无水乙醇(上海振兴化工厂,批号:200905317)、甲醇(购自江苏科瑞思特工贸有限公司,批号:200705288)、双蒸水(自制)、冰醋酸(国药集团化学试剂公司,批号:T20081010)。除甲醇为色谱纯外,其余试剂均为分析纯。蒙花苷(批号:111528-200303)对照品均购自中国药品生物制品检定所。  蒸发回流装

6、置、水浴锅、岛津LC-20A高效液相色谱仪、岛津SIL-20A自动进样器、岛津CTO-10AsVP柱温箱、岛津SPD-20AU紫外检测器、十万分之一分析天平。超声提取器(昆山市超声仪器有限公司)。  2方法与结果[2]  2.1提取工艺的筛选提取工艺设计:取野菊花药材3g各9份,根据有关资料和预实验,以提取溶剂(A)、溶剂量(B)、提取时间(C)、提取次数(D)为考察因素,每个因素选择3个水平,选用L9(34)正交表进行实验,以蒙花苷百分含量为考察指标,按照L9(34)正交设计实验表进行实验,提取液置于容

7、量瓶中,用提取溶剂定容至刻度。因素水平表见表1。表1因素水平表  2.2色谱条件色谱柱:大连依利特ODSC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;7流动相:A相为甲醇,B相为2.5%冰醋酸水溶液,进行梯度洗脱,0~12min,由85%~80%,12~15min,由80%~72%,15~25min,由72%~60%,25~40min,由60%~45%,40~50min,由45%~5%,50~60min为5%;流速:1ml/min;柱温:35℃;进样量:20μl;检测波长:326nm。图1蒙花苷标准品H

8、PLC色谱图  2.3标准品的制备精密称取蒙花苷标准品1.0mg,置于10ml容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,制得标准品原溶液,备用。蒙花苷标准品色谱图见图1。  2.4线性关系的考察精密吸取蒙花苷标准原液0.5ml,置于5ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度。以此方法等比稀释3次。再吸取标准原液1ml,置于5ml容量瓶中,稀释至刻度,以此方法等比稀释2次。分别吸取上述溶液20μl进样,在上述色谱条件下进行分析,以标准品质量

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