响应面法优化野菊花中绿原酸的提取工艺.pdf

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1、江苏农业科学2014年第42卷第11期．——327．——张明明，黄芳，张长丽．响应面法优化野菊花中绿原酸的提取工艺[J]．江苏农业科学，2014，42(11)：327—329doi：10．15889／j．issn．1002—1302．2014．11．116响应面法优化野菊花中绿原酸的提取工艺张明明，黄芳，张长丽(南京晓庄学院生物化工与环境工程学院，江苏南京211171)摘要：以野菊花为原料，研究绿原酸最佳提取工艺条件。在乙醇浓度、液固比、提取时间等单因素试验的基础上，根据Box—Behnken中心组合试验设计原理，应用响应面分析法对野

2、菊花中绿原酸提取工艺进行优化。结果表明，超声波辅助提取野菊花中绿原酸的最佳工艺条件为：乙醇浓度80％、液固比26mL：1g、提取时间35min。在该条件下，绿原酸实际提取率达2．32％，与模型预测值(2．35％)接近。关键词：野菊花；绿原酸；超声波提取；响应曲面法中图分类号：R284．2文献标志码：A文章编号：1002—1302(2014)11—0327—03野菊花(Chrysanthemumindicum)别称山菊花、甘菊花，为设置一定的超声温度、超声功率、超声时间，提取一定次数后菊科多年生草本植物，外形与菊花相似，野生l千山坡草地

3、、田过滤。滤液在旋转蒸发仪中浓缩，定容至50mL，得到绿原酸边路旁，具有疏风清热、消肿散热、抗菌消炎、降血压等多种药提取液，测定其吸光度，分析绿原酸含量，计算绿原酸提取率。理作用”_2_。绿原酸是菊花中的一种重要成分，属酚类化合1．2．2绿原酸含量的测定准确称取绿原酸标准品，用乙醇物，具有抗菌、降压、降脂、抗病毒、抗肿瘤、保肝利胆、促进肠配制成浓度为0．1mg／mL的储备液。分别吸取上述溶液道蠕动、清除自由基、兴奋中枢神经系统等多种生物活性，是0．10、0．30、0．50、1．00、1．50、2．00、2．50mL于10mL容量瓶菊科

4、植物中的主要药理成分之一。目前，绿原酸提取工中，定容摇匀。以乙醇为参照，在绿原酸的最大吸收波长艺主要有水浴提取法、乙醇回流法、超声提取法、微波提取法、327nm下依次测定吸光度。以绿原酸浓度C为横坐标、吸光超临界流体萃取法等。本试验采用超声波辅助提取野度D为纵坐标进行回归分析，绘制标准曲线，标准曲线方程菊花中绿原酸，并用响应面试验法对其提取工艺进行优化，为为D=41．757C+0．0387，相关系数r=0．999l，可见绿原酸工业化提取野菊花中绿原酸提供了参考。浓度在0．001—0．025mg／mL范围内与吸光度D呈良好的线性关系。将

5、提取的绿原酸稀释一定倍数，再在327nm下测定1材料与方法吸光度，根据标准曲线及公式(1)计算绿原酸的提取率(Y)：1．1仪器与试剂y=CVn／m×100％。(1)AUY120电子天平(日本岛津)；UV2450紫外分光光度计式中：C表示绿原酸浓度，mg／mL；V表示体积，L；n表示稀释(日本岛津)；KQ一200KDB高功率速控超声清洗器(江苏省倍数；m表示野菊花粉末的质量，g。昆山市超声仪器有限公司)；RE一52A旋转蒸发仪(上海亚荣1．2．3单因素试验分别以乙醇浓度、液固比、超声时间、超生化仪器设备有限公司)；SHB一Ⅲ循环水式多用

6、真空泵(河声温度、超声功率等为因素，考察各因素对绿原酸提取率的南郑州长城科工贸有限公司)。影响。野菊花购于南京中药材市场，去除苞片后35℃干燥，粉1．2．4响应面试验设计在单因素试验的基础上，选择乙醇碎，过40目筛，备用。绿原酸标准品(中国药品生物制品检浓度、液固比、提取时间3个因素作为考察对象，以绿原酸提定所)，无水乙醇(分析纯)，试验用水均为二次蒸馏水。取率为响应值，采用DsignExpert7．0统计分析软件中的1．2试验方法Box—behnken中心组合试验设计，对提取条件进行优化。具1．2．1绿原酸的提取工艺准确称取2g干燥

7、的野菊花粉体试验因素水平及编码见表1。末于烧杯中，加入80％乙醇溶液，在超声清洗器中超声提取，表1响应面法优化野菊花中绿原酸的提取工艺设计收稿日期：2014—01—17基金项目：江苏省高校自然科学研究项目(编号：13KJD150001)；南京晓庄学院科研项目(编号：2012NXY18)；江苏省大学生实践创新训练计划。作者简介：张明明(1992一)，男，江苏射阳人，主要从事应用化学研2结果与分析究。E—mail：zhangmingming@163．oom。通信作者：黄芳(1978一)，女，贵州贵阳人，硕士，讲师，主要从事天2．1单因素试

8、验然产物提取与分析研究。Tel：(025)86178264；E—mail：2．1．1乙醇浓度对绿原酸提取率的影响由图1可知，随乙fanghuang1998@163．tom。醇浓度的增加，绿原酸提取率先迅速增加后降低。当乙