一种新的花粉破壁方法

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1、一种新的花粉破壁方法术苏松坤陈盛禄傅凌林雪珍(浙江大学动物科学学院，杭州310029)摘要：本文介绍一种已获国家发明专利(专利号：ZL00105084．2)的蜂花粉破壁新方法。采用5个不同处理剂量，对分别采自不同地区的六种茶花粉进行破壁处理，试验结果表明，茶花粉破壁前后的破壁率差异极显著；不同处理剂量之间的破壁率差异显著，且随剂量增加呈上升趋势。对油菜、玉米、向日葵、菊花四种主要商品花粉进行不同剂量的破壁处理，结果表明，新方法对茶花粉的破壁效果最好，破壁率达93％以上，其次是菊花、向日葵、玉米花粉，但对油菜花粉无破壁

2、作用。关键词：花粉；破壁：形态结构1引言花粉是植物有性繁殖的雄性配子体。蜂花粉是蜜蜂从显花植物花药内采集的花粉粒，经过蜜蜂向其内部加入了花蜜和分泌物，混合成不规则扁圆形的、上面带有蜜蜂后肢嵌狭痕迹的团状物。成熟花粉有两层壁，一层是由孢粉素为主要成分构成的外壁；一层是由果胶质、纤维素等成分构成的内壁。外壁质坚硬、具抗酸和抗生物分解的特性。采用物理或化学方法打破花粉外壁或花粉内含物外流，使花粉内含物从花粉壁内部释放到花粉壁外部的过程，我们称之为花粉的破壁。花粉破壁虽然可以略为提高人体对它的吸收率，但花粉破壁后会降低各种营

3、养素的稳定性，特别是花粉的活性成分失去花粉壁的保护，给花粉及其制品的储存带来麻烦。为此，生产花粉制品是否要破壁应视不同的产品需要而定。有的产品根本不需要破壁花粉，如口服的花粉制剂，经过人体胃肠即可消化吸收；但另一些制品，如花粉化妆品，花粉提取膏等主要用于皮肤营养，由于皮肤缺乏消化液和消化酶，皮肤仅是吸收部分营养物。花粉破壁后，内含物均匀地混合于基质中，人体皮肤就能更充分地吸收花粉的营养。目前，有多种破壁方法，如温差破壁法、机械破壁法、酶解破壁法、发酵破壁法。我们在花粉研究实验中偶然发现一种新的花粉破壁方法，申请并获得

4、国家发明专利，本文就该方法对不同蜂花粉的破壁效果作一介‘国家科技部农业科技成果转化资金资助(编号：03EFN217100321)作者简介：苏松坤，博士、副研究员，联系电话：0571-86971095，主要从事蜜蜂科学研究。E-mail：susongkun@zju．edu．cn26绍(注：本文以下部分提到的花粉均指蜜蜂采集的蜂花粉)。2材料和方法2．1试验材料采自不同产地的茶花粉：茶花粉A：浙大实验蜂场茶叶花期采集的新鲜茶叶花粉；茶花粉B：浙江淳安茶叶花期采集的新鲜茶叶花粉；茶花粉C；浙江桐庐茶叶花期采集的新鲜茶叶花粉

5、；茶花粉D：安徽茶叶花期采集的新鲜茶叶花粉；茶花粉E：江苏宜兴茶叶花期采集的新鲜茶叶花粉；茶花粉F：浙江临安茶叶花期采集的新鲜茶叶花粉。玉米、油菜、向日葵、菊花蜂花粉均购自杭州东海蜂业公司。‘2．2试验方法2．2．1破壁处理将样品去除杂质后，分别装入已洗净、干燥的带盖的小玻璃瓶内，将盖盖紧，并用胶带包紧。共准备六组试验样品，分别采用不同的破壁剂量(0、3、5、7、9、11)进行处理。2．2．2光学显微镜观察分别取经不同破壁剂量处理的花粉各0．19，放入小试管内，再加入0．9ml蒸馏水，振荡后取一滴滴到载玻片上，加上盖

6、玻片，在OLYMPUS光学显微镜下观察。随机选取5个视野作为一组，分别观察5组，共25个视野。并统计总的花粉粒和内含物外吐花粉粒的数量，计算出内含物外吐花粉粒的百分率，即破壁率。公式如F：破壁率=视野中内含物外吐的花粉粒／视野中总的花粉粒2．2．3显微摄影分别在上述试验开始后进行观察。并取2个视野进行lO×40x、10×20x放大倍数的显微摄影。2．2．4扫描电镜观察将样品粘附在样品台上，经IB．5离子溅射仪镀膜后在KYKY-1000B型扫描电镜下观察，并作电镜扫描图。3试验结果3．1破壁茶花粉光学显微镜检测结果3．

7、1．1茶花粉破壁前后的显微结构对比在光学显微镜下一般可观察到原花粉粒的极面观三裂圆形(呈三角形，三个角各有一裂口)，表面较光滑，见照片1、2。经处理的花粉见照片3、4、5、6。照片3花粉内膜囊自萌发孔处向外伸出，使内膜囊与花粉壁产生部分脱离。照片4内膜囊白花粉壳的萌发孔处完全脱出，花粉壁明显破裂、破损。照片5花粉内膜囊已破裂．花粉内容物自花粉萌发孔或萌发匈向外溢出。罡片6花粉粒的内含物已全部外泄一空，只剩下花粉空壳。3．1．2茶花粉破壁率检测结果茶花粉样品中内含物外吐的花粉粒所占的比率见表l，采用EXCEL的方差分析

8、方法对各样品的破壁率进行生物统计，结果见表2。由表1、2结果表明，该破擘_方法对不同产地的茶花粉均其有极显著的破壁效果。茶花粉的破难牢从破壁前的平均324％增加到破畦后的照片s935％，方差分析结果表叫，¨_同破壁剂量对菜花粉的破壮效粜都非常明显，与对照组相比，差异极显著(P