羊软骨ⅱ型胶原蛋白对鸡胚成纤维细胞生长的影响

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第30卷第3期河北农业大学学报V()1．30NO．32007年5月JOURNAIOFAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEIMav．2007文章编号：1000一I573(2007)03—0079—03羊软骨II型胶原蛋白对鸡胚成纤维细胞生长的影响张志胜。，李艳琴，李占雷，席庆艳，康亚男，韩新影(I．河北农业大学动物科技学院，河北保定07100I；2河北省定州市质量技术监督局，河北定州073o00)摘要：采用体外细胞培养检测自制羊软骨

2、II型胶原蛋白(TypeIIcollagenfromsheep，CII)的细胞毒性，将材料与鸡成纤维细胞((；hickenl1)ryofibroblast，(、EF)共M培养，观察其对牛长的影响，确定鸡胚成纤维细胞对羊软骨(、II的最大安全浓度，以及在安全浓度范内有效促进鸡胚成纤维细胞长的浓度。结果显示，软骨(、IIx,tx~胚成纤维细胞的最大安全浓度为400／,g／mL，当羊软骨CII浓度在25t,g／mL时，町以极显著的促进鸡胚成纤维细胞的生长。关键词：羊软骨CII；细胞毒性；细胞生长中图分类

3、号：S853．74文献标识码：AEffectsoftypeIIcollagenfromsheeponproliferationofmonolayerchickembryofibroblastZHANGZhi—sheng，LIYan—qin，LIZhan—lei，XIQing—yan，KANGYa—nan，HANXin—ying(i．CollegeofAnimal~ienceandl'echnology，AgriculturalUniversityofHebei，I~oding07100I，Chin

4、a；2．Quality&TechnologySupervisionBureauof1)ingzhouCity，I)ingzhou073000，China)Abstract：FhecellculturemethodwasusedtoevaluatethecytotoxicityoftypeIIcollagenfromsheepforclinicaluse．Directmethodwaschosentoexaminetheproliferationofmonolayerchickem—bryofibr

5、oblast(CEF)，inordertomakesurethelargestsafetyconcentrationandtheeffectix，econ—centrationonadvancingtheproliferationofmonolayerCEF．TheresultsshowedthatthelargestsafetyconcentrationoftypeIIcollagenfromsheepwas400#g／mI，withinthesafetyconcentration，adding

6、25／~g／mLontomonolayerCEFcanadvancetheproliferationofmonolayerCEFrespectively(，j<0．01)．Keywords：typeIIcollagenfromsheep；cytotoxicity；proliferationofCEF胶原是生物体中细胞外基质的主要成分，具有(ISO)和中国卫生部规定，对长期植入机体的材料，良好的生物学特性，免疫原性非常低，可作为组必须进行细胞毒性评价。即使是同一材料，当其原织的支持物，对细胞、组织乃

7、至器官行使正常功能有料配方、化学组成和制备过程有改变时，也应考虑到重火影响。将胶原作为种植生物材料使用时，引起其可能毒性作用的变化，因此也需重新进行生物学宿主不良反应的可能性较小。据国际标准化组织评价试验。在本研究中，采用将自制羊软骨II型收稿日期：2006—06—06作者简介：张志胜(I970一)，男，河北河间人，博士，教授。主要从事畜产品贮藏与加工方面的研究维普资讯http://www.cqvip.com80河北农业大学学报第30卷胶原蛋白CII与鸡胚成纤维细胞体外培养，以检测水乙醇溶液，pH

8、值4．5)，静置10min，利用酶联免其对细胞形态和增殖率的影响，来评价羊软骨CII疫检测仪，测定578nm的吸光(0D)值。OD5。值作的细胞毒性。为细胞生长的指标，与活细胞的生长呈正比，OD值越大，表明细胞生长越旺盛。1材料和方法1．4鸡胚成纤维细胞最大适应羊软骨CII的安全1．1羊软骨CII的制备浓度测定按文献[4]的方法并进行了改进，将羊肋软骨去将1．1制备的各种不同浓度的CII滴加于培养膜，去除软骨上残留的肌肉、脂肪、其它结缔组织及24h长满细胞的96孔板中，每孔100t