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时间:2018-09-15
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1、中南大学硕士学位论文咖啡酸苯乙酯对大肠癌HCT116、HT29细胞中β-catenin及VEGF表达的影响姓名:祝藩原申请学位级别:硕士专业:消化内科指导教师:霍继荣20080501七年制坝lj学位论文咖啡酸苯乙酯对大肠癌HCTl16、H129细胞中p-catenin及VEGF表达的影响摘要研究背景:大肠癌的治疗是关系患者预后的重要因素,而Wnt信号通路中关键基因13-catenin和VEGF已成为大肠癌治疗的新靶点,咖啡酸苯乙酯(caffeicacidphenethylester,CAPE)是蜂胶抗肿瘤作
2、用的主要活性成分,它可以作用于Wnt信号途径并抑制其相关蛋白表达而发挥抗癌作用。目的:研究咖啡酸苯乙酯(caffeicacidphenethylester,CAPE)对体外培养的大肠癌HCTl16、HT29细胞生长及J3-catenin和VEGF表达的影响。探讨CAPE的抗肿瘤作用机制,为咖啡酸苯乙酯的大肠癌临床治疗提供理论依据。方法:体外培养HCTll6和HT-29细胞至对数生长期后予细胞种板,用不同浓度CAPE(2.5、5、10、20、40、80rag/L)分24,48小时两个时间段处理,与未处理组进行
3、对照。采用细胞计数方法,分析不同浓度CAPE作用后,对大肠癌细胞生长和增殖的影响。采用免疫细胞化学二步法检测处理后各细胞爬片中13-catenin,VEGF的表达情况,并分析不同浓度及不同时间CAPE作用后蛋白表达的差异,对13-catenin和VEGF两种蛋白表达强度相关性进行检验。结果:不同浓度的CAPE作用HCTl16和HT29细胞后,均可见悬浮细胞增多,培养液中有较多的细胞碎片,细胞内出现颗粒样物质,细胞七年制硕Ij学位论文浆混浊,胞体缩小、变圆、皱缩,核固缩碎裂等凋亡形态学特征。对药物处理后的细胞
4、计数发现,随着CAPE浓度的增高作用时间的延长,细胞的数量逐渐减少,HCTl16和HT29细胞的生长和增殖明显受到抑制,呈剂量和时间依赖性的特点。免疫细胞化学检测结果显示:CAPE分别处理HCTl16和HT29细胞后,13-catenin在胞核及胞浆中的表达下调,而在细胞连接处表达上调,VEGF在胞浆中的表达减弱甚至消失。不同剂量的CAPE(2.5、5、10、20、40、80mg/L)作用HCTl16和HT29细胞不同时间(24、48h)后,细胞13-catenin、VEGF表达强度均有不同程度的下降,与对
5、照组(未加药物干预)比较有显著性差异p6、的异常表达,可能是其抗癌作用的重要的分子机制之一。13-catenin和VEGF蛋白表达强度之间有较强相关性,提示CAPE作为一种Wnt通路抑制剂,可能通过抑制Wnt信号通路的上游靶基因13-catenin表达,进而影响其下游靶基因VEGF的表达。关键词:大肠癌,p连环蛋白,血管内皮生长因子,咖啡酸苯乙酯,免疫细胞化学Ⅱ七年制硕_t:学位论文英文摘要TheeffectofcaffeicacidphenethylesteronD·cateninandVEGFinthecolorectalcancercelll7、ineHCT16andHT29ABSTRACTBackground:Thetreatmentofcolorectalcancerisanimportantfactorrelatedtotheprogressofdisease.IB-cateninandVEGFwhicharethekeygeneinWntsignalingpathwayhasbecomethenewtargettothetreatmentofcolorectalcancer.caffeicacidphenethylester(CAPE)is8、themajoractiveingredientoftheanti—tumoreffectsofpropolis.ItcanactontheWntsignalingpathwayincolorectalcancertoinhibititsassociatedproteinexpression.objective:Tostudytheeffectofcaffeicacidphenethylester(CAPE)on
6、的异常表达,可能是其抗癌作用的重要的分子机制之一。13-catenin和VEGF蛋白表达强度之间有较强相关性,提示CAPE作为一种Wnt通路抑制剂,可能通过抑制Wnt信号通路的上游靶基因13-catenin表达,进而影响其下游靶基因VEGF的表达。关键词:大肠癌,p连环蛋白,血管内皮生长因子,咖啡酸苯乙酯,免疫细胞化学Ⅱ七年制硕_t:学位论文英文摘要TheeffectofcaffeicacidphenethylesteronD·cateninandVEGFinthecolorectalcancercelll
7、ineHCT16andHT29ABSTRACTBackground:Thetreatmentofcolorectalcancerisanimportantfactorrelatedtotheprogressofdisease.IB-cateninandVEGFwhicharethekeygeneinWntsignalingpathwayhasbecomethenewtargettothetreatmentofcolorectalcancer.caffeicacidphenethylester(CAPE)is
8、themajoractiveingredientoftheanti—tumoreffectsofpropolis.ItcanactontheWntsignalingpathwayincolorectalcancertoinhibititsassociatedproteinexpression.objective:Tostudytheeffectofcaffeicacidphenethylester(CAPE)on
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