羧甲基茯苓多糖上调hbv转基因小鼠权突状细胞功能

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1、第!"卷第#期武汉大学学报（理学版）789(!"18(#$$"%%#年&"月’()*+,-.-/0(（1,2(34/(56(）:;4("%%#，<<=><="!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!文章编号：&#<&?==H#（"%%#）%#?%<<=?%!羧甲基茯苓多糖上调!"#转基因小鼠树突状细胞功能A侯安继，杨占秋，黄菁，蒋涵（武汉大学医学院，湖北武汉@H%%<&）$$摘$要：采用&J羧甲基茯苓多糖（KLM）腹腔注射，摘取乙型肝炎病毒（NO7）转基因小鼠脾脏，制备淋巴细胞，LPP（噻唑蓝粉剂）法观察KLM对

2、淋巴细胞的毒性作用；经粒?巨噬细胞集落刺激因子（QL?K3R）和白细胞介素?@（ST?@）培养转基因小鼠脾脏来源树突状细胞（:K），5TS3U法检测:K分泌ST?&"以及刺激混合淋巴细胞反应P淋巴细胞分泌ST?&%、SR1?!的含量(KLM在%>!%%BDVT浓度对NO7转基因小鼠无毒性作用，并能显著促进NO7转基因小鼠:K分泌ST?&"，在混合淋巴细胞反应中，能显著促进P淋巴细胞分泌SR1?!并抑制ST?&%的分泌，从而上调:K功能(关$键$词：羧甲基茯苓多糖；NO7转基因小鼠；树突状细胞中图分类号：WI#<$$$文献标识码：U$$树突状细胞（6;-6X/2/44

3、;99，:K）是已知人体内功能最强大的抗原提呈细胞（,-2/D;-YX;Z;-2/-D$%材料与方法［&］4;99Z，UMK），在机体抗感染免疫中发挥重要作用(研究表明，慢性乙型肝炎（4+X8-/4+;Y,2/2/ZO，KNO）$($%试剂和药物患者:K功能处于抑制状态，机体免疫功能低下，乙羧甲基茯苓多糖（KLM，浙江省庆元县金源真菌［"，H］型肝炎病毒（NO7）不能被有效清除(如何解决多糖制品有限责任公司），分子量约为I!%%，含量:K功能的低下状态成为国内外研究的热点，:K疫为IH(HJ，水分含量#(!J，砷含量]%(%!J，铅含苗，或将患者:K体外致敏后回输等

4、由于安全性原量]%(&J(用前以N,-^’Z液溶解并稀释至所需浓［@］因至今未能在临床上推广，多糖类中药如香菇多糖度；丝裂霉素K、二甲基亚砜（:L3_）为美国3/DB,等已被公认具有较好的免疫调节作用并广泛用于公司出品，植物血凝素（MNU）购自北京大学医学［!］KNO和肿瘤的辅助治疗，但目前尚未见多糖对:K部，噻唑蓝（LPP）为荷兰:*4+;‘,公司出品，粒?巨功能影响的报道，因此，开展多糖类中药对:K影响噬细胞集落刺激因子（QL?K3R）、白细胞介素?@（ST?的研究不仅开拓了多糖类研究的新领域，也有望为解@）为以色列KC28T,[VM;YX82;4+UZ/,公司

5、出品，决:K功能抑制提供安全实用的新制剂(RSPK?K:=%单克隆抗体、M5?K:&&4单克隆抗体为美羧甲基茯苓多糖（4,X[8CB;2+C29Y,4+CB,X,B，国O/8T;D;-6公司产品，M5?LNK"单克隆抗体为美KLM）是中药茯苓的提取物，KLM具有明显的抗肿国;O/8Z4/;-4;公司产品，ST?&"、ST?&%、SR1?!5TS3U瘤作用和免疫调节作用(本实验室曾报道KLM对双抗体夹心定量检测试剂盒为美国O/8Z8*X4;公司NO7转染的人肝癌"("(&!细胞分泌功能具有抑制产品，SR1?"为深圳科兴生物公司产品(［#］作用，本文利用NO7转基因小

6、鼠作为动物模型，$(&%实验动物、分组及处理方法经KLM腹腔注射处理后，观察KLM对:K的作用及NO7转基因小鼠共H%只，由北京大学医学部其与P+&VP+"分化的关系，以探讨多糖类中药对实验动物中心提供，携带有NO7!"#$%、%和&基因，NO7感染模型动物:K的影响(品系：K!

7、安继等：羧甲基茯苓多糖上调"#$转基因小鼠树突状细胞功能::H（%&’%）()随机分配到*+,组、-./0!组和空白对留取培养细胞上清液，L%&B冻存待测-501%)照组，每组各1&只，*+,组采用12*+,溶液腹腔!"0$混合淋巴细胞反应（1234567189:;7<4=4>;.注射，&)3456%&(体重，每7天一次，连续注射3<2:?，(-@）次，-./0!组给予!0%8干扰素，%3&&96%&(体重，按前述方法制备成熟G*细胞，按文献［P］方3空白对照组给予等容量的生理盐水)法，调整细胞浓度至1&645，孵育%AD，分别加入终!"#$%&的分离、纯化与培