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《血小板源性生长因子对体外兔关节软骨细胞的生物学行为的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、438HEJOURNALOFHONEAN口JOINTINJURYV.I.16.N0.6.Nov.20tn血小板源性生长因子对体外兔关节软骨细胞的生物学行为的影响刘刚’胡如’韩一生’脚八摘要目的了解血小板源性生长因子(PDGF)对体外生长的兔关节软骨细胞的生物学效应，为组织工程构件软骨提供理论基础。方法取第3代兔关节软骨细胞体外单层培养，培养液DMEM中以终浓度分别为3,10,30,100,300pg.La的PDGF各作用细胞2,4及6d，以MI，法检测细胞的增殖情况，并在3pg.LtPDGF作用下，采用流式细胞技术进行细胞周期亚时相分析。
2、同时，检测基质中糖醛酸的变化反映蛋白多糖含量的变化。结果结果显示在较低浓度((3pg.L-')PDGF即能明显促进培养软骨细胞的增殖，且以第2d刺激效果最明显;增加因子浓度不能进一步促进细胞增殖。在3-3001ag.Lt浓度下糖醛酸的含量变化不显著。结论PDGF对培养软骨细胞以剂量时间依赖性方式刺激其增殖但对细胞的分泌功能代谢无明显影响。美.词关节软骨细胞:细胞培养:血小板源性生长因子EffectsofPDGFonCulturedRabbitArticularChondroc洲esLiuGang,HuYunyu，HanYisheog.De
3、patrmentofartlurpaedics,Xi,finghospital,FourthMilitaryMedicalUmrrsity.Xi'an.710032Abstract《鞠ectiveTheeffectsof内telet-derivedgrowthfactor(PDGF)onthemetabolismofarticularchoncimcytesandtheirmatrixwereexamined.MethodsThemonolayercellsobtainedfrom4-weekrabbitwereculturedinDME
4、Mcontaining10%fetalcalfserumandweretreatedwithPDGFatdosesrangingfrom3to300pg.L-Iover2,4and6-dayperiods.ResultsWefoundthatPDGFstimu-lated,inadoseandtime-dependentmanner,cellproliferation.Themaximaleffectofstimitationoccurredat3pg.L"'within2-dayaftertreatment.Whilematrixmet
5、abolism,whichweredemonstratedbymeansofglucumnicacidcontent,~noaffected.ConclusionItwasshowedthatcellprolifertimintheculturedaricularchondrocyteswerestimulatedbyPDGF,butchangeofmatrixmetabolism~toseenKeywardsArticularchondrocytes;Culture;PDGF血小板源性生长因子(Platelet-derivedgrowt
6、hman，再次Hanks液冲洗。再将软骨片切成0.1cmx0.5二factor,PDGF)由血小板、单核细胞及内皮细胞等XO.5。的小粒，分别经0.2%胰蛋白酶、0.2%胶原醉(上合成，对间充质来源的细胞有较强的促细胞分裂、海浦东生化试剂厂)，于37℃消化30及60min，用含100ml.L;l小牛血清(杭州四季青生物工程材料研究所)的促基质合成的作用，是体内重要的细胞因子之DMEM(USAGbm公司)终止消化后，过滤除碎块，逮液一[[1.21随着软骨组织工程学的发展，血小板源性经1500r.min'离心3min收集细胞。用培养液洗一次，
7、再生长因子等对种子细胞的生物学效应是本研究领域用培养液悬浮细胞，将细胞密度调到3x105个/ml，接种于的基本课题。本文着重研究在体外状态下，PDGF培养瓶中于37C恒温，50mg.L-'ODZ浓度，饱和湿度中培对关节软骨细胞的作用及其最佳量效关系，为获取养箱(USANuair公司)培养。培养液由DMEM培养基加表型稳定、增殖活跃、且有功能的种子细胞并最终100ml.L-、小牛血清、青链霉素各100"/n0组成。原代细胞为研制工程化软骨提供实验依据。贴壁并融合成单层细胞后，传代培养。1材料与方法1.2PDGF对兔关节软骨细胞增殖的影响1.
8、1软骨细胞的培养用胶原酶消化法[[31分离软骨细胞。1.2.1四哇盐法检测PDGF，对细胞增殖的影响取4周龄新西兰白兔，处死，无菌片状切取肚骨近端，股骨取生长良好的第三代软骨细胞，按每孔2x1
