兔软骨终板细胞的分离培养及退变模型的建立

《兔软骨终板细胞的分离培养及退变模型的建立》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据西南国防医药2009年第19卷第8期·761··论著·兔软骨终板细胞的分离培养及退变模型的建立张勇1，徐永清1，王非2，陆华拓1，朱崇涛1，唐辉1，游永刚1(1．成都军区昆明总医院全军骨科中心(昆明医学院教学医院)，云南昆明650082；2．广州军区广州总医院骨科，广东广州510010)摘要目的：体外分离单层培养兔软骨终板细胞，并通过传代建立软骨终板退变模型。方法：利用酶联合消化法分离软骨终板细胞，比较不同消化时间后，细胞收获数量及存活率，通过传代观察细胞形态变化，并应用甲苯胺蓝染色鉴定软骨终板细胞的表型。结果：1I型胶原酶消化3h后，收获细胞数量最多，且细胞存活

2、率最高；随着传代，软骨终板细胞由三角形逐渐向长梭形转变，蛋白多糖分泌减少，出现反分化等退变现象。结论：体外可单层培养兔软骨终板细胞，通过传代能够建立退变模型。关键词软骨终板；细胞培养；退变；模型中图分类号R681．5文献标识码A文章编号1004—0188(2009)08．0761．03doi：10．3969／j．issn．1004．0188．2009．08．001Cultureofendplatecellsisolatedfromrabbit翻In姆invitroandestablishmentofdegenerationmodelsofcarma群endpateZHAN

3、GYon91，XUYong—qin91，WANGFei2，LUHua—tu01，ZHUChang-ta01，TANGHuil，YOUYong—gan911．DepartmentofOrthopaedicsofPLA，KunmingGeneralHospitalofChengduMilitaryCommand／TeachingHospitalofKunmingMedicalCollege，Kunming，650032，China；2．DepartmentofOrthopaedics，GeneralHospitalofGuangzhouMilitaryCommand，Guan

4、gzhou，510010，China．AbstractObjective：Tocultureendplateceilsinmonolayerisolmedfromrabbitcartilageinvitro．andtoestablishthemodelofdegenerationofcartilageendplatebyserialsubcuhivation．Methods：TheendphtecellsweredigestedandisolatedbyusingcollagenasetypeIIandtrypsinjoinfly．Thecellqualityandsur

5、vivalratewerecomparedamongthetissuesaIkrdigestionfordifferenttime．TheshapeofdifferentpassagecellsWaSobservedandthephenotypeofamilngeendplatecellsWaSidentifiedbytoluidinebluestaining．Results：Themostendplatecellswereharvestedandthehighestcellularsurvivalrateappearedafterdigestionfor3hours．A

6、longwiththepassage。cartilageendplatecellsbecamelongspindlegraduallyinwhichpmteoglycansecreti∞reducedandthesecellsshoweddegenerationsuchasdedifferentiation．Conclusion：ThecartilageendplatecellsofrabbitsⅧbeculturedinmonolayerinvitro．anddegenerationmodelsoftheseceilsCanbeestablishedbypassage．

7、Keywords：cartilageendplate；ceHculture；degeneration；model椎间盘退变严重影响人类健康，但其原因尚不清楚。有研究显示¨J，椎间盘退变始于软骨终板，因此，研究软骨终板分子生物学非常必要。由于体内机制复杂，研究比较困难，如将软骨终板细胞分离后行体外培养，对于椎间盘退变的研究及治疗具有重要价值，同时对建立组织工程学也具有重要意义。本实验通过分离培养兔软骨终板细胞，并建立体外自然退变模型，为体外实验研究提供基础。1材料与方法1．1仪器及试剂倒置相差显微镜(Olympus，日本)；DM