退变兔椎间盘软骨终板细胞培养及其形态学和生物学特征

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1、万方数据·403··临床论著·退变兔椎问盘软骨终板细胞培养及其形态学和生物学特征屈开钛1,徐永清1王非2(1.成都军区昆明总医院骨科,云南昆明650032;2.广州军区总医院骨科,广东广州510010)摘要:目的观察研究兔椎间盘软骨终板的细胞形态及表征,利用正常动物的体细胞传代培养发生功能退变的原理,制作软骨终板细胞体外培养的退变模型。方法酶消化法培养兔椎间盘软骨终板细胞,并用HE和甲苯蓝染色,进行光镜观察;使用免疫组织化学法检测特征性Ⅱ型胶原表达情况,与同种动物不同部位的软骨细胞做对照。结果镜下观察,HE染色见细胞呈多角形.核嗜碱性,圆形或椭

2、圆形,有时见双核,胞浆内可见空泡,有弱嗜酸性。甲苯胺蓝染色可见胞浆有紫红色和红色异染出现。原代细胞与传代细胞之间,形态结构无明显差异,但多次传代后(4代),细胞则逐渐失去其原有形态,变为短梭型细胞,失去分化特性,表达Ⅱ型胶原的量逐渐减少。软骨关节细胞与终板细胞形态学相似。结论本研究提示(1)软骨终板细胞可表达其特征性产物蛋白多糖和Ⅱ型胶原;(2)软骨终板细胞在传代培养时有逐渐退变,失去分化特性的特点;(3)在应用平面培养体系时应选用前3代细胞进行实验。以上几点均为椎间盘软骨终板退变机理研究提供了细胞学基础。关键词:退变;软骨;细胞培养;免疫组织

3、化学中图分类号:R681.53;R392.11文献标识码:A文章编号:1005—7234(2008)05--0403-05TilebiologicalcharacteristicanddegenerationmorphologyoftherabbitendplatecartilagecellcultureQUKai-tail,XUYong-qin91,WANGFei2.(1.DepmtmentofOrthopedics,KunmingGeneralHospitalofChengduMilitaryDistrict.Kunming650032;2

4、.DepartmentofOrthopedics,TheGeneralHospitalofGuangzhouMilitaryDistrict.Guangzhou510010,China)Abstract:ObjectiveToobservethecellmorphousandexosyndromeontherabbitendphtecartilagecellculture,toutilizethedegenerationdevelopedduringnormalanimalbodycellserialsubcuhivation,it.carti

5、lageendplatecellinvitroculturedegenerationmodel.MethodsEnzymedigestioncuhivantetherabbitendplatecartilagecell,toobserveafterHEstainorblueeresylunderlightmicroscope.ToUsetheimmunohistochemicalmethodsdetectthemarkofcollagenIIexpress.Thencomparewiththehomogeneityfromdifferentbo

6、dycartilagecellasacheck.ResultsObserveunderthetightmicroscope,HEstainfoundthecartilageendplatecellwasshapeda8polygon,thenuclearisbasophilia,roundorellipse,theintracytoplasmWflgweakacidophilia,vacuolecouldbesee.TBfoundpmnosusandredmetachmmaticinendochylema.Theprimarycellandth

7、epassagecellhadnodifferenceonmorphous,butafterhighpassage(4generations)thecellcouldlosetheshapeatverybeginninggradually.shaped鼬shortshuttleandthecelldifferentiationtobemissing,themaggofcollagenIIexpressalsodeclininggradually.Thecartilagejointtaken鹬acheckhasthesamecellmorphol

8、ogychangesincomparation.Conclusion(1)CartilageendplatecellCallexpressthemar

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