superarray法初步探讨转化生长因子βtgfβ对牙髓细胞分化的作用机理

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1、万方数据·606·现代121腔医学杂志2008年第22卷第6期JModemSomatol，November2008，Vol22，No．16Superarray法初步探讨转化生长因子p(TGF—p)对牙髓细胞分化的作用机理刘鹤葛立宏【摘要】目的探讨转化生长因子13(TGF—B)对牙髓细胞分化的作用机理。方法分离培养人的牙髓细胞，采用成骨相关因子的superarray方法，研究加入外源性的TGF—B对牙髓细胞分化的影响。结果加入外源性的TGF—B大大地影响了与成骨发生相关基因的表达，双糖链蛋白多糖基因被显著上调，而核心蛋白

2、聚糖基因显著下调。基质金属蛋白酶2，成纤维细胞生长因子，annexlnV以及热休克蛋白47等基因的表述也显著增强。结论TGF一8通过调节蛋白多糖等基因从而在牙髓细胞分化的早期起作用。【关键词】转化生长因子13牙髓细胞双糖链蛋白多糖核心蛋白聚糖EffectofTGF—BOQdentalpulpcelldiffe她．ufiafionHU醌，GELikor

3、g．UniversitySchoolandHospitalofStomatdoSy，＆驷唱100081【Abstract】ObjectiveToinvestigateef

4、fectoftransforminggrowthfllctorB(TGF—p)onthedifferentiationofdentalpulpcells．MethodsDentalpulpcellswereisolatedandcultured．OstengenesissuperarmyanalysisWB8performedtostudytheeffectofexogenousTGF—B011dentalpulpcelldifferentiation．ResultsAfteradditionofTGF—ptothem

5、edia．biglycanexpressionw∞significantlyincreasedwhiledecofinexpressionWKI!significantlydecreased．Besides，theexpressionofMMP2，FGF2，annexinVandheatshockprotein47啪alsoupregulated．ConclusionTGF—Benhanceddentalpulpcelldifferentiationbyregulatingpm,．ngty锄andsomeotheros

6、teogenesis—rellRedgenes．【Keywords】Transforminggrowthfactor8DentalpulpcellsBiglycanDecorin中图分类号：R780．2文献标识码：A转化生长因子13(TGF—B)是一种具有多种生物学功能的细胞因子，能够诱导细胞分化，促进细胞外基质的形成，在牙齿的发育过程中起着重要的调控作用¨。】。但它的作用由于细胞类型的不同以及细胞发育的不同时期而有所不同，作用的分子机理也不完全清楚。Superarray方法是在基因芯片的基础上，将与某一信号传导或发育

7、过程相关的基因集中在一张尼龙膜上，通过同一张膜上阴性对照和阳性对照基因的对比校正，可以比较不同膜间同一基因表达的强度。美国Superarray公司(Bethesda，MD，USA)的humanosteogenesisgenearray膜包含了96个与成骨矿化过程相关的基因【5】。鉴于骨与牙本质在基质分泌以及矿化形成过程中的高度相似性，本研究应用Superarray方法初步探讨TGF—B在牙髓细胞分化早期的作用机理。基金项目：国家自然科学基金资助(30772419)作者单位：100081北京大学口腔医学院·口腔医院通讯作

8、者：葛立宏E—roll：gelh0919@yahoo．啪．∞资料和方法1．牙髓细胞的分离培养：采集患者拔除的阻生无龋的第三磨牙，分离牙髓，3me／n[1lI型胶原矽4mg／mlDispase酶37℃消化l小时，1．5×104细胞／mL接种于培养皿(Primaria，Falcon)中。将牙髓细胞培养于含有10％胎牛血清(Equiteeh—BioInc．KerrviUe，TX)，100ttML—ascorbieacid2一phosphate(WAKO，Tokyo，Japan)，2ramL一谷氨酰胺，100U／Ⅱll青霉素和

9、100∥Inl链霉素(BiofluidsInc，Rockville，MD)的a—MEM培养液中，37℃，5％C02下培养。2．Superarray法：从美国Superarmy公司(Bethesda，MD，USA)购得GEArrayQserieshumanosteogenesisgenearraykit，该基因阵列包含了96个与成骨