rgdraav2提高卵巢癌细胞体外基因转导效率的研究

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1、万方数据第35卷第2期第209页2006年4月华中科技大学学报(医学版)ActaMedUnivSciTeehnolHuazhongV01．35NO．2P．209Apr．2006RGD—rAAV2提高卵巢癌细胞体外基因转导效率的研究方光光1王迪2唐良振3石文芳2△1深圳市第二人民医院妇产科，深圳5180352华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系，武汉4300303武汉市第二医院普外科，武汉430020摘要目的进一步证实精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸一重组腺相关病毒2(RGD-rAAV2)基因表达系统靶向卵巢肿瘤的能力。方法用流式细胞仪(FACS)检测6种卵巢癌细胞株的硫酸肝素蛋白多糖(

2、HSPG)、整合素(integrin)a。B3和integrina。Bs的表达；以及野生型腺相关病毒2(wt—AAV2)对上述卵巢癌细胞感染并介导基因转导的能力；通过配体竞争结合实验进一步验证突变体RGD-rAAV2基因转导的特异性。结果wt—AAV2感染不同卵巢癌细胞的能力各有不同；卵巢癌细胞表达HSPG水平差异很大，而80％卵巢癌细胞表达integrinn，艮或(和)integrind，p。；RGD-rAAV2病毒载体可以有效地感染对wt—rAAV2耐受的卵巢癌细胞SKOV一3ip并介导基因的表达，该效果是非HSPG依赖性的。结论RGD-rAAV2病毒载体具有较高的卵巢肿瘤靶向

3、性，为卵巢癌基因靶向治疗提供了一种新的策略。关键词卵巢癌；精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸；腺相关病毒；基因转导中图法分类号R737．31RGD-modifiedrAAV2MutantVectorsEnhanceGeneTransductioninOvarianCancerCellLinesFangGuangguan91，WangDi2，TangLiangzhen3etal1DepartmentofObstetricsandGynecology，ShenzhenSecondPeoples’Hospital，Shenzhen5180352DepartmentofImmunology，Scho

4、olofBasic"MedicalSciences，TonrgJiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan4300303DepartmentofGeneralSurgery，WuhanSecondHospital，Wuhan430020AhstractObiectiveTOfurtherinvestigatethespecificgenetransductionmediatedbyRGD-rAAV2mutantvectorinovar—iancancercelllines．MethodsTheexpr

5、essionofHSPGandtheintegrina，p3andd，岛wasdetectedbyusingFACSon6humanovariancancercelllines(PA一1，()V一3，()V一4，()VCAR一3，SK()V一3ipandHey)．ThegenetransductionefficienciesmediatedbywildtyperAAV2indifferentovariancancercelllineswereevaluatedbyFACS．LigandscompetitivebindingexperimentwasusedtOassesswheth

6、erRGD-rAAV2wasabletomediatesuccessfullygenetransductioninwt—rAAV2resistanteelllineSKOV一3ip．ResultsWildtyperAAV2variablytransducedthedifferentovariancancercelllines．HSPGexpressionvariedconsidera—blyamongthesixtestedovariancancereelllines，and80％ofcelllinesexpressedmoderateintegrina，p3andd。p5．RGD

7、-rAAV2exertedmoreeffectiveinfectionandhighergenetransductioninSKoV一3ipthanWt—rAAV2．ConclusionIntegrin-retar—getedRGD—rAAV2showedhigherefficacyingenetransductionwhichwasin—dependentofHSPG．whichprovideditsapplica—tionfeasibilityinovarianc