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《rgdraav2提高卵巢癌细胞体外基因转导效率的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、万方数据第35卷第2期第209页2006年4月华中科技大学学报(医学版)ActaMedUnivSciTeehnolHuazhongV01.35NO.2P.209Apr.2006RGD—rAAV2提高卵巢癌细胞体外基因转导效率的研究方光光1王迪2唐良振3石文芳2△1深圳市第二人民医院妇产科,深圳5180352华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系,武汉4300303武汉市第二医院普外科,武汉430020摘要目的进一步证实精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸一重组腺相关病毒2(RGD-rAAV2)基因表达系统靶向卵巢肿瘤的能力。方法用流式细胞仪(FACS)检测6种卵巢癌细胞株的硫酸肝素蛋白多糖(
2、HSPG)、整合素(integrin)a。B3和integrina。Bs的表达;以及野生型腺相关病毒2(wt—AAV2)对上述卵巢癌细胞感染并介导基因转导的能力;通过配体竞争结合实验进一步验证突变体RGD-rAAV2基因转导的特异性。结果wt—AAV2感染不同卵巢癌细胞的能力各有不同;卵巢癌细胞表达HSPG水平差异很大,而80%卵巢癌细胞表达integrinn,艮或(和)integrind,p。;RGD-rAAV2病毒载体可以有效地感染对wt—rAAV2耐受的卵巢癌细胞SKOV一3ip并介导基因的表达,该效果是非HSPG依赖性的。结论RGD-rAAV2病毒载体具有较高的卵巢肿瘤靶向
3、性,为卵巢癌基因靶向治疗提供了一种新的策略。关键词卵巢癌;精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸;腺相关病毒;基因转导中图法分类号R737.31RGD-modifiedrAAV2MutantVectorsEnhanceGeneTransductioninOvarianCancerCellLinesFangGuangguan91,WangDi2,TangLiangzhen3etal1DepartmentofObstetricsandGynecology,ShenzhenSecondPeoples’Hospital,Shenzhen5180352DepartmentofImmunology,Scho
4、olofBasic"MedicalSciences,TonrgJiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan4300303DepartmentofGeneralSurgery,WuhanSecondHospital,Wuhan430020AhstractObiectiveTOfurtherinvestigatethespecificgenetransductionmediatedbyRGD-rAAV2mutantvectorinovar—iancancercelllines.MethodsTheexpr
5、essionofHSPGandtheintegrina,p3andd,岛wasdetectedbyusingFACSon6humanovariancancercelllines(PA一1,()V一3,()V一4,()VCAR一3,SK()V一3ipandHey).ThegenetransductionefficienciesmediatedbywildtyperAAV2indifferentovariancancercelllineswereevaluatedbyFACS.LigandscompetitivebindingexperimentwasusedtOassesswheth
6、erRGD-rAAV2wasabletomediatesuccessfullygenetransductioninwt—rAAV2resistanteelllineSKOV一3ip.ResultsWildtyperAAV2variablytransducedthedifferentovariancancercelllines.HSPGexpressionvariedconsidera—blyamongthesixtestedovariancancereelllines,and80%ofcelllinesexpressedmoderateintegrina,p3andd。p5.RGD
7、-rAAV2exertedmoreeffectiveinfectionandhighergenetransductioninSKoV一3ipthanWt—rAAV2.ConclusionIntegrin-retar—getedRGD—rAAV2showedhigherefficacyingenetransductionwhichwasin—dependentofHSPG.whichprovideditsapplica—tionfeasibilityinovarianc
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