酶解制备高得率大豆肽工艺条件优化

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1、万方数据2009，No．11C搏ERE铷AL&F饲EED料INDlUSCEREALFEEDNDUSTtRY商’、’‘j●，酶解制备高得率大豆肽工艺条件优化张毅，华欲飞，孔祥珍，张彩猛，康悦丽(江南大学食品学院，江苏无锡214122)摘要：用Alcalage碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽。通过单因素实验研究了底物质量分数、酶解pH、酶解温度、加酶量对蛋白水解度和大豆肽得率的影响，并通过响应面分析法对酶解条件进行了优化，得出最佳条件为：底物质量分数5％，酶解pH9．5，酶解温度55℃，加酶量5400U／g蛋白。在此条件下，大豆分离

2、蛋白水解度为20．16％，大豆肽得率为92．30％。关键词：大豆肽；Alcalage碱性蛋白酶；响应面分析；水解度；得率中图分类号iTS201文献标识码：A文章编号：1003—6202(2009)1l一0016一04OptimizationofEnzymaticHydrolysisConditionsforPreparationofHi【gh—yieldSoyPeptidesABSTRACT：Soypeptideswerepreparedfromsoyproteinisolate(SPI)hydrolyzedbyAlealageen

3、zyme．Intheanalysisofsinglefac-tots，theinfluenceofsubstrateconcentration，pH，temperatureandenzymeconcentrationontheSPIhydrolysisdegree(DH)andyieldofsoypoptideswerestudied．弧eresponsesurfaceanalysiswagusedtooptimizetheconditionofenzymehydrolysis．Theresultsshowedthattheopti

4、mumconditionsforpreparinghish—yieldsoypeptides'were：substrateconcentration5％(massfraction)，pH9．5，andtemperature55qCandenzymeconcentration5400U／gprotein．Undertheseconditions．thehydrolysisdegreeofsoyproteinisolateWag20．16％andtheyiddofsoypeptidesWaS92．30％．KEYWORDS：soypopt

5、ides；Alealasealkalipmteage；responsesurfaceanalysis；degreeofhydrolysis(DH)；yield大豆肽是以大豆蛋白为原料，经酶法水解、化学方法水鹪或微生物发酵¨J，分离纯化得到的3—6个氨基酸组成的低分子量肽的混合物，平均分子量小于l000n，主要分布在300～700u之间。大豆肽具有高溶解度、低黏度、酸性条件不沉淀、热稳定性好、吸水持水能力强、软化食品凝胶等功能特性旧。J。研究表明，大豆肽氨基酸平衡良好、易消化吸收、抗原性低、具有降低血清胆固醇“、降血压∞1、促进脂肪代

6、谢、促进肌红细胞复原、抗氧化等生理功能，对于增强体质、提高机体免疫能力冲-7]、延缓衰老等方面具有很好的作用18”1。在食品领域，大豆肽已经用于开发功能保健食品、医疗食品、运动食品、发酵食品、高蛋白食品、焙烤食品以及各种糖果、冷饮、功能性饮料等川。大豆肽具有良好的吸湿性和保湿性，因此。可用作保湿性添加剂制造各种化妆品，还可以添加到洗发剂和护发素中，起到保湿、营养护发的效果¨¨“J。大豆肽作为一种优质新型的大豆深加工产品，在食品、医药、日用化工领域中的应用日益广泛，并显示出诱人的前景。Alealage碱性蛋白酶是由选育的地衣芽胞杆菌生

7、产而得，主要用于水解各种蛋白质，是一种高效的细菌蛋白酶，其主要成分是枯草芽孢杆菌活菌蛋白酶A，属于内切蛋白酶㈦。大豆分离蛋白酶解制备大豆肽的主要限制性因素是：蛋白浓度较高，水解产物在酶的作用下会进一步聚集‘”。，水解度不高，得率较低。本研究通过醇洗的方法预处理豆粕，并通过单因素实验和响应面优化设计，系统研究了Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的条件，得出最佳工艺参数，为工业化生产大豆肽提供理论依据，对提高大豆肽得率和产品品质，降低大豆肽生产成本，具有重要的现实意义。1材料和方法1．1材料与仪器低温脱脂豆粕，山东万得福粮油有限

8、公司；Alealase2．4LFG碱性蛋白酶：诺维信(中国)生物技术有限公司，酶活180000u／rIll；其他化学试剂，均为国产分析纯。GX一2005高温循环器，上海比郎仪器有限公司；90型恒温磁力搅拌器，上海沪西分析仪器厂；电子天