酶解制备海蜇多肽工艺条件优化【文献综述】

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1、毕业论文文献综述药学酶解制备海蜇多肽工艺条件优化摘要：本文概述了酶解制备生物活性肽的国内外研究进展，介绍了蛋白酶解工艺流程的主要步骤，指出了酶解工艺的发展趋势。关键词：酶解制备；生物活性肽；蛋白质；生物活性肽是指那些有特殊生理活性的肽类，是世界上药物及保健品研究的热点，目前通过蛋白酶解生产的活性肽主要来源于陆地的蛋白源，如牛乳酯蛋白、大豆蛋白、玉米醇溶蛋白等。海洋生物为了适应高盐、高压、低温、缺氧等极端的海洋生境，其蛋白质的氨基酸组成或序列都与陆地生物蛋白有很大的不同，在种类和数量上也远远超过陆地蛋白资源。近年来，随着生物技术和酶制剂产业的不

2、断发展，酶法水解蛋白质以达到对蛋白质进行改性的应用越来越普遍。在酶解蛋白的产物中，活性肽由于具有优良的持水性、胶凝性、乳化性、溶解性、渗透性而增加了其应用的范围，更为重要的是水解后的活性肽增加了原蛋白质或组成氨基酸所不具备的重要生理功能,如抗肿瘤、提高免疫力、抗菌、镇痛、促进矿物质吸收和防治肝脑疾病等，因此己被广泛应用于食品、化妆品和医药等行业。本文以检索项为“题名”，检索词为“酶解”并含“活性肽”对中国期刊全文数据库进行检索，共检索出62篇文章；以检索项为“题名”，检索词为“酶解”并含“工艺”对中国期刊全文数据库进行检索，共检索到546篇相

3、关文献。英文文献在"ScienceDirect"网站检索，检索词为：enzymatichydrolysis，共检索出114848篇文献，检索词为biologicallyactivepeptides时，共检索出54255篇文献。1、生物活性肽的生理活性生生物活性肽是具有优化机体代谢环境、有益于机体健康的一类活性多肽。这类多肽的活性功能依赖于其分子量大小和氨基酸组成成份及排列顺序，它们通常作用于机体的消化系统、心血管系统、免疫系统和神经系统等多种生命代谢系统，最终起到提高机体免疫力、减少慢性疾病发生的作用。2、生物活性肽的制备生理活性肽的制备方法

4、很多，归纳起来主要包括以下几种：2.1分离、纯化法天然活性肽采用盐析、层析、沉淀等物理方法，分离纯化出以天然形式存在的活性多肽。由于此方法的原料来源、种类有限，因此限制了其广泛应用。2.2合成法2.2.1化学合成法，即把要合成多肽的氨基酸羧基附着在载体上，然后从氨基端或羧基端逐步增长肽链。2.2.2酶合成法，即用蛋白酶来催化合成肽；2.2.3DNA重组技术，即先从复杂的基因组中分离出带有目的基因的DNA片断，然后将此片断克隆至适当的载体并采用特定方法将其导入受体细胞，通过细胞表达获得所需要的活性肽。合成法虽可合成有生理功能的活性肽，但反应不完

5、全，少数肽链上氨基酸缺损，纯度不高，分离困难，且副反应物多，成本高等，不利于推广应用。2.3水解法2.3.1化学水解法，以天然蛋白质为原料，经酸或碱水解得到多肽。化学水解法虽然工艺简单，然而难以控制水解程度，容易将小肽继续水解为氨基酸，并且在水解过程中，氨基酸易受到破坏，进而影响肽的结构及功能（碱水解尤为突出）。此外，化学法水解过程中，所用酸或碱的浓度高，水解完成后须除酸或除碱，成为工艺过程中的主要工序。2.3.2酶解法，通过选用合适的蛋白酶，水解蛋白质的多肽链，使其释放出功能性的肽片段。酶解法可以生产大量的小肽并且成本较低，此外其底物、反应

6、剂不会对反应环境造成危害。酶解法由于具有以上优点而广泛应用于实际生产。3、酶解工艺酶解制备活性肽的工艺流程为：蛋白原料→预处理→酶解→灭酶→精制→干燥→成品→检测根据原料蛋白的性质，采用热处理或酸处理的方法使蛋白质变性，然后选择合适的蛋白酶，在其最适水解条件下水解蛋白获得水解度高，活性肽含量丰富的肽溶液。水解液经灭酶、脱苦、脱盐、浓缩等精制工艺后，再经喷雾干燥，即获得富含生物活性肽的多肽产品。3.1预处理为了提高酶解效率，一般对原料蛋白作变性预处理，主要方法包括：3.1.1热处理。在沸水浴中煮10～60min后，直接酶解加工或离心收集沉淀。酶

7、解前的热处理只能提高反应的水解度，而对产物的生理活性没有影响。3.1.2强酸处理。用适当浓度强酸处理蛋白原料，离心收集沉淀，并用水悬浮洗涤沉淀数次，去掉余酸。蛋白质在不同变性程度时对水解度影响很大，变性程度过高反而不利于水解。因此需要根据水解时间长短在保证水解液不变质的条件下适当预处理。3.2酶解3.2.1蛋白酶的选择根据蛋白酶的来源，常选用的蛋白酶分为：动物性蛋白酶（胰蛋白酶，胃蛋白酶等）、植物蛋白酶（木瓜蛋白酶，菠萝蛋白酶等）和微生物蛋白酶（枯草杆菌蛋白酶，黑曲酶等）；根据蛋白酶作用的最适pH值来分，可分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白

8、酶。由于蛋白质水解液中一些苦肽氨基端的暴露而使得水解液带有苦味，因此，一些风味酶也常常被用于产品风味的调节加工中。一般根据蛋白原料的组成、酶的特性，以及实验目的选择