酶解制备海蜇多肽工艺条件优化【毕业论文】

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1、本科毕业论文（20届）酶解制备海蜇多肽工艺条件优化专业：药学13目录摘　要1Abstract21前言32材料与试剂42.1材料42.2试剂42.3主要设备与仪器43试验方法53.1预处理53.2水解酶选取53.3甲醛滴定法53.4单酶水解条件的优化63.5抗肿瘤活性的测定63.5.1酶解液的分离、提纯63.5.2细胞增殖抑制率的测定64结果与讨论64.1水解酶的筛选64.2正交试验74.3抗肿瘤活性测定95结论11参考文献11致谢13附录Ⅰ英文翻译14附录Ⅱ英文原文2113[摘　要]目的：优化海蜇的酶解制备工艺；方法：以海蜇为材料，采用碱性蛋

2、白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶三种蛋白酶分别在各自的酶解条件下对海蜇蛋白进行酶解，确定最佳蛋白酶，再经正交试验确定最佳酶解条件。结果：海蜇酶解的最佳匀浆为碱性蛋白酶在pH为10.0，温度为55℃，料液比为1:2，加酶量为1000U/g，时间为4h的酶解条件下对海蜇进行酶解，酶解液中的氨基氮含量为41.3mg/100ml；结论：碱性蛋白酶酶解效果最佳，且具有良好的肿瘤抑制效果。[关键词]海蜇；酶解；活性肽；工艺优化13EnzymaticHydrolysisProcessOptimizationofpeptidejellyfish【Abstract】

3、Objective：Optimizationofenzymaticpreparationofjellyfish.Methods:Thejellyfishasmaterials,alkalineprotease,papainandproteasetrypsinwerethreeconditionsintheirrespectiveenzymatichydrolysisofthejellyfishprotein,todeterminetheoptimalprotease,andthentheorthogonaltesttodeterminethe

4、optimumhydrolysisconditions.Results：ThebestjellyfishenzymehomogenatetopH10.0alkalineprotease,thetemperatureis55℃,liquidratioof1:2,enzymeamountof1000U/g,4hofhydrolysistimeundertheconditionjellyfishweredigestedhydrolyzateaminonitrogencontentinthe41.3mg/100ml;Conclusion：Thebes

5、talkalineproteaseenzyme,andhasgoodtumorsuppression.【Keywords】Rhopilemaesculentum；Hydrolysate；ActivePeptide；Processoptimization131前言海蜇（Rhopilemaesculentum）俗称“鮓鱼”，隶属于腔肠动物门（Coelentera）、钵水母纲（Scyphozoa)、根口水母目（Rhizostomeae）、根口水母科（Rhizostomatidae），海蜇属（Rhopilema)的无缘膜动物。海蜇蜇体呈伞盖状，通体半

6、透明，青色、白色或微黄色，伞径可超过45cm，最大可达1m，呈半球形，上伞隆起，中胶层发达；下伞较薄，边缘具发达环肌，能收缩、运动[1]。世界已记录的海蜇属只有海蜇（R.esculentum）、黄斑海蜇（R.hispidum）、棒状海蜇（R.rhopalophorum）和疣突海蜇（R.verrilli）四种。前三种在我国已有记录。棒状海蜇个体小（40～100mm），伞部的中胶层薄、数量稀少，所以没有捕捞价值。作为渔业生产的主要为海蜇和黄斑海蜇两种[2]。海蜇对高血压、慢性气管炎、哮喘、热痰咳嗽、胃溃疡、单纯性甲状腺肿和颈淋巴结肿等有一定疗效[

7、3]。药理研究证明，海蜇头原液有类似乙酰胆碱的作用，能降低兔的血压，并可使兔的体表（耳廓）血管及蛙的周身血管舒张，因此能够扩张血管，降低血压[4]。美国Auburn大学报道，用低剂量海蜇胶原质喂养实验鼠可显著减少抗原引起的关节炎发生和减轻症状[5]。民间以海蜇皮、海带和海藻等量炖服有抑制癌细胞扩散作用。海蜇皮和鲜猪血炖服，可治哮喘。海蜇皮外贴还可以治疗痛风等症[6-7]。海蜇的蛋白占其干重的50％，其氨基酸成分种类齐全，必须氨基酸含量丰富。生长在海洋这一特殊环境（高盐、高压、缺少光照等）中的海洋生物，在其生长和代谢过程中，产生并积累了大量具有

8、特殊化学结构的蛋白氨基酸序列，在这些种类繁多的海洋蛋白氨基酸序列中，潜在着许多具有生物活性的氨基酸序列，用特异的蛋白酶水解，就能释放出有活性的肽段。肽与蛋白质都是由