酶解制备海蜇多肽工艺条件优化【开题报告】

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1、毕业设计开题报告药学酶解制备海蜇多肽工艺条件优化一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义生物活性肽是指那些有特殊生理活性的肽类，是世界上药物及保健品研究的热点，目前通过蛋白酶解生产的活性肽主要来源于陆地的蛋白源，如牛乳酯蛋白、大豆蛋白、玉米醇溶蛋白等。海洋生物为了适应高盐、高压、低温、缺氧等极端的海洋生境，其蛋白质的氨基酸组成或序列都与陆地生物蛋白有很大的不同，在种类和数量上也远远超过陆地蛋白资源。在种类繁多的海洋蛋白氨基酸序列中，潜在着许多具有生物活性的氨基酸序列，用特异的蛋白酶水解，就能释放出有活性的肽段。过去两个世纪，人们通过物理、化学和酶法对食品蛋白质进行

2、改性，在改变蛋白质的功能方面做了广泛的研究。近年来，随着生物技术和酶制剂产业的不断发展，酶法水解蛋白质以达到对蛋白质进行改性的应用越来越普遍。在酶解蛋白的产物中，活性肽由于具有优良的持水性、胶凝性、乳化性、溶解性、渗透性而增加了其应用的范围，更为重要的是水解后的活性肽增加了原蛋白质或组成氨基酸所不具备的重要生理功能,如抗肿瘤、提高免疫力、抗菌、镇痛、促进矿物质吸收和防治肝脑疾病等，因此己被广泛应用于食品、化妆品和医药等行业。在国外，对生物活性肽的研究开发较早，因此在利用海洋蛋白资源开发活性肽方面也积累了丰富的经验，特别是日本、美国和欧洲等发达国家把海洋生物中活性肽系列产品的

3、研究与开发作为发展海洋药物和保健食品的一个重要方向，并取得了丰硕的成果。目前，许多的生物活性肽产品已经实现了工业化。国外对海洋蛋白酶解的研究主要分为四个方面的内容:(1)海洋蛋白水解的蛋白酶的选择及其条件的优化;(2)海洋蛋白水解物(肽)的加工、功能特性的研究;(3)海洋蛋白水解物(肽)的氨基酸组成、分子量分布以及营养价值的研究;(4)海洋蛋白水解物(肽)的生理活性的研究及其应用。近年来，鉴于国外海洋蛋白水解制备生物活性肽方面研究的迅猛发展，我国在该领域的研究工作也逐步加强。虽然，我国近年在酶解制备功能肽及其功能性产品方面取得了一定的进展，但各方面也存在明显不足，海洋活性肽

4、制备和开发的部分关键性技术尚未得到真正突破，主要表现在：3（1）酶解工艺存在明显不足：相对于陆源蛋白，海洋蛋白的酶解工艺研究较晚，特别是海洋蛋白资源的组成和序列的多样性，使得仅仅依靠搬用陆地蛋白资源的酶解工艺并不能完全解决海洋多肽的制备，因此，针对生物样品的蛋白组成，筛选合适的蛋白酶解工艺是海洋功能肽开发的前提。（2）酶解产物制备技术明显落后：虽然已对部分海洋蛋白资源进行了功能肽的开发，但是所开发的产品绝大多数为酶解后的混合物，产品成分复杂，稳定性难以保障，严重影响了产品的质量。因此，综合利用现代的分离技术（色谱技术、膜分离技术）实现制备工艺的突破是产业化的关键。（3）海洋

5、活性肽的开发筛选体系有待加强：目前，国内海洋功能肽的开发基本停留在酶解工艺和产物的制备层次上，对于后续的产品开发目标不够明确，因此，根据市场需求，建立合适的筛选模型，有目的的进行功能肽的开发，对于海洋活性肽的开发具有导向作用。海蜇(Rhopilemaesculentum)俗称“鮓鱼”，隶属于腔肠动物门(Coelentera)、钵水母纲(Scyphozoa)、根口水母目(Rhizostomeae)、根口水母科(Rhizostomatidae)，海蜇属(Rhopilema)的无缘膜动物。海蜇的蛋白占其干重的50％，其氨基酸成分种类繁多，必须氨基酸含量丰富。海蜇等海洋生物为了适应

6、高盐、高压、低温、缺氧等极端的海洋生活环境，其蛋白质的氨基酸组成与序列都与陆地生物蛋白有很大的不同，在种类和数量上也远远超过陆地蛋白资源。在种类繁多的海洋生物蛋白氨基酸序列中，潜在着许多具有生物活性的氨基酸序列，用特异的蛋白酶水解，就能释放出有活性的肽段。但是，海蜇抗肿瘤活性肽的研究较少。因此，本实验拟利用浙江沿海丰富的水产品资源，运用蛋白质提取及纯化工艺，对海蜇蛋白进行深度开发和利用，生产出具有特殊功能的活性肽产品，不仅可以满足人们强身健体的需要，而且可以产生巨大的经济效益，对于浙江海洋经济发展将起到积极的推动作用，也会对海蜇的高值化加工起到示范作用。二、研究的基本内容，

7、拟解决的主要问题：1研究的主要内容借鉴目前陆地蛋白资源成功的酶解技术，以海蜇为原料，综合考察不同的蛋白水解酶及其组合在不同的条件下产生活性肽的数量和功能，建立合理、有效的酶解工艺，为制备分子量集中、产量高、活性强的功能肽奠定基础。2研究解决的主要问题2.1酶解制备海蜇活性肽蛋白酶的选取；2.2酶解制备海蜇活性肽酶解条件的确定；3三、研究步骤、方法及措施：1、预处理：海蜇购自舟山市场，用温水浸泡洗涤以除去明矾和盐分并沥干，切成条状，于水中浸泡12h，取出沥干，放入DS-1高速组织捣拌机中捣碎匀浆，-20℃冷藏备用；2