丹参水溶性成分的纯化工艺和质量研究

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1、丹参水溶性成分的纯化工艺和质量研究张秋燕、崔翰明、张春光、王阶*中国中医科学院广安门医院摘要目的:提取纯化丹参中水溶性酚酸类有效成分,并进行相应的质量分析研究。方法:以HPLC检测丹酚酸B的含量,采用单因素和正交实验优化丹参的提取工艺;采用大孔吸附树脂方法纯化丹参水溶性成分;并对丹参及其提取物的水溶性成分进行HPLC指纹图谱研究,制定相应质量标准。结果:丹参中主要水溶性成分丹酚酸B的提取转移率达85%,提取纯化物中含丹酚酸B大于65%、丹参素8%,其他丹酚酸12%。相应HPLC指纹图谱分析方法可有效分析和鉴别主要水溶性特

2、征峰。结论:本方法能够快速高效分离纯化丹参水溶性成/组分,得到较高纯度的丹参总酚酸;HPLC指纹图谱分析方法的精密度、重现性良好。关键词:丹酚酸;柱层析;HPLC;指纹图谱[Abstract]Objective:Toextractandpurifytheactivecomponentsofsalviamiltiorrhiza,andtodeterminatetherelevantqualityanalysis.Methods:TheHPLCmethodofsalvianolicacidBwasestablished.Th

3、efactorsinfluencingtheextractionwereinvestedwithasingle-factorandorthogonaldesign.Thewater-solublecomponentsofsalviamiltiorrhizawerepurifiedwithmacroporousresin.TheHPLCfingerprintofSalviamiltiorrhizaanditspurifiedextractwerestudy,andthequalityspecificationwasesta

4、blished.Results:ThetransferrateofsalvianolicacidBwasupto85%,andthecontentsofsalvianolicacidBandtanshinolwererespectively65%and8%,andothersalvianolicacidabout12%.TheHPLCfingerprintanalysismethodcaneffectivelyanalyzeandidentifythemaincharacteristicpeaksofwater-solu

5、blecomponents.Conclusion:ThismethodcanquicklyandefficientlypurifiedSalviamiltiorrhizawater-solublecomponents.Thesalvianolicacidcomponentsthathadhigherpuritywereobtained.TheHPLCfingerprintmethodhasgoodprecisionandreproducibility.KeyWords:salvianolicacid;columnchro

6、matography;HPLC;fingerprint丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参(SalviamiltiorrhizaBunge)的干燥根及根茎。丹参性苦,微寒;归心、肝经;具有祛瘀止痛,活血通经,清心除烦等功效。是一味普遍用于心血管疾病治疗的传统中药。现代研究发现丹参的有效成分主要分为两大类:丹酚酸类和丹[1]参酮类。丹酚酸类化合物以抗氧化、抗凝血和细胞保护作用为主;而丹参酮类化合物以改[2][3]善血液循环、抗菌和抗炎作用为主,具有显著的抗菌和温和的性激素样作用。丹酚酸类是由不同个数的丹参素(β-3,4-二羟苯乳酸

7、,β-3,4-dihydroxybenyllacticacid)和咖啡酸缩合而成,主要有丹酚酸A、B、C、迷迭香酸(Rosmarinicacid)和丹参素、原儿茶醛等。本研究以HPLC检测丹酚酸B的含量,采用醇提和水提相结合的方法,分别提取丹参脂溶性和水溶性成分,单因素和正交实验优化丹参的提取工艺;采用大孔吸附树脂柱层析方法纯化丹参水溶性成分,通过试验寻找合适的柱填料、洗脱剂,并优化各工艺参数等;并对丹参及其提取纯化物进行HPLC指纹图谱研究,制定相应质量标准。1.仪器与材料1.1仪器Agilent1200型液相色谱仪;

8、AgilentTCC18(150*4.6mm,5μm)色谱柱和保护柱;Kromasil,100-5C18(250*4.6mm,5μm)色谱柱;FA2104型万分之一级电子天平;高纯水机(Millipore);SY7200DH超声仪;DRT-TW型调温电热套;玻璃层析柱(30×410mm)。1.2试剂和试药甲醇和乙腈(

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