丹参水溶性成分的纯化工艺和质量研究

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1、丹参水溶性成分的纯化工艺和质量研究张秋燕、崔翰明、张春光、王阶*中国中医科学院广安门医院摘要目的：提取纯化丹参中水溶性酚酸类有效成分，并进行相应的质量分析研究。方法：以HPLC检测丹酚酸B的含量，采用单因素和正交实验优化丹参的提取工艺；采用大孔吸附树脂方法纯化丹参水溶性成分；并对丹参及其提取物的水溶性成分进行HPLC指纹图谱研究，制定相应质量标准。结果：丹参中主要水溶性成分丹酚酸B的提取转移率达85%，提取纯化物中含丹酚酸B大于65%、丹参素8%，其他丹酚酸12%。相应HPLC指纹图谱分析方法可有效分析和鉴别主要水溶性特

2、征峰。结论：本方法能够快速高效分离纯化丹参水溶性成/组分，得到较高纯度的丹参总酚酸；HPLC指纹图谱分析方法的精密度、重现性良好。关键词：丹酚酸；柱层析；HPLC；指纹图谱[Abstract]Objective:Toextractandpurifytheactivecomponentsofsalviamiltiorrhiza,andtodeterminatetherelevantqualityanalysis.Methods:TheHPLCmethodofsalvianolicacidBwasestablished.Th

3、efactorsinfluencingtheextractionwereinvestedwithasingle-factorandorthogonaldesign.Thewater-solublecomponentsofsalviamiltiorrhizawerepurifiedwithmacroporousresin.TheHPLCfingerprintofSalviamiltiorrhizaanditspurifiedextractwerestudy,andthequalityspecificationwasesta

4、blished.Results:ThetransferrateofsalvianolicacidBwasupto85%,andthecontentsofsalvianolicacidBandtanshinolwererespectively65%and8%，andothersalvianolicacidabout12%.TheHPLCfingerprintanalysismethodcaneffectivelyanalyzeandidentifythemaincharacteristicpeaksofwater-solu

5、blecomponents.Conclusion:ThismethodcanquicklyandefficientlypurifiedSalviamiltiorrhizawater-solublecomponents.Thesalvianolicacidcomponentsthathadhigherpuritywereobtained.TheHPLCfingerprintmethodhasgoodprecisionandreproducibility.KeyWords:salvianolicacid；columnchro

6、matography；HPLC；fingerprint丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参（SalviamiltiorrhizaBunge）的干燥根及根茎。丹参性苦，微寒；归心、肝经；具有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦等功效。是一味普遍用于心血管疾病治疗的传统中药。现代研究发现丹参的有效成分主要分为两大类：丹酚酸类和丹[1]参酮类。丹酚酸类化合物以抗氧化、抗凝血和细胞保护作用为主；而丹参酮类化合物以改[2][3]善血液循环、抗菌和抗炎作用为主，具有显著的抗菌和温和的性激素样作用。丹酚酸类是由不同个数的丹参素（β-3,4-二羟苯乳酸

7、，β-3,4-dihydroxybenyllacticacid）和咖啡酸缩合而成，主要有丹酚酸A、B、C、迷迭香酸(Rosmarinicacid)和丹参素、原儿茶醛等。本研究以HPLC检测丹酚酸B的含量，采用醇提和水提相结合的方法，分别提取丹参脂溶性和水溶性成分，单因素和正交实验优化丹参的提取工艺；采用大孔吸附树脂柱层析方法纯化丹参水溶性成分，通过试验寻找合适的柱填料、洗脱剂，并优化各工艺参数等；并对丹参及其提取纯化物进行HPLC指纹图谱研究，制定相应质量标准。1.仪器与材料1.1仪器Agilent1200型液相色谱仪；

8、AgilentTCC18（150*4.6mm，5μm）色谱柱和保护柱；Kromasil，100-5C18（250*4.6mm，5μm）色谱柱；FA2104型万分之一级电子天平；高纯水机（Millipore）；SY7200DH超声仪；DRT-TW型调温电热套；玻璃层析柱（30×410mm）。1.2试剂和试药甲醇和乙腈（