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时间:2018-11-09
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1、丹参水溶性成分与脂溶性成分抑菌作用的考察作者:周静李惠芬王洪志骆达杜凡王宇歆吴咸中【摘要】 目的考察丹参中水溶性成分与脂溶性成分的含量及其抑菌作用。方法采用HPLC法测定丹参素、原儿茶醛和丹参酮ⅡA含量;以平板二倍稀释法统计最小抑菌浓度(MIC),探讨其体外抑菌作用。结果丹参水溶性成分和脂溶性成分均对金黄色葡萄球菌标准株、临床株;大肠埃希菌标准株;铜绿杆菌标准株;大肠杆菌临床株1、临床株2有抑菌作用,两种抑菌药液均对金黄色葡萄球菌标准株、临床株作用最强,对大肠埃希菌标准株作用相对较弱;水溶性成分的抑菌作用强于脂溶
2、性成分。结论丹参水溶性成分与脂溶性成分均具有一定的抑菌活性,提示该作用可进一步开发利用。【关键词】丹参丹参素原儿茶醛丹参酮ⅡA抑菌 Abstract:ObjectiveToinvestigatethecontentofliposolubleandhydrosolubleconstituentsinSalviamiltiorrhizaBge.anditsantibacterialeffect.MethodsThecontentsofdanshensu,protocateehualdehydeandsalviolⅡA
3、inedbyHPLCandtheantimicrobialeffectethodofplatedoubling-dilution.ResultsTheliposolubleandhydrosolubleconstituentsofSalviamiltiorrhizaBge.hadsomeinhibitiononallbacterialspeciesinourexperiments,especiallythestrongestonStaphylococcusaureus,theoreover,thehydrosolu
4、bleconstituenthadstrongereffectthantheliposolubleone.ConclusionTheantibacterialactiveponentsofSalviamiltiorrhizaBge.needtomakebetteruse. KeyiltiorrhizaBge.;Danshensu;Protocateehualdehyde;SalviolⅡA;Antibacterialeffect 丹参SalviamiltiorrhizaBge.属唇形科植物,其药用部位为干燥根及
5、根茎,味苦,性微寒[1],归心、肝经,具有祛淤止痛、活血通经、清心除烦等功效[2],临床广泛用于活血化瘀、宁心安神、抗菌消炎和心脑血管疾患等症,是国内外现代化中药研究的热点品种之一[3]。丹参的化学成分主要为水溶性成分和脂溶性成分两部分。本文比较了多种提取方法,建立了从同一样品中分步先后提取脂溶性与水溶性成分,并应用高效液相色谱法优化筛选了色谱条件,使之在同一梯度条件下完成丹参中3种活性成分丹参素、原儿茶醛和丹参酮ⅡA的定量分析。丹参有关心血管方面的药理研究已相当深入,但其抑菌方面的研究报道较少,多为水煎液或对照品
6、丹参酮ⅡA的抑菌报道,未见丹参的抑菌有效部位及其成分的抑菌研究。本实验先于定量之后,准确把握抑菌浓度再行相关抑菌研究,以期为临床应用其抗菌消炎作用提供科学依据。 1仪器与材料 美国SSI高效液相色谱仪,分析之星色谱工作站,乙腈为色谱纯、水为双蒸水、磷酸为分析纯。丹参素钠对照品,原儿茶醛对照品,丹参酮ⅡA对照品(中国药品生物制品检定所)。丹参药材购自天津中药饮片厂(经天津中医药大学第一附属医院尚英和药师鉴定)。 金黄色葡萄球菌标准株,临床株;大肠埃希菌标准株;铜绿杆菌标准株;大肠杆菌临床株1,临床株2(均由天津
7、医科大学微生物教研室提供)。 2方法和结果 2.1水溶性成分丹参素、原儿茶醛和脂溶性成分丹参酮ⅡA的测定 2.1.1色谱条件色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A:0.4%磷酸水溶液,流动相B:乙腈,流速为1.0ml/min,检测波长为275nm,柱温40℃,梯度洗脱:0~10min,4%B;10~16min,10%B;16~20min,15%B;20~30min,20%B;30~50min,70%B;50~58min,100%B。 2.1.2对照品溶液的制备精密称取一定量原儿茶醛、丹参素钠对照
8、品,各置10ml棕色容量瓶中,加70%甲醇定容,均配成1mg/ml溶液,后者相当于丹参素0.875mg/ml,另称一定量丹参酮ⅡA对照品,以甲醇溶解按上述方法配成0.2322mg/ml的溶液;分别吸取丹参素钠、原儿茶醛和丹参酮ⅡA标准溶液各400,25,60μl于1ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,即得0.4mg/ml丹参素钠、0.025mg/ml原儿茶醛和0
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