肾间质纤维化时凋亡抑制蛋白Livin的表达

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1、分类号：R725；R692单位代码：10159密级：公开学号：201520212硕士学位论文中文题目：肾间质纤维化时凋亡抑制蛋白Livin的表达英文题目：ExpressionofinhibitorofapoptosisproteinLivininrenalinterstitialfibrosis论文作者：肖静指导教师：姜红教授学科专业：儿科学完成时间：2018年3月Ⅰ中国医科大学硕士学位论文肾间质纤维化时凋亡抑制蛋白Livin的表达Expressionofinhibitorofapoptosisproteinlivininren

2、alinterstitialfibrosis论文作者肖静指导教师姜红教授申请学位医学硕士培养单位第一临床学院一级学科临床医学二级学科儿科学研究方向肾间质纤维化论文起止时间2016年10月—2018年3月论文完成时间2018年3月中国医科大学（辽宁）2018年3月Ⅰ中国医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：本论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究成果，论文中除加以标注的内容外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得其他学位而使用过的成果。对本研究提供贡献的其他个人和集体均已在文中进行了明

3、确的说明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：2018年5月22日中国医科大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的原件、复印件和电子版，允许学位论文被查阅和借阅。本人授权中国医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密（），在年后解密适用本授权书。（保密：请在括号内划“√”）论文作者签名：指导教师签名：日期：2018年5月22日

4、日期：2018年5月22日II中国医科大学硕士学位论文摘要目的：观察凋亡抑制蛋白Livin(InhibitorofApoptosisProteins,IAPs,Livin)在肾间质纤维化(renalinterstitialfibrosis,RIF)时的表达。方法：①不同剂量的转化生长因子TGF-β1(0、1、2、5及10ng/ml)作用于标准培养的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)48小时，倒置相差显微镜下观察各浓度组HK-2细胞的形态学变化，Westernblot实验检测各浓度组HK-2细胞Livin蛋白的表达趋势。②将24只CD

5、1雄性小鼠随机平均分为对照组(ⅰ组)与单侧输尿管梗阻模型组（unilateralureteralocclusion，UUO，ⅱ组），手术前1天ⅰ组、ⅱ组均给予等量生理盐水灌胃。术后14天摘取梗阻侧肾脏，切片分别行免疫组化实验检测E-钙粘蛋白（E-cad）、α-平滑肌肌动蛋白（α-Sma）、Livin蛋白在肾脏的表达。结果：①TGF-β1刺激HK-2细胞后，倒置光学显微镜显示细胞形态从鹅卵石样向成纤维细胞转化,细胞变大、变梭,细胞间距明显增大；Westernblot实验显示Livin蛋白在正常HK-2细胞中仅有少量表达，当TGF-

6、β1诱导HK-2细胞发生肾间质纤维化时表达明显增加，且在TGF-β1作用剂量为2ng/ml、作用时间为48小时时表达最为显著，且各浓度组与TGF-β1作用剂量为0ng/ml，作用时间为48小时比较，Image-ProPlus6.0图像分析软件计算平均光密度值（累积光密度值/视野面积），P<0.001，差异极显著，均具有统计学意义。②免疫组化SP实验结果提示：与ⅰ组相比，ⅱ组肾组织中E-Cad表达减少，而α-Sma、Livin表达增加，先用Image-ProPlus6.0图像分析软件计算平均光密度值，取均值后采用SPSS21.0统

7、计学软件进行统计分析，P<0.05，差异有统计学意义。结论：凋亡抑制蛋白Livin与肾间质纤维化有关，但孰非因果有待更多试验探索。关键词：单侧输尿管梗阻；肾间质纤维化；Livin课题资助：辽宁省沈阳市科技局科技计划项目资助课题(F16-206-9-44)III中国医科大学硕士学位论文AbstractObjective：ToobserveexpressionofinhibitorofapoptosisproteinsLivininrenalinterstitialfibrosisMethods：①HK-2cellsweretrea

8、tedwithvariousdoseofTGF-β1(0,l,2,5and10ng/ml)for48h.Phasecontrastmicroscopywasperformedtoinvestigatethemorphologicalchangesincellst