长链非编码RNA CTA-941F9.9在结直肠癌中表达的研究

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1、分类号：R735.3单位代码：10159密级：公开学号：201420586硕士学位论文中文题目：长链非编码RNACTA-941F9.9在结直肠癌中表达的研究英文题目：TheexpressionofthelongnoncodingRNACTA-941F9.9incolorectalcancer论文作者：胡耀元指导教师：王振宁教授学科专业：肿瘤学完成时间：2017年12月中国医科大学硕士学位论文长链非编码RNACTA-941F9.9在结直肠癌中表达的研究TheexpressionofthelongnoncodingRN

2、ACTA-941F9.9incolorectalcancer论文作者胡耀元指导教师王振宁教授申请学位医学硕士培养单位第一临床学院一级学科临床医学二级学科肿瘤学研究方向肿瘤外科学论文起止时间2015年9月—2017年9月论文完成时间2017年12月中国医科大学（辽宁）2017年12月中国医科大学硕士学位论文摘要目的：结直肠癌是世界上最常见的癌症之一。在2012年，全世界结直肠癌发病人数超过130万，仅次于肺癌和乳腺癌，位居全部肿瘤中的第三位。男性结直肠癌患病率在所有癌症中排名第三位，而女性结直肠癌患病率在所有癌症中排

3、名第二位。在我国，结直肠癌的发病人数与死亡人数也呈逐年上升的趋势。尽管医疗技术和治疗策略近几年取得了重大进展，仍有60%的结直肠癌病人初次诊断就已经是进展期，而有远处转移的病人5年生存率只有5%。结直肠癌的早期诊断和筛查可以降低该病的发病率和死亡率。然而在过去的几十年里，结直肠癌的诊断通常应用粪便潜血检测(FOBT)和结肠镜检查。在20世纪80年代进行的粪便潜血检测的两个实验中，便隐血的阳性率分别只有67%和60%。粪便潜血检测在结直肠癌检测中的准确性也较低。结肠镜检查也有其局限性，有创的侵入性检查，病人会遭受一定

4、的痛苦，且费用较贵，医疗资源较少，无法在正常体检中大规模开展。因此，找到一个新的肿瘤标志物使结直肠癌能早期诊断显得至关重要。结直肠癌的起源是一个复杂的生物过程，涉及多种生物学过程的改变。大量研究发现，长链非编码RNA参与多种疾病的发生和发展，尤其是在肿瘤疾病中。长链非编码RNA还被发现与癌症发展的一系列步骤有关。近期研究显示，结肠癌相关因子-1（CCAT1）在结直肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌和卵巢癌中表达水平均上调。在结直肠癌中，Sana等人报道了lncRNA-uc.73和lncRNA-uc.388在结直肠癌组织中显著

5、下调，这两个长链非编码RNA均可以成为潜在的诊断标志物和预后标志物。随着研究的深入，越来越的长链非编码RNA被发现，长链非编码RNA的数量也已经超过了编码RNA的数量。这些长链非编码RNA可以与DNA、RNA、蛋白质等相互作用，在染色质及转录和转录后调控中充当重要的调节者。本实验的目的是探究lncRNA-CTA-941F9.9在结直肠癌组织和与其配对的癌旁非癌组织中的表达情况。并研究lncRNA-CTA-941F9.9表达水平和结直肠癌病人临床病理资料以及预后的关系。材料和方法：本研究选取了2010年及2016年于

6、中国医科大学进行了根治性切除手术的133例病人。其中74例于2010年接受了根治性切除，59例于2016年接受了根治性切除。男性64例，女性69例；结肠癌病人59例，直肠癌病人74例；结肠癌中，肿瘤位于左半结肠病人25例，肿瘤位于右半结肠病人34例。所有病人I中国医科大学硕士学位论文年龄均分布于28至86岁之间。全部病人术后病理都证实为结直肠癌。所有病人在术前都没有接受新辅助化疗或者放疗。我们对2010年进行根治性切除的74例病人进行随访，排除6例失访的病人，余下68例每3-6个月随访一次，截止到2015年6月。我

7、们分别选取了病人的结直肠癌组织和与其配对的正常粘膜组织，正常粘膜组织的选取位置距离癌灶至少5厘米。所有组织样本获取后均立即放入液氮中迅速冷冻，并被放入-80°C深低温冰箱中保存。我们使用Primerpremier5.0软件进行引物设计，并对细胞系RNA进行提取。提取后，使用半定量PCR扩增，随后进行琼脂糖凝胶电泳实验验证引物的准确性。我们应用实时定量PCR技术检测了133对结直肠癌组织和其配对癌旁非癌组织中lncRNA-CTA-941F9.9的表达情况，采用Wilcoxon秩检验对癌组织及癌旁非癌组织的lncRNA

8、-CTA-941F9.9表达水平进行了比较，用非参数检验方法分析lncRNA-CTA-941F9.9相对表达水平与临床病理资料的联系，两组之间比较采用Manner-WhitneyU检验（年龄、性别、肿瘤大小），多组之间比较采用Kruskal-WallisH检验（肿瘤位置、组织学分级、组织学分型、pT分级、pN分级、pTNM分期）。我们使用Kaplan-Mei