医药学医学毕业论文 人类角膜缘干细胞对外周血淋巴细胞作用的实验研究

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1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号：XXXXXXXXX姓名：XXX专业：医药学医学论文题目：人类角膜缘干细胞对外周血淋巴细胞作用的实验研究指导老师：XXX二〇一一年十二月十日关键词：人类角膜　　【摘要】目的观察体外培养的人类角膜缘干细胞对同种异体外周血淋巴细胞的作用。方法通过植片技术分离人角膜上皮细胞以及角膜缘干细胞。在两种细胞单层上，观察同种异体外周血淋巴细胞对丝裂原刀豆蛋白Ａ（ConA）的增殖反应。另外，将两种细胞培养上清直接转移到由ConＡ刺激的淋巴细胞增殖系统，以观察两种细胞释放某些因子的抑制效应。结果单层角膜缘干细胞对ConＡ刺激的外周血淋巴细胞增殖反应可以施加有效的抑制效应。

2、角膜缘干细胞培养上清对ConＡ刺激的外周血淋巴细胞增殖系统，在72h分离上清显示有明显抑制效应。结论角膜缘干细胞通过细胞交互作用和（或）释放某些抑制性因子对淋巴细胞的活化和增殖发挥潜在的抑制作用。　　【关键词】角膜上皮细胞;角膜缘干细胞;细胞培养　　Studiesonthekeratolimbalstemcelltothepericirculationlymphocyteactivationandproliferation　　　【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheregulationofhostlymphocyteactivationbytheall

3、ograftoflimbalstemcells.MethodsLimbalstemcellsandthecornealepithelialcellswereculturedandisolatedfromhumancorneasbyexplanttechnique.Themediumsofeachcellsweregatheredtimeandwerefreezeatdifferenttimein-20℃afterpurification.LymphocytesoftheotherbodywereculturedinmediumsstimulatedbyConA.Limbalstemc

4、ellsorthecornealepithelialcellsofthehumanwereco-culturedwiththelymphocytesfromtheotherbodysblood.LymphocyteproliferationassaywasassessedbyMTTcolorimetricdetermination.ResultsSignificantproliferationofthelymphocyteswasshownafteraddingtheConA.Thegatheredsupernatantofthe72heitherfromthelimbalstem

5、cellsorthecornealepithelialcellswasshownapotentinhibitoryeffectofthelymphocytesproliferation.Themonolayerdomesticrabbitslimbalstemcells,showedasignificantsuppressiveeffectontheallograftlymphocytesproliferationaftermixedlymphocyteculturefor48h,butthisphenomenoncouldntbeseeninthemonolayercorn

6、ealepitheliuminvitro.ConclusionTheresultsshowthattherewouldbealotofpossiblemechanismsthatworkedindependentlyorworkedinconcerttoinhibitthelymphocytesproliferation,butmainlybycell-cellinteractionand/orsomeothersolublefactors,andlimbalstemcellswouldtakearoleonraisingtheeyeimmunity.　　【Keywords】cor

7、nealepithelium;limbalstemcell;cellculture　在比较联合角膜缘的穿透性角膜移植与单纯大植片角膜移植的术后植片存活率的比较时发现，前者的排斥反应发生率低［1，2］，其机制尚未见研究报道，是否因为角膜缘干细胞有抑制淋巴细胞生长的功能，亦尚无此方面研究报道，我们前期的实验证实兔角膜缘干细胞可通过细胞交互作用和（或）释放某些抑制性因子抑制同种异体兔淋巴细胞的活化和增殖［3］。本实验旨在观察人类同种异体角膜缘干细胞对宿主淋巴细胞