医药学临床医学毕业论文 细胞凋亡与角膜移植免疫反应关系的初步研究

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1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号：XXXXXXXXX姓名：XXX专业：医药学临床医学论文题目：细胞凋亡与角膜移植免疫反应关系的初步研究指导老师：XXX二〇一一年十二月十日作者：杨朝忠，张军，华山，吴艳蕊，祝东升，马路生【摘要】目的研究细胞凋亡信号分子Fas和细胞凋亡因子FasL在新鲜及深低温保存后角膜的表达情况、角膜细胞凋亡情况及其与角膜移植免疫排斥反应的关系。方法（1）对35例角膜移植手术（25例新鲜角膜、10例冷冻保存）剩余组织应用免疫组织化学SABC法分别进行Fas和FasL蛋白染色。（2）应用Tunel法对上述

2、标本进行细胞凋亡的研究。（3）观察35例部分穿透性角膜移植免疫排斥反应发生发展情况。结果（1）角膜细胞Fas蛋白及FasL蛋白均为细胞质和（或）细胞膜着色。角膜上皮细胞、基质细胞及内皮细胞Fas蛋白均呈阳性表达。角膜上皮细胞及内皮细胞FasL蛋白均呈阳性表达，而角膜基质细胞则无FasL蛋白表达。新鲜角膜和冷冻保存后角膜的Fas、FasL蛋白阳性表达量经统计学分析差异无显著性。（2）凋亡的角膜细胞均为细胞核着色。25例新鲜角膜平均每高倍视野可见凋亡细胞（1.788±0.621）个，经冷冻保存后的角膜（10例）每高倍视野

3、可见凋亡细胞平均为（8.164±2.126）个，经统计学处理P＜0.05，差异有显著性。（3）角膜移植免疫排斥反应发生与角膜的新鲜程度有关，新鲜角膜部分穿透性角膜移植术后6～12个月的免疫排斥反应发生率为12%（3/25），深低温保存角膜移植后6～12个月的免疫排斥反应发生率为10%（1/10），二者差异无显著性（P＞0.05）。结论（1）新鲜和深低温保存后的角膜均可见Fas、FasL蛋白的表达。其中Fas在角膜上皮、基质和内皮细胞均表达，FasL在角膜上皮、内皮细胞表达，而基质细胞不表达。（2）新鲜角膜可见极少量凋

4、亡细胞，角膜经深低温冷冻保存后，凋亡细胞数量显著增加。降温-复温损伤可能与细胞凋亡有关。（3）角膜移植免疫排斥反应发生与角膜的新鲜程度有一定关系，深低温保存后角膜的抗原性可能降低，不易引起免疫排斥反应的发生。【关键词】Fas蛋白；FasL蛋白；凋亡；角膜移植免疫排斥【Abstract】ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetweenexpressionofFas/FasLandapoptoticcellsinnormalcorneaanddeepcryopreservative

5、withcorneagraftrejectioninhuman.MethodsSABCimmunohistochemistrymethodwasappliedtostudytheexpressionofFas/FasLinparaffin-embededsectionsof35cornea.Thetunel(TdTmediatedbiotindUTPnick-endlabeling，TUNEL)techniquewasusedtostudywhetherapoptosiswouldhappyinbothnormalc

6、orneaanddeepcryopreservativeinhuman.ResultsInallpositivecells，Fas/FasLwerekytoplasmandcellmembranewasstained.ThepositiveexpressionofFasproteinwasdetectedin35/55cornea，sowasFaslprotein.Fasproteinisexpressedincornealepithelial，keratocyteandendothelialcells.FasLli

7、gandproteinwasdetectedincornealepithelialandendothelial，neitherwaskeratocytecells.Thenumberofapoptoticcellswassignificantlyhigheraftercryopreservation(8.164±2.126)thannoncryopreservation(1.788±0.621)(P＜0.05).Therateofcorneagraftrejectionwas12%(nomalcornea)and10

8、%(cryopreservativecornea).ConclusionFasproteinandFasLligandproteinexpressedinallcorneawerenotrelatedtocryopreservation.Thefreeze-thawtraumawasmayberelatedtocryopreservation-