中药地椒乙醇提取物对人白血病细胞增殖的抑制作用.doc

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1、中药地椒乙醇提取物对人白血病细胞增殖的抑制作用作者：孙震晓，张英慧，程霜，马清温，郭善利，张金保【关键词】乙醇提取物［摘要］目的：筛选中药地椒乙醇提取物的抗肿瘤活性成分，探讨其可能的抗肿瘤作用机制。方法：从野生地椒乙醇提取物中分离得到乙酸乙酯、正丁醇和丙酮3种萃取组分，以体外培养的人白血病细胞株K562和HL60作为研究对象。将各萃取组分与肿瘤细胞作用一定时间后，计数存活肿瘤细胞数，分析药物对肿瘤细胞生长曲线的影响，考察各组分对肿瘤细胞生长的抑制作用。以去甲斑蝥素作为阳性对照组，通过形态学分析等方法，研究中药地椒乙醇

2、提取物可能的抗肿瘤作用机制。结果：中药地椒乙酸乙酯萃取物对人白血病细胞株K562和HL60均有显著的抑制作用，且呈药物浓度依赖性，并可诱导肿瘤细胞凋亡；而正丁醇和丙酮萃取物对两种白血病细胞均无显著的抑制作用。结论：体外实验表明，乙酸乙酯萃取物是中药地椒乙醇提取物中主要的抗肿瘤活性成分。　　［关键词］地椒;乙醇提取物;乙酸乙酯萃取物;抗肿瘤药;K562;HL60　　　AntitumoreffectofethanolextractsfromThymusquinquecostatusCelakonhumanleukemia

3、cellline　　ABSTRACTObjective:ToscreentheantitumorfractionofethanolextractsfromThymusquinquecostatusCelakandinvestigateitsantitumoreffectonhumanleukemiacellline.Methods:Ethylacetate,nbutanolandacetonefractionswereseparatedfromtheethanolextractsofwildThymusquinque

4、costatusCelak.GrowthinhibitingeffectsoftheseextractsonhumanleukemiacelllinesK562andHL60weredeterminedbylivecellcountingandcellgrowthcurveanalysis.Thepossibleantitumormechanismwasstudiedbymorphologicalanalysiswithnorcantharidinasapositivecontrol.Results:Ethylace

5、tatefractioncouldsignificantlyinhibittheproliferationsofK562andHL60cells,andtheinhibitingeffectdependedontheconcentrationofethylacetatefraction.EthylacetatefractioncouldinduceapoptosisofK562andHL60cells.Thenbutanolandacetonefractionshadnosignificantinhibitingef

6、fectonK562andHL60cells.Conclusion:EthylacetatefractionisthemajorantitumorfractioninethanolextractsfromThymusquinquecostatusCelak.　　KEYWORDSThymusquinquecostatusCelak;ethanolextract;ethylacetatefraction;antineoplasticagents;K562;HL606　　中药地椒（Thymusquinquecostatus

7、Celak），又名百里香，为唇形科百里香属植物，属矮小半灌木，茎匍匐生长，常生长于山坡和海边低丘上［1,2］。药用其地上部分，阴干或鲜用，味辛、性温，有小毒，有祛风解表、行气止痛之功［3］。民间单用地椒或配伍其他中药治疗癌症，确有一定的疗效。我们在对地椒进行有效成分提取、分离及分析的基础上［4,5］，以小鼠移植性肿瘤为模型，研究了地椒的抗肿瘤作用及其对机体免疫功能的影响［6］。随后，我们又以体外培养的人红白血病K562细胞和人早幼粒白血病HL60细胞为研究对象，进一步筛选地椒乙醇提取物中的抗肿瘤活性成分，并阐明其可能

8、的抗肿瘤作用机制，现报道如下。　　1材料与方法　　1.1实验材料（1）野生地椒采自山东省平邑县山区，全草阴干后粉碎，过40目筛。经乙醚浸泡24h后，35℃回流3h抽滤，去滤液，滤渣用75%酒精溶液冷浸24h，72℃回流3h，抽滤得乙醇提取物溶液。乙醇提取物进一步用乙酸乙酯、正丁醇、丙酮逐级萃取，获得地椒乙酸乙酯、正丁醇和丙酮萃取物3个组分，冷冻