白背叶提取物a对人肿瘤细胞增殖的抑制作用研究

《白背叶提取物a对人肿瘤细胞增殖的抑制作用研究 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、白背叶提取物A对人肿瘤细胞增殖的抑制作用研究【摘要】目的观察白背叶提取物A对肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法采用四唑盐比色实验（MTT法），以半数抑制浓度（IC50）为评价抗肿瘤活性强度的指标，分别对4种常见的人恶性肿瘤细胞进行抗肿瘤活性的筛选。结果白背叶提取物A在浓度为5μg/ml时对人胃癌细胞SGC-7901，人肺癌细胞A549有明显抑制作用（P0.05或P0.01），其IC50分别为27.14μg/ml,33.08μg/ml；在浓度为20μg/ml时对人结肠癌细胞LoVo有抑制作用（P0.05），其IC50

2、为36.82μg/ml；在浓度为40μg/ml时对人肝癌细胞Bel-7404有抑制作用（P0.05），其IC50为37.70μg/ml。结论白背叶提取物A对以上4种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用。【关键词】白背叶提取物A；抗肿瘤；四唑盐比色实验白背叶MallotusapeltaMuell-Arg.为双子叶植物药大戟科植物白楸的叶，又名白背娘、白背桐，为岭南地区民间常用草药。在我国分布较广，资源较丰富，可见于广东、广西、湖南、福建、浙江、安徽、河南等地。白背叶全年可采，鲜用或晒干。中国壮药原色图谱记载其味苦，性平，

3、具清热、解毒、祛湿、止血之功效〔1〕。本实验对白背叶提取物A进行了抗肿瘤作用的筛选研究。现将结果报道如下。　　1材料与仪器　　1.1药物　　白背叶提取物A由广西大学化学教研室提取分离，为淡黄色单体成分。　　1.2肿瘤细胞株　　本实验所用细胞株均购自南京凯基生物有限公司。　　1.3试剂　　RPMI-1640干粉(美国Gibco公司产品)；新生牛血清(杭州四季青公司产品，批号080508)；四甲基二氮唑蓝(北京拜尔迪生物公司分装，Amresco0793)；二甲基亚砜(博大泰克公司产品)；0.25%胰蛋白酶(美国H

4、ycloneLab公司产品)；注射用生理盐水(武汉滨湖双鹤药业有限公司产品，批号080429)；顺铂(齐鲁制药有限公司，批号701003CF)。　　1．4仪器　　ELX-800型酶标仪(美国BIOTEK公司产品)；311二氧化碳培养箱(美国ThermoForma公司产品)；DLF560型超净工作台(荷兰clearAirTechniekbv公司产品)；细胞培养瓶(加拿大BIOFIL公司产品)；96孔板(加拿大BIOFIL公司产品)；倒置显微镜(德国Leica)；微量移液器(法国Pipetman公司产品)；十万分

5、之一电子天平(德国赛多利斯产品)。　　1．5培养液及试剂的配制　　RPMI-1640不完全培养液：不加血清的RPMI-1640培养液；RPMI-1640完全培养液：10%新生牛血清+RPMI-1640不完全培养液+双抗（青霉素+链霉素，浓度各为100U/ml）。　　2方法　　2．1肿瘤细胞培养　　细胞用RPMI-1640完全培养液，在37℃，5%CO2培养箱培养，待细胞生长贴壁约80%时传代，每瓶传代为2或3瓶。取对数生长期细胞用于实验。　　2.2MTT法测定〔2，3〕　　将肿瘤细胞(2×104/ml)接种到

6、96孔板，每孔200μl，设细胞对照组，阳性对照组（顺铂5μg/ml），药物组，细胞于37℃，5%CO2培养24h。弃上清液，加入各药物，白背叶提取物A设5个浓度，分别为5，10，20，40，80μg/ml，每浓度3个复孔，继续培养48h。每孔加入使用生理盐水新鲜配制的MTT（5mg/ml)10μl，继续培养4h，弃上清，加入DMSO150μl，振荡10min，以酶标仪在490nm处测各孔吸光度值(OD)，计算抑制率，用对数回归方程求出半数抑制浓度(IC50)，肿瘤细胞生长抑制率按下式计算。　　肿瘤细胞生长抑

7、制率（%）=(1-实验组平均OD值/对照组平均OD值)×100%　　3结果见表1～2，白背叶提取物A在浓度为5μg/ml时对7901，A549即有明显抑制作用（P0.05-0.01），其IC50分别为27.14，33.08μg/ml；在浓度为20μg/ml时对LoVo有抑制作用（P0.05），其IC50为36.82μg/ml；在浓度为40μg/ml时对7404有抑制作用（P0.05），其IC50为37.70μg/ml，抑制作用均随浓度增加而增强，说明白背叶提取物A在体外具有抗肿瘤作用。表1白背叶提取物A对79

8、01，A549细胞增殖的抑制作用（略）表2白背叶提取物A对7404、LoVo细胞增殖的抑制作用（略）　　4讨论癌症是一类常见病，多发病，是目前严重危害人类健康的疾病之一。随着社会人口老龄化的加剧，工业化进程的加快，环境的恶化，癌症的发病率逐年提高，发病人群年龄也趋于年轻化。目前的治疗手段毒副作用大，患者的生存质量差，因此寻找有效的抗癌药物是当务之急。天然中草药具有毒性低，来源广泛等优点，因此研究中草