青蒿琥酯对慢性湿疹患者外周血淋巴细胞功能的影响.doc

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1、青蒿琥酯对慢性湿疹患者外周血淋巴细胞功能的影响作者：郭庆　米向斌　曾凡钦　罗益金　　【摘要】目的初步探讨青蒿琥酯对慢性湿疹患者外周血Th1、Th2细胞表达和IgE水平的影响。方法慢性湿疹患者外周血T淋巴细胞经过与不同浓度的青蒿琥酯体外培养后，采用ELISA方法检测其上清液IgE水平；用流式细胞仪方法测定其Th1、Th2细胞的变化。结果①青蒿琥酯可以抑制慢性湿疹患者外周血淋巴细胞Th1细胞的表达，促进慢性湿疹患者外周血淋巴细胞Th2细胞的表达，而且呈现一定的剂量依赖性；②青蒿琥酯可以抑制慢性湿疹患者外周血淋巴细胞的IgE分泌。结论青蒿琥酯可以通过调节慢性湿疹外周

2、血患者淋巴细胞Th1、Th2细胞表达，减少IgE的分泌。青蒿琥酯有望成为治疗慢性湿疹的一个新的药物选择。　　【关键词】青蒿琥酯；慢性湿疹；淋巴细胞　　　　【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofartesunateonTcellfunctionfromchroniceczemapatients.MethodsTcellsfromchroniceczemapatientswereculturedwithartesunateindefferentlevel.TheIgElevelwasdetectedbyE

3、LISAmethodsandtheexpressionofTh1/Th2wasdetectedbyflowcytometricmethods.Results①ArtesunatecoulddecreasetheprevalenceofTh1cellandincreasetheprevalenceofTh2cellinperipheralbloodmononuclearcellfromchroniceczemapatientsindifferentlevel;②ArtesunatecoulddecreasethesecretionofIgEofperiphera

4、lbloodmononuclearcellfromchroniceczemapatientsindifferentlevel.ConclusionArtesunatecouldregulatetheexpressionofTh1/Th2cellsanddecreasedthesecretionofIgEofTcellsfromchroniceczemapatients.Artesunatemightplayanimportantroleinthetreatmentofchroniceczemainfuture.　　【Keywords】Artesunate;C

5、hroniceczema;Lymphocyte　　　　随着对青蒿素及其衍生物研究的不断深入，现代研究揭示青蒿素及其衍生物青蒿琥酯、蒿甲醚可能通过影响免疫功能而起到对肿瘤、红斑狼疮、寄生虫感染等疾病的治疗作用[1]。文中就青蒿琥酯(artesunate)在淋巴细胞免疫功能调节方面的作用探讨青蒿琥酯对慢性湿疹患者外周血淋巴细胞免疫功能的影响。　　1材料与方法　　1．1单个核细胞的分离用肝素抗凝管采集1例确诊为慢性湿疹的患者外周血10ml。用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离外周血单个核细胞。用CCK-8活细胞计数试剂盒(日本同仁公司)和台盼兰染色

6、法检测T细胞的活性（所有组均＞95%）。　　1．2单个核细胞的体外培养所得约6×107～10×107个单个核细胞按照1×107个细胞/ml的密度接种于含10%胎牛血清（美国Gibco公司）、IL-2(50U/ml)的RPMI1640培养基（美国Invitrogen公司）。同时分离的单个核细胞另外加入浓度分别为60、30、15、7．5、3．75、0μ4g/ml的青蒿琥酯（广西桂林制药厂生产，每支60mg粉末先用5%碳酸氢钠溶液1ml溶解，再按需要用培养基配制成所需的终浓度）培养24h。培养结束后用CCK-8活细胞计数试剂盒(日本同仁公司)和台盼兰染色法检

7、测细胞的活性（所有组均＞95%）。　　1．3流式细胞仪检测分析培养结束后的淋巴细胞，使用抗表面抗原CD4抗体进行表面抗原染色，经4%PFA固定及皂素破膜处理后、使用抗IFN-γ及抗IL-4细胞因子抗体进行细胞内细胞因子染色，最后进行流式细胞仪检测，区分出CD4+IFN-γ+IL-4-作为Th1细胞、CD4+IFN-γ-IL4+作为Th2细胞。同时检测以相同荧光标记的同种型对照免疫球蛋白作为阴性对照。每个样品检测20000个单个核细胞，计算出其中Th1、Th2细胞百分比用于统计。　　1．4ELISA法检测IgE水平人IgEELISA定量试剂盒为美国R&a

8、mp;D公司产品，检测的范围是2～25