高效液相色谱法测定调肝灵片中大黄素和大黄酚的含量.doc

《高效液相色谱法测定调肝灵片中大黄素和大黄酚的含量.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、高效液相色谱法测定调肝灵片中大黄素和大黄酚的含量【摘要】目的建立以高效液相色谱法测定调肝灵片中大黄素、大黄酚含量的方法。方法色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相：甲醇-0．1%磷酸溶液(85:15)为流动相；流速：1．0ml/min；检测波长：254nm；柱温：30℃，进样量10μl。结果大黄素和大黄酚分别在0．0056~0．028μg之间和0．0112~0．056μg(r=0．9998)之间成线性关系。大黄素、大黄酚总量平均回收率为100．13%(RSD＝2．53%，6例)。结论本方法简便、准确、重现性好。　　【关键词】调肝灵片；高效液相色谱法；大黄素、大黄酚；含量

2、测定；色谱法　　【Abstract】ObjectiveToestablishaqualitystandardofTiaoganlingpills.MethodsHypersilC18wasusedwithmethanol-0．1%phosphoricacidasmobilephase(85:15).Theflowratewas1．0ml/min,detectivewavelengthwas254nm,columntemperaturewas30℃andinjectionvalumewas10μl.ResultsEmodinandchrysophanolshowedagoodlin

3、earrelationshipintherangeof0．0056~0．028μgand0．0112~0．056μg(r=0．9998).Theaveragerecoverywas100．13%(RSD=2．53%,6).ConclusionThemethodsissimple,accurateandreproducible.　　【Keywords】Tiaoganlingpills;HPLC;Emodin;Chrysophanol;Contantdetermination　　　　调肝灵片是在原调肝灵丸的基础上进行的中药改剂剂型，有清热解毒，疏肝行滞的功能。用于肝郁气滞。建立以高

4、效液相色谱法测定调肝灵片中大黄素、大黄酚含量的方法，对提高中药制剂质量监控，完善质量标准体系具有实际应用意义。　　1仪器与试药　　1．1仪器美国Watets6000E高效液相色谱仪，Millennidm32数据处理系统。　　1．2试药对照品:大黄素、大黄酚批号：0756-200711中国药品生物制品检定所，调肝灵片(黑龙江中医药大学中医药研究院自行研制，批号080925)。甲醇(液相用)为色谱纯，所用其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2．1色谱条件[1]色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，Kromasil色谱柱(4．6mm×200mm，5μm)。流动相：甲醇-

5、0．1%磷酸溶液(85∶15)为流动相；流速：1．0ml/min；柱温：30℃。检测波长：254nm；进样量10μl。　　2．2对照品溶液的制备分别精密称取大黄素和大黄酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含大黄素2μg、大黄酚3μg的混合溶液，即得。　　2．3线性关系考察分别精密吸取“2．2”项下对照品溶液，2、4、6、8、10μl,分别按“2．1”项下色谱条件进样，测定峰面积，以浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，进行线性回归，得到线性方程(n=6)。大黄素Y=45663258．7X+450．γ＝0．9998；大黄酚Y=8544660．7X-3367．2，γ＝0．9998。

6、试验证明大黄素和大黄酚分别在0．0056~0．028μg之间和0．0112~0．056μg之间成线性关系。并通过原点。　　2．4稳定性试验取同一批号调肝灵片(批号：080925)10片，除去薄膜衣，研细，取粉末0．25g，精密称定，按“2．8”项下方法操作，再精密吸取供试品溶液10μl，根据设定间隔时间0、1、2、3、4、5h，按“2．1”项下色谱条件进样，测定峰面积。结果，大黄素平均峰面积值为96024(RSD=1．0%，6例)；大黄酚平均峰面积值为215545(RSD＝0．9%，6例)。大黄素和大黄酚在5h内稳定。　　2．5精密度试验取同一批号调肝灵片(批号：080925

7、)10片，除去薄膜衣，研细，取粉末0．25g，精密称定，按“2．8”项下方法操作，再精密吸取供试品溶液10μl，按“2．1”项下色谱条件连续进样6次，每次10μl，测定峰面积。结果，大黄素平均峰面积值为66977(RSD=1．4%，例)；大黄酚平均峰面积值为233930(RSD＝1．1%，6例)。本方法精密度良好。　　2．6重现性试验取同一批号调肝灵片(批号：080925)10片，除去薄膜衣，研细，取粉末0．25g，精密称定6份，按“2．8”项下方法操作，再精密吸取供试品溶液1