高效液相色谱法测定丹参提取物中3种水溶性成分的含量.doc

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1、高效液相色谱法测定丹参提取物中3种水溶性成分的含量【摘要】目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定丹参提取物中水溶性成分丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B含量的方法。方法高效液相色谱梯度洗脱法。色谱柱为HypersilODSC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为1%冰醋酸溶液（A）和甲醇（B）梯度洗脱；检测波长为281nm；流速为1.0ml·min-1；柱温25℃。结果丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B线性范围分别在0.26～2.08μg，0.13～1.04μg，0.45～3.60μg内线性关系良好(r≥0.9996)；加样回收率分别为97.76%，99.56%，99.68%，RSD＜3.4%

2、。结论该方法操作简便、灵敏度高、重复性好，可用于丹参提取物质量控制。【关键词】丹参提取物；水溶性成分；高效液相色谱　　Abstract：ObjectiveTodevelopanHPLCmethodfordeterminationof3water-solublecomponents-danshensu,protocatechuicaldehydeandsalvianolicacidBintheextractfromSalviamiltiorrhizaBge.MethodsTheanalysiswascarriedonwithacolumnofHypersilODSC18(250mm×4.6mm，

3、5μm)byHPLCat25℃，withgradientelutionof1%(v/v)aceticacid(A)-methanol(B)asthemobilephase.Theflowratewas1.0ml·min-1andthedetectionwavelengthwas281nm.ResultsThelinearrangesofdanshensu,protocatechuicaldehydeandsalvianolicacidBwere0.26～2.08μg,0.13～1.04μgand0.45～3.60μgrespectively,andallthecompoundsshowedgo

4、odlinearity(r≥0.9996)incorrespondingdetectedconcentrationrange.Theaveragerecoverieswere97.76%,99.56%,99.68%,andRSDwaslessthan3.4%.ConclusionThemethodissimple,sensitive,accurate,reproducible,andcanbeusedtocontrolthequalityofextractfromSalviamiltiorrhizaBge..　　Keywords：ExtractfromSalviamiltiorrhizaBge

5、.;Water-solublecomponents;HPLC　　传统中药丹参为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根茎，是著名抗衰老中药。近代已从中分离得到多种化学成分，含有酚酸类水溶性成分和二萜类脂溶性成分两大类，水溶性成分有原儿茶醛、丹参素、丹酚酸B等。丹参的水溶性成分不仅具有显著的抗氧化、抗自由基、抑制低密度脂蛋白氧化的特性，而且具有护肝、抗肝癌、抗心血管疾病以及抑制HIV病毒对宿主细胞的感染等作用［1］。最近研究发现丹参水提物和丹参素促进成骨细胞活性和防治泼尼松所致大鼠骨质疏松［2］。丹参提取物主要成分为丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B等，笔者参考有关文献［3

6、］采用HPLC法测定丹参提取物中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B的含量，该方法操作简便、灵敏度高、重现性好，为丹参中药制剂质量标准的研究提供实验依据。3　　1仪器与试药　　Angilent1100高效液相色谱仪，SPD二极管阵列检测器，自动进样器（美国Agilent公司），柱温箱和ChemStation工作站。对照品：丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B(中国药品生物制品检定所，批号分别为：110855、0810和111562)；丹参提取物（由广东医学院科技开发中心提供）；甲醇（色谱纯）；三次重蒸馏水；冰醋酸（分析纯）；0.45μm微孔滤膜。　　2方法与结果　　色谱条件：采用HypersilODSC18色谱

7、柱（250mm×4.6mm，5μm，大连依利特）；流速：1ml·min-1；检测波长：281nm；柱温：25℃；进样量：20μl；流动相为1%冰醋酸溶液（A）和甲醇（B）梯度洗脱（0～5min,10%B;10～0min,35%B;31～46min，10%B）。在选定条件下，丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B和样品中其他组分色谱峰可达基线分离，且与其他相邻色谱峰分离度大于1.2，按丹参素钠峰计算，理论板数