高效液相色谱法测定丹参提取物中3种水溶性成分的含

《高效液相色谱法测定丹参提取物中3种水溶性成分的含》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、高效液相色谱法测定丹参提取物中3种水溶性成分的含【摘要】目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定丹参提取物中水溶性成分丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B含量的方法。方法高效液相色谱梯度洗脱法。色谱柱为HypersilODSC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为1%冰醋酸溶液（A）和甲醇（B）梯度洗脱；检测波长为281nm；流速为1.0ml·min-1；柱温25℃。结果丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B线性范围分别在0.26～2.08μg，0.13～1.04μg，0.45～3.60μg内线性关系良好(

2、r≥0.9996)；加样回收率分别为97.76%，99.56%，99.68%，RSD＜3.4%。结论该方法操作简便、灵敏度高、重复性好，可用于丹参提取物质量控制。【关键词】丹参提取物；水溶性成分；高效液相色谱　　Abstract：ObjectiveTodevelopanHPLCmethodfordeterminationof3SalviamiltiorrhizaBge.MethodsTheanalysisnofHypersilODSC18(250mm×4.6mm，5μm)byHPLCat25℃，et

3、hanol(B)asthemobilephase.Theflol·min-1andthedetection.ResultsThelinearrangesofdanshensu,protocatechuicaldehydeandsalvianolicacidBethodissimple,sensitive,accurate,reproducible,andcanbeusedtocontrolthequalityofextractfromSalviamiltiorrhizaBge..　　KeySalvi

4、amiltiorrhizaBge.;iltiorrhizaBge.的干燥根及根茎，是著名抗衰老中药。近代已从中分离得到多种化学成分，含有酚酸类水溶性成分和二萜类脂溶性成分两大类，水溶性成分有原儿茶醛、丹参素、丹酚酸B等。丹参的水溶性成分不仅具有显著的抗氧化、抗自由基、抑制低密度脂蛋白氧化的特性，而且具有护肝、抗肝癌、抗心血管疾病以及抑制HIV病毒对宿主细胞的感染等作用［1］。最近研究发现丹参水提物和丹参素促进成骨细胞活性和防治泼尼松所致大鼠骨质疏松［2］。丹参提取物主要成分为丹参素、原儿茶醛、丹酚酸

5、B等，笔者参考有关文献［3］采用HPLC法测定丹参提取物中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B的含量，该方法操作简便、灵敏度高、重现性好，为丹参中药制剂质量标准的研究提供实验依据。　　1仪器与试药　　Angilent1100高效液相色谱仪，SPD二极管阵列检测器，自动进样器（美国Agilent公司），柱温箱和ChemStation工作站。对照品：丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B(中国药品生物制品检定所，批号分别为：110855、0810和111562)；丹参提取物（由广东医学院科技开发中心提供）；甲醇（色谱纯）；

6、三次重蒸馏水；冰醋酸（分析纯）；0.45μm微孔滤膜。　　2方法与结果　　色谱条件：采用HypersilODSC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm，大连依利特）；流速：1ml·min-1；检测波长：281nm；柱温：25℃；进样量：20μl；流动相为1%冰醋酸溶液（A）和甲醇（B）梯度洗脱（0～5min,10%B;10～0min,35%B;31～46min，10%B）。在选定条件下，丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B和样品中其他组分色谱峰可达基线分离，且与其他相邻色谱峰分离度大于1.2，按丹参素钠

7、峰计算，理论板数在3000以上。其色谱图见图1。　　2.1供试品溶液的制备精密称取丹参提取物0.2g，置于100ml三角瓶中，加入蒸馏水30ml，超声溶解10min，过滤，加水定容至50ml，经0.45μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。　　2.2对照品溶液的制备精密称取丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B对照品适量，加1%醋酸溶液溶解，丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的浓度分别0.104，0.052，0.180mg·ml-1，即得混合对照品溶液。　　2.3线性关系考察按上述色谱条件自动进样器吸取对照品溶液2.5，

8、5，10，15，20μl，记录色谱图。以对照品溶液进样量X为横坐标，峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线，测定成分在线性范围内线性关系良好。见表1。　　2.4方法学考察　　2.4.1精密度实验精密吸取对照品溶液20μl，连续进样5次，记录丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的峰面积，计算RSD，分别为1.82%，1.25%和2.13%，说明仪器精密度良好。　　表1线性结果（略）　　2.4.2稳定性实验精密吸取供试品溶液，每隔一定的时间测定1次，记录丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的峰面积，