银杏叶提取物对大鼠实验性结肠炎COX2表达的影响.doc

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1、银杏叶提取物对大鼠实验性结肠炎COX2表达的影响【摘要】目的观察银杏叶提取物对结肠炎大鼠结肠组织环氧合酶2(cyclooxygenase2,COX2)表达的影响。方法应用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠制备大鼠实验性结肠炎模型。实验设正常对照组，三硝基苯磺酸模型组，阳性药物对照组(5ASAgroup,100mg/kg)，银杏叶提取物（EGB）组(200mg/kg)4组。评估大鼠结肠黏膜大体形态和组织学评分。免疫组化检测肠组织环氧合酶2（COX2）蛋白的表达。结果与模型组相比，EGB组结肠组织COX2表达明显减少，E

2、GB能明显减轻大鼠实验性结肠炎模型组大体形态和组织学评分。结论EGB可能通过抑制炎性细胞因子（TNFα,NFκBp65,IL6）的表达，从而抑制COX2生成，对大鼠实验性结肠炎具有保护作用。【关键词】银杏叶提取物；溃疡性结肠炎;环氧合酶2ABSTRACT:ObjectiveTostudytheinfluenceofGinkgobilobaextract(EGB)ontheexpressionofcyclooxygenase2(COX2)inexperimentalcolitisinrats.MethodsColi

3、tisinratswasinducedbycolonicadministrationwith2,4,6trinitrobenzenesulfonicacid.Theanimalsweredividedinto4groups:normalgroup,modelgroup,5ASA(5aminosalicylicacid,100mg/kg)group,EGB(200mg/kg)group.Themacroscopicalandhistologicalchangesofthecolonwereevaluated.Express

4、ionofCOX2inthecolontissueswasdetectedbyimmunohistochemistry.ResultsTheexpressionofCOX2ofcolontissueinEGBgroupwereobviouslylowerthanthoseofmodelgroup.Ascomparedwiththemodelgroup,EGBnotablyreducedcolonmacroscopicandhistologicalscores.ConclusionEGBcouldalleviatethein

5、flammatoryreactionsincolitisthroughinhibitingInflammatorymediators(TNF-α,NFκBp65,IL6)anddecreasingthegenerationofCOX2.KEYWORDS:Ginkgobilobaextract;Ulcerativecolitis;Cyclooxygenase2银杏叶提取物广泛用于治疗呼吸系统、心脑血管系统等疾病，有清除自由基和过氧化脂质、调节循环系统、改善血液循环、拮抗血小板活化因子、保护组织等作用。环氧合酶2(cyc

6、looxygenase2,COX2)诱导产生PGs(主要是PGE2)是溃疡性结肠炎（UC）炎症反应过程中的关键环节，阻断COX2的表达从而减少PGs生成可以控制UC炎症反应过程[1]。银杏叶提取物对溃疡性结肠炎COX2表达的影响，尚未见研究报道。我们在前期研究[2]的基础上，进一步观察EGB对大鼠实验性结肠炎COX2表达的影响，探讨EGB防治UC的可能机制。1材料和方法41.1材料雄性Wistar大鼠40只，体质量为180±20g，购自湖北省实验动物中心；2，4，6三硝基苯磺酸（2,4,6trinitrobenz

7、enesulfonicacid，TNBS）购自Sigma公司；银杏叶提取物为贵州信邦制药股份有限公司提供；环氧合酶2（COX2）多克隆抗体购自SantaCruz公司；SP试剂盒为北京中山生物制品公司产品。1.2方法动物随机分为正常对照组（normalgroup），三硝基苯磺酸模型组（modelgroup），阳性药物对照组（5aminosalicylicacid，5ASAgroup），EGB组（EGBgroup）4组，每组10只。造模前大鼠禁食不禁水24h。正常对照组以500mL/L乙醇灌肠，其他组均以TNBS灌肠诱导实

8、验性结肠炎形成。按文献[3]方法造模，TNBS（150mg/kg）溶解于500ml/L乙醇溶液缓慢推入结肠。造模24h后4组分别予以生理盐水2ml，5ASA100mg/kg，EGB200mg/kg灌胃治疗，每天1次连续4周。4周后处死大鼠，分离结肠，沿肠系膜纵轴剪开，冷生理