银杏叶提取物对大鼠实验性结肠炎cox2表达的影

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1、银杏叶提取物对大鼠实验性结肠炎COX2表达的影【摘要】目的观察银杏叶提取物对结肠炎大鼠结肠组织环氧合酶2(cyclooxygenase2,COX2)表达的影响。方法应用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠制备大鼠实验性结肠炎模型。实验设正常对照组，三硝基苯磺酸模型组，阳性药物对照组(5ASAgroup,100mg/kg)，银杏叶提取物（EGB）组(200mg/kg)4组。评估大鼠结肠黏膜大体形态和组织学评分。免疫组化检测肠组织环氧合酶2（COX2）蛋白的表达。结果与模型组相比，EGB组结肠组织COX2表达明显减少，EGB能明显减轻大鼠实验性结肠炎模型组大体形态和组织学评分

2、。结论EGB可能通过抑制炎性细胞因子（TNFα,NFκBp65,IL6）的表达，从而抑制COX2生成，对大鼠实验性结肠炎具有保护作用。【关键词】银杏叶提取物；溃疡性结肠炎;环氧合酶2ABSTRACT:ObjectiveTostudytheinfluenceofGinkgobilobaextract(EGB)ontheexpressionofcyclooxygenase2(COX2)inexperimentalcolitisinrats.MethodsColitisinratsinistrationalsalgroup,modelgroup,5ASA(5amino

3、salicylicacid,100mg/kg)group,EGB(200mg/kg)group.Themacroscopicalandhistologicalchangesofthecolonmunohistochemistry.ResultsTheexpressionofCOX2ofcolontissueinEGBgroupodelgroup.Asparedodelgroup,EGBnotablyreducedcolonmacroscopicandhistologicalscores.ConclusionEGBcouldalleviatetheinflammatoryreac

4、tionsincolitisthroughinhibitingInflammatorymediators(TNF-α,NFκBp65,IL6)anddecreasingthegenerationofCOX2.KEYa公司；银杏叶提取物为贵州信邦制药股份有限公司提供；环氧合酶2（COX2）多克隆抗体购自SantaCruz公司；SP试剂盒为北京中山生物制品公司产品。1.2方法动物随机分为正常对照组（normalgroup），三硝基苯磺酸模型组（modelgroup），阳性药物对照组（5aminosalicylicacid，5ASAgroup），EGB组（EGBgroup

5、）4组，每组10只。造模前大鼠禁食不禁水24h。正常对照组以500mL/L乙醇灌肠，其他组均以TNBS灌肠诱导实验性结肠炎形成。按文献[3]方法造模，TNBS（150mg/kg）溶解于500ml/L乙醇溶液缓慢推入结肠。造模24h后4组分别予以生理盐水2ml，5ASA100mg/kg，EGB200mg/kg灌胃治疗，每天1次连续4周。4周后处死大鼠，分离结肠，沿肠系膜纵轴剪开，冷生理盐水冲洗干净，参照文献[3]标准进行肉眼大体形态损伤评分和镜下评价结肠组织学损伤评分。1.3免疫组化检测肠组织COX2表达操作按照SP免疫组化染色试剂盒说明书进行。PBS代替一抗作阴性对照。结果判

6、断:细胞呈棕黄色为阳性，表达于胞浆。每张切片计算任意10个高倍视野（200倍）中阳性细胞所占的百分比例。1.4统计学处理实验数据以±s表示，采用SPSS11.5软件进行统计学分析，两组间比较用单因素方差分析，组间差异采用q检验。以P<0.05为有统计学意义。2结果2.1结肠大体形态和组织学评分大体形态评分：模型组肉眼观察到肠粘膜水肿、溃疡、点片状出血。EGB组及5ASA组肠黏膜充血、水肿、糜烂情况显著改善（P<0.01），见表1。组织学损伤评分：三硝基苯磺酸模型组黏膜上皮坏死脱落，典型溃疡形成。EGB组和5ASA组以上病理组织表现明显好转（P<0.01），见

7、表1。EGB组较5ASA组好转更加明显(P<0.05)，见表1。表1各组大鼠大体形态、组织学评分和COX2表达的比较(略)与模型组比较，**P<0.01；与5ASA组比较，△P<0.052.2免疫组化染色结果正常对照组COX2几乎不表达。模型组肠组织可见大量COX2阳性细胞，呈棕黄色颗粒，胞质着色，主要分布在黏膜及黏膜下层，较正常对照组表达明显升高（P<0.01）。EGB和5ASA治疗后较模型组COX2表达明显下降（P<0.01），EG