大鼠实验性结肠炎il1β 和il10的表达及银杏天宝对其影响论文

《大鼠实验性结肠炎il1β 和il10的表达及银杏天宝对其影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、大鼠实验性结肠炎IL1β和IL10的表达及银杏天宝对其影响论文罗丽丹，周燕红，罗德生，刘琴【摘要】目的观察大鼠实验性结肠炎白细胞介素1β和白细胞介素-10的表达及银杏天宝（EGB)对其影响。方法利用三硝基苯磺酸灌肠制备大鼠实验性结肠炎模型。实验设正常对照组，三硝基苯磺酸模型组，5氨基水杨酸组（5ASA，100mg/kg)，EGB组（200mg/kg)。4周后.freelodelofratsag/kg).Ratsalgroup,modelgroup,5ASAgroup(100mg/kg)andEGBgroup(200mg/kg).Themacro

2、scopicalandhistologicalchangesofthecolonutase(SOD)andmyeloperoxidasea(MPO)inthecolonicmucosained,respectively.Theexpressionsofinterleukin-1β(IL1β)andIL10inthecolontissuesofcolitisratsmunohistochemistryandELISAmethod.ResultsThemacroscopicandhistologicaldamagescores,theactivityofM

3、POandtheproteinexpressionsofIL1βarkedlyhigherinmodelgroupthanthatinnormalgroup.SODactivityandtheIL10productionofcolontissueinmodelgroupalgroup.TreatmentofEGBimprovedcolonicmacroscopicalandhistologicaldamagescore,enhancedcolontissueSODactivities,increasedcolonIL10production,andd

4、ecreasedcolonIL1βexpressionandcolontissueMPOactivities.ConclusionThetreatmentofEGBmationandtheeffectsulationofIL10productionanddoa公司。银杏宝(Ginkgobilobaextract,.freelinosalicylicacid，5-ASA）由国怡药业有限公司提供（No.0209477）。IL1β多克隆抗体购自SantaCruz公司。大鼠IL10ELISA检测试剂盒购于Biosource公司。髓过氧化酶(myeloper

5、oxidaseactivity,MPO)、超氧化物岐化酶(Superoxideclismutase,SOD)试剂盒购自南京建成生物研究所。1.2方法1.2.1模型的建立及分组大鼠正常喂养，随机分为正常对照组、三硝基苯磺酸模型组、阳性药物对照组(5-ASA组，100mg/kg)、EGB组(200mg/kg)4组，每组10只。按照文献［3］将TNBS溶于500ml/L乙醇至终浓度150mg/kg，建立大鼠实验性结肠炎模型，正常对照组以50%乙醇代替TNBS灌肠。正常对照组及模型组给予生理盐水灌胃，5ASA组和EGB组分别给予5ASA100mg/kg，EGB

6、200mg/kg灌胃,从造模后第2天至实验结束每天灌胃给药1次/d，共4周。4周后大鼠经水合氯醛麻醉后取出全结肠，纵向剪开，冲洗掉污物，在病变严重处剪取肠组织，参照文献［3］肉眼观察大体形态并进行评分。另取病变最明显处组织甲醛固定，石蜡包埋、切片、HE染色，参照文献标准［3，4］光镜下观察病理组织学变化。1.2.2肠组织MPO和SOD检测取适量结肠新鲜标本，快速置于液氮中速冻，供检测MPO和SOD，检测按试剂盒说明书要求操作。1.2.3肠组织IL-10浓度的测定按4ml/g组织的比例加人生理盐水，匀浆，匀浆液3000r/min离心10min后吸取上清，采用

7、ELISA法测定肠组织IL10浓度，按试剂盒说明进行。1.2.4免疫组化检测肠组织IL-1β表达操作按照SP免疫组化染色试剂说明书进行。一抗稀释浓度为IL1β（1∶100）。以PBS代替一抗,作为阴性对照。结果判断：细胞呈棕黄色为阳性。IL1β表达于胞浆，每张切片计算任意10个高倍视野（200×）中阳性细胞所占的百分比例。2结果2.1结肠大体形态和组织学评分大体观察，三硝基苯磺酸模型组肉眼观察到病变主要在近肛门段结肠，可见结肠黏膜充血水肿、糜烂、溃疡形成。EGB组及5ASA组显著改善UC大鼠结肠大体形态评分（P0.01）。见表1。表1EGB对大鼠实

8、验性结肠炎肠组织大体形态、组织学评分和MPO活性的影响(略)组织学