VEGF 反义寡核苷酸抑制胆囊癌生长增殖和凋亡的体外实验研究.doc

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1、VEGF反义寡核苷酸抑制胆囊癌生长增殖和凋亡的体外实验研究作者：庞作良,李海军,毛拉艾沙·买买提【摘要】目的体外研究Oligofectamine介导的VEGF反义寡核苷酸转染对胆囊癌GBCSD细胞生长、增殖和凋亡的影响。方法运用Oligofectamine介导VEGF反义寡核苷酸(Antisenseoligodeoxynucleotides，ASODN)和错义寡核苷酸(ScrambledOligodeoxynucleotide，SODN)转染人胆囊癌GBCSD细胞，MTT法测定转染后各组细胞的生长曲线及抑制率，流式细胞术检测转染后不同

2、时间各组细胞凋亡情况。结果SODN、SODN+Oligofectamine对GBCSD细胞生长无显著影响(P＞0.05)，而ASODN及ASODN+Oligofectamine则能显著抑制细胞生长(P<0.05)，且ASODN+Oligofectamine对细胞生长增殖抑制作用较ASODN组更为强(P<0.05)。流式细胞术检测结果发现ASODN+Oligofectamine能促进GBCSD细胞凋亡(P<0.05)。结论VEGFASODN转染能抑制胆囊癌GBCSD细胞生长和增殖，Oligofectamine介导能明

3、显增强VEGFASODN的抑制作用；Oligofectamine介导VEGF反义寡核苷酸转染能促进胆囊癌GBCSD细胞的凋亡。【关键词】胆囊癌细胞株GBCSD；VEGF；反义寡核苷酸；Oligifectamine；凋亡　　ExperimentofOligofectamineMediatedVEGFASODNTransfectiononGBCSDCellGrowth,ProliferationandApoptosisinVitro　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectofoligofect

4、aminemediatedVEGFASODNtransfectiononGBCSDcellgrowth,proliferationandapoptosisinvitro.MethodsGBCSDcellsweretransfectedwithVEGFASODNandSODNmediatedbyoligofectamine.ThechangeoftransfectedGBCSDcellsgrowthandproliferationactivitybyMTT,andapoptosisbyflowcytometrywereassessed

5、.ResultsThetransfectedGBCSDcellsgrowthandproliferationactivitytestedingroupsofSODNandSODN+oligofectaminehadnodifferenceascomparedwithcontrolgroup(P>0.05),butasforthecellsofASODNandASODN+oligofectamine,thegrowthandproliferationactivityweresignificantlyinhibited(P<0.

6、05),moreover,theeffectofASODN+oligofectaminewasmoresignificantthanthatofASODN(P<0.05).TheresultsofflowcytometryrevealedASODN+oligofectaminecouldacceleratetransfectedGBCSDcellsapoptosis(P<0.05).ConclusionVEGFASODNcouldinhibitGBCSDcellsgrowth,proliferationandacceler

7、ateapoptosis.TheoligofectaminecouldstrengthentheeffectofASODN.6　　Keywords：GBCSDcell;VEGF;ASODN;Oligifectamine;Apoptosis　　0引言　　VEGF通过与其特异性受体(VEGFR)结合，刺激血管内皮细胞增殖和迁移，促进新生血管生成，在肿瘤的生长和转移中起重要作用。抑制VEGFR信号转导通路的任何一个环节，就可能防止肿瘤的进展与转移。ASODN因有专一序列的寡聚脱氧核苷酸，故能特异阻断靶基因的复制、转录和翻译，是目前迅速发展的一

8、种新型的基因治疗药物[1]。Oligofectamine是一种专门用于寡核苷酸转染的阳离子脂质体，具有较高转染率。本实验体外运用Oligofectamine介导的VEGFASODN转染人胆囊癌