EGCG对高糖诱导的大鼠系膜细胞增殖及炎症因子调控的影响.doc

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1、EGCG对高糖诱导的大鼠系膜细胞增殖及炎症因子调控的影响【摘要】目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对高糖诱导的大鼠系膜细胞增殖及炎症因子（MCP1和ICAM1）分泌的影响。方法通过体外培养的大鼠系膜细胞进行研究。设立低糖对照组（NG）和高糖组（HG、E100、E200、E400，为分别含EGCG0、100、200、400μg·L-1），分别培养12、24、48h。CCK细胞计数法检测不同浓度EGCG作用下大鼠系膜细胞的OD值，判断细胞增殖情况。采用ELISA方法检测培养细胞上清中MCP1和ICAM1蛋白浓度。结果EGCG能抑制高糖时系膜细胞的增殖活性，其抑制作用呈剂量和

2、时间依赖的方式。系膜细胞处于高糖环境时，MCP1和ICAM1蛋白表达上调，低浓度的EGCG对MCP1和ICAM1蛋白的抑制效果不明显，高浓度的EGCG能明显抑制MCP1和ICAM1的分泌。结论在体外高糖条件下，大鼠系膜细胞在48h内以增殖为主，一定浓度的EGCG可抑制其增殖。EGCG可在蛋白水平抑制高糖刺激的大鼠系膜细胞MCP1和ICAM1的分泌。【关键词】糖尿病肾病；系膜细胞；单核细胞趋化蛋白1；细胞间粘附分子1；表没食子儿茶素没食子酸酯ABSTRACT：ObjectiveToexploretheeffectsofepigallocatechin3gallate

3、(EGCG)onproliferationofmesangialcellsandthecontentsofMonocytechemoattractantprotein1(MCP1)andintercellularadhesionmolecule1(ICAM1)inhighglucoseculturedratmesangialcells.MethodsRatmesangialcellsweredividedintocontrolgroup(lowglucose5.5mmol·L-1withoutEGCG)andexperimentgroups(highglucose25mmol·L

4、-1withEGCG(0,100,200,400μg·L-1),eachgroupwasincubatedfor12,24,48hours.ThegrowthinhibitingeffectofEGCGonmesangialcellswasmeasuredbyCCK8methods.ThelevelsofMCP1andICAM1insupernatantweredeterminedbyenzymelinkedimmunosorbantassay(ELISA).ResultsTheresultsshowedthathyperglycemiastimulatedmesangialce

5、llproliferationandreleaseofMCP1andICAM1.EGCGcouldinhibitcellgrowthinadoseandtimedependentmanner.Inaddition,highconcentrationsofEGCGcouldalsodecreasethelevelsofMCP1andICAM1insupernatant.ConclusionEGCGcansignificantlyinhibitproliferationandsecretionofMCP1andICAM1inhighglucoseinducedratmesan

6、gialcells.KEYWORDS:Diabeticnephropathy;Mesangialcell;Monocytechemoattractantprotein1;Intercellularadhesionmolecule1;Epigallocatechin3gallate5糖尿病肾病（DN）是糖尿病特有的慢性微血管并发症，其病变周围常有大量单核/巨噬细胞浸润，后者与细胞粘附分子及化学趋化因子有关。SassyPrigent等[1]证实在链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型中，肾小球表达过量的细胞间粘附分子1(ICAM1)、VCAM1及单核细胞趋化蛋白1(MCP

7、1)等细胞因子，导致单核巨噬细胞浸润，随后出现IV型胶原链mRNA增加，系膜细胞面积增加及肾小球肥大。说明糖尿病状态下肾组织中粘附分子、趋化因子导致早期单核/巨噬细胞浸润在致肾小球硬化中起着重要作用。表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin3gallate,EGCG）为绿茶中的一种有效成分。茶多酚具有清除自由基、抗脂质过氧化、抗突变、抗肿瘤、抗炎、抗病毒和增强机体免疫功能等多种生物学效应，对肥胖、糖尿病、肿瘤