噪声所致耳蜗毛细胞表达ＮＦ－κＢ中维生素Ｅ的调节.doc

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1、噪声所致耳蜗毛细胞表达ＮＦ－κＢ中维生素Ｅ的调节【摘要】目的探讨维生素E在噪声暴露引起的大白鼠听力损伤有明显的保护作用及机制。方法健康雄性纯种Wistar大鼠9只，鼠龄2~3个月，体质量180~200g,由长春市高新开发区实验动物中心提供（清洁级）。无噪声暴露及耳毒性药物使用史，耳廓反射正常，实验前清洁外耳道，显微镜下检查均无中耳炎。以听阈、耳蜗基底膜铺片及免疫荧光染色为指标，观察大白鼠在稳态噪声持续暴露之前30d至暴露后7d，灌维生素E及生理盐水，对大白鼠听觉脑干电位分析和耳蜗外毛细胞（OHC）丢失率分析及NF-κB在耳蜗毛细胞中

2、表达定量分析。结果维生素E在噪声暴露后大白鼠听力阈值明显低于单纯噪声组，OHC丢失率也明显降低，免疫荧光染色结果显示VE干预组的耳蜗细胞表达NF-κB的强度低于单纯噪声组（P<0．05）。结论维生素E在噪声暴露引起的大白鼠听力损伤有明显的保护作用，通过上调耳蜗毛细胞中NF-κB的表达。　　【关键词】噪声；耳蜗;毛细胞；维生素E；NF-κB　　　　【Abstract】ObjectiveTodiscusstheprotectionandmechannismofvitaminEintheratshearingimpairme

3、ntinducedbynoiseexposure.MethodsTaketheaudibilitythresholdbasilarmembranestretchedpreparationandimmunofluorescencestainastheindex,observingthattheratswereputinthestationarynoisebefore30daysuntilafterthatfor7days,havevitaminEandsodiumchloride,checktheauditorybrainstempo

4、tentialandthelostrateandNF-κBoftheOHCinthecochleahaircellsexpressionquantitativeanalysis.ResultAfterthenoiseexposure,theratswhichhavevitaminEhavesignificantlowerauditoryacuitythresholdthanthepurelynoiseexposure,andmuchlowerlostrateofOHC.Lmmunofluorescencestaindemonstra

5、tethatthegrouphavevitaminEhavelowerintensityofNF-κBexpressioninthecochleahaircells,(P<0．05).ConclusionvitaminEhasobviousprotectioninthehearingimpairmentofrats,workingoutbyupregulationofNF-κBexpressioninthecochleahaircells.　　【Keywords】Noise;Cochlea;HaircellvitaminE;

6、NF-κB　　　　噪声可产生可恢复的暂时性阈移（TTS）或不可恢复的永久性阈移（PTS），甚至造成噪声性耳聋。对噪声性听力损伤机制迄今尚无明确报道。本实验在大白鼠噪声暴露前30天至暴露后7d灌胃维生素E，对其防止TTS转变为PTS及促进听力恢复有无保护作用进行探讨。分析维生素E干预噪声听觉损伤与耳蜗毛细胞中NF-κB的表达的关系，确定VE减少噪声引起的毛细胞死亡的分子机制。　　1材料与方法　　1．1动物分组与处理选择鼓膜听觉脑干电位仪测4000Hz频率双耳听阈在23~28dB的健康雄性大白鼠30只，体质量180~200g；随机

7、分为3组；正常组12只（24耳）维生素E组12只（24耳），单纯暴露组12只（245耳）。维生素E组在暴露前30d至暴露后7d连续灌胃［4mg/（kg•d）］。单纯暴露组在暴露前30d至暴露后7d连续灌胃0．9％生理盐水［5ml/（kg•d）］。噪声暴露：连续用药30天后即行噪音暴露，将动物置于小笼内(40cm×30cm×30cm)每笼2只，放入暴露舱（0．5m×1．5m×0．5m）用UZ-3型噪声发生器发生，A-K200功率放大器放大，有位于暴露舱四周的扬声器向暴露舱播放。暴露时用声压计进行连续监测，噪音保

8、持在频率为4000Hz，平均声强为116dBSPL（soundpressurelevel）。动物暴露范围内声扬不均匀度为±2dB。持续暴露6h。　　1．2听阈测试测试在隔音屏蔽室内进行，10％水合氯醛（330mg/kg）腹腔注射，麻