霍乱检测医学课件

《霍乱检测医学课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、弧菌属(Vibrio)侯珏临床微免教研室目的与要求1、掌握霍乱弧菌及副溶血弧菌的主要生物学性状、微生物鉴定方法2、熟悉霍乱弧菌及副溶血弧菌致病性一、概述弧菌科包括4个菌属弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属发光杆菌属共性：革兰氏染色阴性氧化酶阳性发酵糖类具有极端单鞭毛弧菌属分布广泛,水中最多共36个种,引起人类致病的14种短小弧形,革兰阴性菌单鞭毛能发酵葡萄糖氧化酶阳性对弧菌抑制剂O/129（二氨基二异丙基喋啶）敏感钠离子能刺激其生长一霍乱弧菌(Vibriocholerae)霍乱弧菌是霍乱的病原菌我国《传染病防治

2、法》:甲类传染病国际检疫的烈性传染病到目前为止共发生了七次霍乱世界大流行流行情况1817-1923年六次大流行（均从印度恒河三角洲发源地）古典生物型1961年第七次大流行ElTor生物型1992年亚洲流行（印度、盂加拉、泰国）O139群一、生物学特性形态与染色革兰氏染色阴性弧型或逗点状,米泔水样粪便涂片镜检：可见“鱼群样排列"单端单鞭毛，无荚膜，无芽胞活菌悬滴镜检,可见“穿梭或流星状运动”霍乱弧菌（革兰染色，1000倍）Vibriocholeraewithitssinglepolarflagellum.

3、营养要求不高，生长较快兼性厌氧最适生长温度：37℃怕酸嗜碱，最适pH:7.2-7.4pH:7.4-9.6快速生长培养特性培养特性选择性的增菌培养基:碱性蛋白胨水pH8.5常用的强选择性培养基：庆大霉素琼脂(GTA)pH8.4-8.5四号琼脂pH8.4硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(TCBS琼脂)pH8.6常用的弱选择性培养基：碱性琼脂pH8.4碱性胆盐琼脂pH8.4培养特性菌落特征TCBS琼脂：形成圆形、微凸、表面光滑湿润整齐、大黄色菌落庆大霉素培养基：扁平、湿润、半透明菌落中心呈灰褐色血琼脂

4、上形成的菌落较大，ELTor生物型可形成β-溶血霍乱弧菌培养于TCBS琼脂（37℃，18小时）发酵蔗糖产酸而使菌落呈黄色生化反应发酵葡萄糖、甘露醇、蔗糖，产酸不产气能分解色氨酸赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶（+）精氨酸双水解酶（-）氧化酶（+）抗原性O抗原：耐热，耐受100℃2h特异性高，分群和分型的基础H抗原：不耐热，特异性低霍乱弧菌的抗原结构特性O抗原H抗原属共同抗原＋群特异性＋－型特异性＋－耐热性（100℃2h）＋－抗原性根据O抗原不同:霍乱弧菌分155个血清群根据与O1抗血清凝集与否：O1群：与O1抗血清

5、凝集（+）非O1群：与O1抗血清凝集（-）O1群根据表型差异：古典生物型ELTor生物型菌体抗原（A、B、C)不同：小川型(AB)稻叶型(AC)彦岛型(ABCO1群霍乱弧菌的血清分型型别别名O抗原成份原型稻叶型（Inaba）A、C异型小川型（Ogawa）A、B中间型彦岛型（Hikojima）A、B、C血清型：O1群霍乱弧菌的菌体抗原由A、B、C三个抗原成份组成性状生物型古典型ELTorⅣ组噬菌体裂解+-Ⅴ组噬菌体裂解-+对多粘菌素B的敏感性+-鸡RBC凝集-+羊RBC溶血-+V-P-+霍乱弧菌两个生物

6、型的鉴别生物型：根据表型差异,O1群霍乱弧菌有古典生物型和E1Tor生物型之分鸡红细胞凝集试验：在玻片上滴加生理盐水一滴，取被检菌18-24h培养物少许在盐水中制成浓厚菌悬液，然后加一滴2.5％鸡红细胞悬液，充分混匀，1min内出现凝集者为阳性，红细胞呈均匀分散者为阴性。ElTor生物型为阳性，古典型为阴性。分型和分群（一）、血清學分群（型）血清群生物型血清型古典型小川型(AB)稻叶型(AC)彦岛型(ABC)O1群小川型(AB)ElTor型稻叶型(AC)彦岛型(ABC)非O1群(O2-群)霍乱弧菌的变异

7、性形态变异弧型→直杆状菌落变异S←→R←→L溶血性变异（ElTor型）溶血性←→非溶血性传代毒力变异强毒株←→弱毒株←→无毒株血清型别变异彦岛型←→小川型←→稻叶型变异性抵抗力水中存活20天怕酸耐碱庆大霉素耐药消毒漂白粉：吐泻物（1：4）,1hr二、临床意义致病物质侵袭力：鞭毛菌毛霍乱肠毒素（choleraenterotoxin,CE)霍乱肠毒素1个A亚单位毒性单位A1肽链具有激活腺苷酸环化酶的酶活性A2肽链结合B亚单位；参与转位5个B亚单位（4～6）结合单位特异地识别肠上皮细胞膜上的神经节苷脂受体致病

8、机理霍乱弧菌胃对酸敏感，很快被杀死肠胃酸降低或缺乏，菌体增多鞭毛、菌毛、粘液素酶绒毛上大量繁殖CT的B亚单位结合神经节苷脂受体形成膜通道A1肽链进入细胞ATP→cAMP↑大量体液和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻大量脱水和失盐发生代谢性酸中毒，血循环衰竭，甚至休克或死亡激活腺苷酸环化酶系统粘膜细胞分泌亢进、Na+、Cl-吸收抑制二、临床意义所致疾病霍乱烈性肠道传染病我国的法定传染病（甲类）表现为剧烈的上吐下泻泻出物呈“米泔水样”，并含大量弧菌，