腹腔镜检查结合RTPCR在胃癌诊疗中的临床意义.doc

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1、腹腔镜检查结合RTPCR在胃癌诊疗中的临床意义【摘要】目的：探讨进展期胃癌术前腹腔镜检查与RTPCR检测腹腔灌洗液中游离癌细胞CEAmRNA的表达水平，在胃癌患者术后微转移及预后的临床意义。方法：对22例进展期胃癌患者术前行腹腔镜探查，灭菌生理盐水冲洗腹腔4～5次，收集脱落细胞，进行细胞学检查和RTPCR检测CEAmRNA表达水平。结果：22例胃癌患者中，细胞形态学检测31.8%（7/22）阳性，RTPCR检测54.5%(12/22)CEAmRNA阳性表达，二者阳性率有显著性差异(P＜0.05)。结论：诊断性腹腔镜检查、RTPCR与PLC有效结合，可提高腹腔转移复发诊断的灵敏

2、性和特异性，有助于对胃癌分期、淋巴转移和预后的综合判断，对胃癌的辅助治疗提供依据。【关键词】腹腔镜检查胃肿瘤游离癌细胞RTPCR　　TheclinicalsignificanceoflaparoscopycombinedwithRTPCRingastriccarcinomadiagnosisandtherapy　　【Abstract】Objective:ToexploretheclinicalvalueofpreoperativelaparoscopyofprogressivegastriccancercombinedwithRTPCRmonitoringofCEAmRNAexp

3、ressionofperitoneallavagefluid(PLF)inmicrometastasisandprognosisofpostoperativepatientswithgastriccancer.Methods：Beforeoperation,weexaminated22patientswithprogressivegastriccancerbylaparoscopy,washingabdominalcavitywith0.9%NSabout4to5times,andcollectedperitonealfreecellsdetectedbycytologyandRTP

4、CRanalysis.Results:Theoverallpositiverateofcytologywas31.8%（7/22),RTPCRpositiveratewas54.5%(12/22),whichwassignificantlyhigherthancytologyfindings(P＜0.05).Conclusions:Theefficientassociationofdiagnosticlaparoscopy,RTPCRandPLC(peritoneallavagecytology)canimprovediagnosticspecialtyandsensitivity

5、ofperitonealmetastasis.Itisconducivetocomprehensiveevaluationofgastriccancerstaging,lymphnodemetastasisandprognosis,whichwillprovideevidenceforadjuvanttherapyofgastriccancer.　　【Keywords】Diagnosticlaparoscopy;Gastriccarcinoma;Freecancercells;RTPCR　　胃癌在我国的患病率和死亡率均居恶性肿瘤前列，手术是最有效的治疗方法，但半数以上的患者术后复发转

6、移，从而导致手术失败。腹腔游离癌细胞(freecancercells，FCC)在腹腔内形成肉眼或HE染色均不能发现的微转移灶是胃癌复发的重要原因。Nakanishi等［1］提出侵及浆膜层的肿瘤细胞易于脱落的原因与肿瘤细胞缺乏CD44和β5intergin粘附分子表达有关，IFCCs在腹腔细胞刺激因子作用下，生物活性增高，侵及腹膜下组织形成微小转移灶，致术后转移扩散。本研究首次运用腹腔镜的微创伤性、RTPCR的特异性和灵敏性检测腹腔灌洗液(peritoneallavagefluid,PLF)中游离癌细胞及其CEAmRNA表达水平，明确胃癌腹腔转移的形成机制，为胃癌的临床诊疗提供依据。

7、　　1资料与方法　　1.1试剂与设备RTPCR试剂、琼脂糖、DNAMarker、DEPC水、Taq酶购自上海生工；CEA(p15'gagcgaacctcaacctctcctgccact3';p25'tgtagctgttgcaaatgctttaaggaagaagc3',367bp)引物由上海博亚合成；TRIzol试剂购自Invitrogin公司；腹腔镜、离心机、5700PCR扩增仪、超低温冰箱、电泳仪、凝胶成像系统。　　1.2手术方法