腹腔镜检查与RTＰCR在胃癌诊疗中的临床意义.doc

《腹腔镜检查与RTＰCR在胃癌诊疗中的临床意义.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、腹腔镜检查与RTＰCR在胃癌诊疗中的临床意义作者：张茂修，张光永，汪运山，孙善会，刘杨　【摘要】目的：探讨进展期胃癌术前腹腔镜检查与RTＰCR检测腹腔灌洗液中游离癌细胞CEAmRNA的表达水平，在胃癌患者术后微转移及预后的临床意义。方法：对52例进展期胃癌患者术前行腹腔镜探查，灭菌生理盐水冲洗腹腔4~５次，收集脱落细胞，进行细胞学检查和RTＰCＲ检测ＣＥＡmRNA表达水平。结果：52例胃癌患者中，细胞形态学检测326％（１７／52）阳性，RTＰＣR检测５５８％（29/52)ＣＥＡmＲＮＡ阳性表达，二

2、者阳性率有显著性差异（P＜005）。结论：诊断性腹腔镜检查、ＲＴＰＣＲ与ＰＬＣ有效结合，可提高腹腔转移复发诊断的灵敏性和特异性，有助于对胃癌分期、淋巴转移和预后的综合判断，对胃癌的辅助治疗提供依据。　　【关键词】腹腔镜；胃癌；游离癌细胞；ＲＴＰＣＲ　　TheclinicalsignificanceoflaparoscopycholandRTPcringastriccarcinomadiagnosisandtherapy　　【Abstract】Ｏbjective:ToevaluateCEAmRNAex

3、pressionofperitoneallavagefluid(PLF)ofpatientswithprogressivegastriccancerbylaparoscopyandRTPCRbeforeoperation,weassessperitonealmetastasisandprognosisafteroperationMethods:Beforeoperation,wehandled52patientswithprogressivegastriccancerbylaparoscopy,wa

4、shingabdominalcavitywith09%NSabout4~5times,andcollectedperitonealfreecellsdetectedbycytologyandRT-PCRResults:Theoverallpositiverateofcytologywas326%(17/52),RTPCRpositiveratewas558%(29/52);therateofRTPCRwassignificantlyhigherthancytologyfindings(P<00

5、5)Conclusions:TheefficientassociationofdiagnosticLC、RTPCRandPLC(peritoneallavagecytology)canhelpimprovingdiagnosticspecialtyandsensitivityofperitonealmetastasis,syntheticallyanalyzingtherelationofstageclassification、lymphnodemetastasisandprognosis,inor

6、dertoprovideinformationforfurtheradjuvanttherapy　　【Keywords】Laparoscopy；Ｇastriccarcinoma;Freecancercells;RTPCR　　胃癌在我国的患病率和死亡率均居恶性肿瘤前列，手术是最有效的治疗方法，但半数以上的患者术后复发转移，从而导致手术失败。国内外学者研究发现腹腔游离癌细胞（freecancer5cells，FCC）在腹腔内形成肉眼或ＨＥ染色均不能发现的微转移灶是胃癌复发的重要原因。Nakanishi等

7、［１］提出侵及浆膜层的肿瘤细胞易于脱落的原因与肿瘤细胞缺乏CD44和βintergin粘附分子表达有关，IFCCs在腹腔细胞刺激因子作用下，生物活性增高，侵及腹膜下组织形成微小转移灶，致术后转移扩散。本研究首次运用腹腔镜的微创伤性、ＲＴＰCＲ的特异性和灵敏性检测腹腔灌洗液（peritoneallavagefluid，PLF）中游离癌细胞及其ＣＥＡmRNA表达水平，明确胃癌腹腔转移形成机制，为胃癌的临床诊疗提供依据。　　1　材料与方法　　11　试剂与设备　　RTＰCR试剂、琼脂糖、DNAMarker、

8、DEPC水、Taq酶购自上海生工；ＣＥＡ（pl5’gagcgaacctcaacctctcctgccact-3’；p25’tgtagctgttgcaaatgctttaaggaagaagc３’，367bp)引物由上海博亚合成；ＴＲＩzol试剂购自Invitrogin公司;腹腔镜、离心机、5700PCR扩增仪、超低温冰箱、电泳仪、凝胶成像系统。　　12　方法　　12１　细胞的收集　　2000年3月至2003年12月山东大学第二医院行腹腔镜探查的进展期胃癌患者５２例，男42例