《玉米秸秆低温高效降解复合菌系的筛选方法》标准征求意见稿

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1、ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DB15内蒙古自治区地方标准DB15/XXXXX—XXXX玉米秸秆低温高效降解复合菌系的筛选方法TheScreeningMethodforaCompositeMicrobialSystemwithAbilityofEfficientlyDegradationCornStalkatLowTemperature点击此处添加与国际标准一致性程度的标识XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施内蒙古自治区质量技术监督局发布DB15/XXXXX—XXXX前言针对北方地区因秋冬季气候干旱、寒冷而导致玉米秸秆直接还田当季腐解困难的问题

2、，从高海拔低温地区的不同类型土壤、多年连作玉米田、粪便等自然界微生物群落中，筛选能够在相对较低温度（10℃-15℃）条件下有效降解玉米秸秆的微生物菌系，特制定本标准。本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由内蒙古农业大学提出。本标准归口单位：内蒙古农业大学。本标准起草单位：内蒙古农业大学农学院。本标准主要起草人：高聚林，青格尔，于晓芳，王振，王志刚，闹干朝鲁，胡树平，孙继颖，谢岷，苏治军。7DB15/XXXXX—XXXX玉米秸秆低温高效降解复合菌系的筛选方法1　范围本技术规范给出了玉米秸秆低温高效降解复合菌系的筛选过程中所涉及的相关术语、定义、符号、缩略语，规定了

3、筛选菌系所用培养基及试剂，以及复合菌系的筛选、驯化、酶活检测、秸秆降解率等技术规范及计算方法。本标准适用于4℃-15℃低温条件下玉米秸秆降解微生物的筛选。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB／T6682分析实验用水规格和试验方法QB2583-2003纤维素酶制剂GB20287-2006农用微生物菌剂GB/T23811-2009饲用纤维素酶活性的测定滤纸法GB／T6682分析实验用水规格和试验方法本标准酶活力的测定，参考了IUPAC，FCC，

4、JECFA推荐的方法以及国内外相关企业标准的测定方法，通过反复试验，验证修改而成。3　术语和定义下列术语、定义、符号、缩略语适用于本标准。3.1　纤维素酶Cellulases在各种酶组分的协同作用下，能降解纤维素，使之变成纤维寡糖、纤维二糖和葡萄糖的酶。3.2　纤维素酶活：1min释放1umol葡萄糖所需酶量为一个单位（U/mL或U/g）。3.3　滤纸酶活Filterpaperactivity(FPA),1g固体酶或ml液体酶，在温度50±0.1℃，在指定pH条件下（酸性纤维素酶pH4.8，中性纤维素酶pH6.0），水解滤纸底物1h，产生出相当于1mg葡萄糖的还原糖量，为1个酶活单

5、位，以U/g或U/ml表示。3.4　内切-β-1,4-葡聚糖酶活Endoβ-1,4-glucanase,EC3.2.14（Cx）1g固体酶或ml液体酶，在温度50±0.1℃，在制定pH条件下（酸性纤维素酶pH4.8，中性纤维素酶pH6.0），水解羧甲基纤维素钠底物1h，产生出相当于1mg葡萄糖的还原糖量，为1个酶活单位，以U/g或U/ml表示。3.5　外切-β-1,4-葡聚糖酶活Exoβ-1,4-glucanase,EC3.2.91（C1）7DB15/XXXXX—XXXX1g固体酶或ml液体酶，在温度50±0.1℃，在制定pH条件下（酸性纤维素酶pH4.8，中性纤维素酶pH6.0）

6、，水解脱脂棉底物1h，产生出相当于1mg葡萄糖的还原糖量，为1个酶活单位，以U/g或U/ml表示。1.1　β-葡萄糖苷酶β-glucosidase，EC3.2.1.21（CB）1g固体酶或ml液体酶，在温度50±0.1℃，在制定pH条件下（酸性纤维素酶pH4.8，中性纤维素酶pH6.0），水解水杨苷底物1h，产生出相当于1mg葡萄糖的还原糖量，为1个酶活单位，以U/g或U/ml表示。2　计算方法2.1　纤维素酶活计算：X=A/(M×t)×1000×n式中X--表示纤维素酶活，单位为U/mL或U/g；A--根据标准曲线方程计算而得的对应葡萄糖的质量，单位为mg；M--葡萄糖的摩尔质量

7、，180.2g/mol；T--酶解反应时间，单位为min；1000--转化因子，1mmol=1000umol；n--粗酶液的稀释倍数。2.2　秸秆降解率（%）=失重法（（W0-W1）/W0×100%式中W0--接种前培养基中的秸秆重（g）；W1--培养结束烘干后降解剩余物重（g）。3　要求3.1　筛选生产所用的微生物菌种应无毒、安全、有效。3.2　每个试验均进行平行试验，测定结果用算术平均值表示，保留2位有效数字。在重复性条件下的两次测定，所得结果相对偏差不超过20%