大赛璐手性柱注意事项

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1、注意事项及常见问题多糖涂敷型键合型CR（+），MA（+）AGP其他Daicel大部分手性柱是涂敷型产品，在市场上具有独特性。若导入错误的溶剂(CH2Cl2、乙酸乙酯、甲苯等)，柱子会马上被破坏。当流动相或样品溶液导入错误的溶剂时，柱压剧增，分离突然变差。一旦错误地使用了溶剂，重新恢复柱子性能的可能性很低。若您遇到此类分析故障，请对照出厂报告重新确认柱子的性能或与大赛璐联系多糖涂敷型Daicel正相手性柱的流动相和样品溶液不能使用水溶液。若不小心导入水，柱子不会彻底受损。只需要使用色谱级无水乙醇低流速将水置换出

2、来。Daicel反相手性柱，水相的含量不高于90%.多糖涂敷型将手性柱接入液相色谱仪之前，彻底清洗管路1.用异丙醇将HPLC所有管路彻底清洗。2.用流动相将HPLC所有管路彻底清洗。所有溶剂入口泵泵与进样阀之间定量环进样阀清洗液进样阀与柱子之间柱子与检测器之间检测器多糖涂敷型正相多糖涂敷型柱通常保存溶剂为Hexane/IPA=90/10，室温保存。反相多糖涂敷型柱通常保存溶剂为H2O/ACN=60/40～80/20，室温保存。多糖涂敷型IA,IB和IC等键合柱可用于正相，也可用于反相。但需要小心过渡，通常用异

3、丙醇。IA修复方法：先用EtOH小流速冲洗30min，再用DMF，小流速冲洗3小时，然后EtOH过渡，验柱。若效果不好，再用EtOH冲洗30min，然后THF冲洗2小时。IB，IC修复方法：用乙酸乙酯冲洗30min-120min，在室温下保存2天或更久。验柱。键合型CR（+）MA（+）安装色谱柱前，整个仪器管路先用纯水清洗，再用流动相清洗。CR（+），甲醇的含量低于15%.样品中不含钾离子。使用后保存在纯水中，放置于冰箱。MA（+），甲醇或乙腈的含量低于15%.硫酸铜aq.保存。CR（+）-出峰不断提前，或没

4、有保留。这是填料流失的表现，主要是由于甲醇的比例超过15%或是系统中进了有机溶剂造成的，以上情况造成的填料流失是不可逆的损坏，柱子将无法修复。可能造成此现象的原因：泵的抽力不正常配制的高氯酸水溶液密度不均匀流动相中甲醇的比例超过15%在使用前未用纯水彻底冲洗整个系统样品溶解过程中使用了甲醇等有机溶剂，或者油状样品中有有机溶剂残留流动相及样品溶液中有K+存在CR（+）MA（+）IPA含量最好低于25%，其他有机相含量最好低于15%.建议使用温度：20℃-25℃.pH范围：4-7.缓冲盐溶液浓度不超过100mM.

5、AGP流动相或样品溶液过滤不彻底，固体颗粒堵塞管路或柱头，会引起柱压过高。样品中成分在柱头析出或强烈吸附，会引起柱压升高。流速过快，会引起柱压过高，特别是当使用粘度高的溶剂，如IPA,EtOH，流速应控制在0.1-0.3ml/min每种柱子有特定的承压范围，请仔细参照相应的《色谱柱说明书》。彻底过滤流动相及样品溶液。样品预处理更换流动相时，或者刚把柱子刚接上仪器的时候，逐步增加流速仪器设定保护柱压原因：后果：长期超压会引起柱头塌陷，反压上升，柱效下降。解决方法：其他-压力残留物在普通流动相中可长时间地稳定保留

6、1.用醇洗涤可除去大部分的碱性残留物2.用酸洗涤也可除去碱性残留物3.用碱洗涤可除去酸性残留物4.或分开使用酸性条件手性柱和碱性条件手性柱其他-“残留效应”问：手性柱谱图中异构体的分离度下降了，可能是什么原因，该怎么办？答：分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化，或者色谱柱受损柱效发生了变化。首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分离度下降，如果排除了各种外在因素就有可能是分析柱本身的柱效下降导致的。如果分离度在短时间内急剧下降伴随柱压上升，可能是有强极性溶剂损害了柱子；如

7、果分离度在长时间内慢慢下降，可能是柱头受污染或柱头塌陷，需要更换保护柱或者更换分析柱。其他-分离度下降其他-峰裂分现象问：手性柱谱图中的峰出现裂分，可能是什么原因，该怎么办？答：峰裂分的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化，或者色谱柱受损柱效发生了变化。有时样品溶液浓度太高，进样量太大也会裂缝，这种情况只需减少浓度进样量即可。如果排除了各种外在因素，那么色谱柱本身的原因可能是柱头被污染，或者柱压太高导致柱头塌陷。柱头污染的话，可以按照说明书采用不同的溶剂溶剂冲洗色谱柱，最好是反方向冲洗；或者更换保护柱。

8、如果是压力太高导致柱头塌陷，那么除了增补填料，基本没有其他方法补救了，只能更换色谱柱。问：基线不稳定可能是哪些原因，如何解决？答：1.仪器刚从反相置换到正相系统时，基线会不稳定，只需要多平衡一会儿即可。2.检测器污染。卸下检测器，更换透镜；或者取出透镜，用甲醇、异丙醇、水或其他溶剂（根据该仪器平时的使用情况而定）超声清洗。安装时注意透镜的方向，一面是平面，一面凸透。3.确认使用的两元（或三元四元）流