正相手性色谱柱常见问题

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1、Q：正相手性色谱柱使用前需要注意什么?A：将正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H接上液相色谱仪之前先要保证液相色谱系统中的所有管路均为正相流动相。如果液相系统里面是反相溶液，比如水/乙腈=50/50(v/v)。那么需要先用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路（包括所有溶剂入口、六通阀、检测器等），然后用正相流动相冲洗液相的所有管路，最后再接上正相手性色谱柱；如果液相系统的反相流动相中含有缓冲盐，要先用纯水冲洗HPLC系统，然后用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路，最后用正相流动

2、相冲洗。Q：正相手性色谱柱中保存液是什么?A：正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H中的保存液是正己烷/异丙醇=90/10(v/v)。其它手性色谱柱的保存液请查阅使用说明书上的说明。Q：新柱CHRALPAKIA和CHRALPAKIB与原来的大赛璐手性柱有什么区别？A：CHRALPAKIA和CHRALPAKIB是将多糖衍生物共价键合在硅胶上，而大赛璐原来的手性柱固定相都是将多糖衍生物涂敷在硅胶表面的。正因为是共价键合，所以CHRALPAKIA和CHRALPAKIB柱能使用任何液相流动相，比如

3、四氢呋喃、氯仿、丙酮、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯等。CHRALPAKIA和CHRALPAKIB与大赛璐原有的正相柱相比，扩大了溶剂选择的范围，增加了新的分离选择性，在原来大赛璐手性色谱柱上分不开的化合物有可能在CHRALPAKIA和CHRALPAKIB上得以分开。CHIRALPAK®IA是将淀粉-3,5-二甲苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面（5µm），相应的涂敷型色谱柱是CHIRALPAK®ADCHIRALPAK®AD-H）；CHIRALPAK®IB是将纤维素-3,5-二甲苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面（5µM）

4、,相应的涂敷型色谱柱是CHIRALCEL®OD（CHIRALCEL®OD-H）；CHIRALPAK®IC将纤维素-3,5-二氯苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面（5µM）（注意：相应的涂敷型色谱柱没有商品化）。Q：CHIRALPAKAD-H、CHIRALPAKAS-H、CHIRALCELOD-H、CHIRALCELOJ-H四款正相色谱柱的区别是什么？A：区别是固定相的种类不同。CHIRALPAKAD-H、AS-H的硅胶表面涂敷的是直链淀粉衍生物；CHIRALCELOD-H、OJ-H的硅胶表面涂敷的是纤维素衍生

5、物。CHIRALPAKAD-H的硅胶表面涂敷的是直链淀粉－三(3,5－二甲苯基氨基甲酸酯)；CHIRALPAKAS-H硅胶表面涂敷有直链淀粉-三[(S)-α-甲基苄基氨基甲酸酯；CHIRALCELOD-H硅胶表面涂敷有纤维素-三[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯];CHIRALCELOJ-H硅胶表面涂敷有纤维素-三[4-甲基苯甲酸酯]。不同种类的多糖衍生物决定了这些手性柱的分离对象各不相同，既相互包含，又相互补充。Q：优化手性化合物的分离方法时，如何增加分离选择性？A：正相手性色谱柱上增加分离度的方法有：降低

6、流动相中醇的含量、降低柱温、更换流动相中醇的种类、更换手性柱。Q：建立手性化合物的分离方法时，选定了正相手性柱之后，如何选择流动相？A：流动相首选正己烷和异丙醇的混合溶液，根据样品的酸碱性决定是否添加酸碱性添加剂。如果是中性样品则不需要添加添加剂，如果是酸性样品需要添加三氟乙酸或乙酸，如果是碱性样品需要添加二乙胺，添加剂的量一般为0.1%。流动相中醇的含量一开始可以使用30%，根据样品出峰的快慢和分离度再调整醇的含量。流动相中醇的种类一般使用异丙醇，也可以使用乙醇。Q：建立手性化合物的分离方法时，如何选

7、择手性柱？A：根据文献或者参考大赛璐公司的《应用指南》中结构类似物的分离方法，选择手性柱；另外可以寄少量消旋品，大赛璐公司能免费为您选择分离最佳的手性柱。Q：CHIRALPAKAD-H柱和CHIRALPAKAD是什么区别？A：CHIRALPAKAD-H柱和CHIRALPAKAD的填料种类是一样的，表面涂敷的都是直链淀粉－三(3,5－二甲苯基氨基甲酸酯)，手性选择性基本相同。只不过填料的粒径不一样，CHIRALPAKAD-H是5μm，CHIRALPAKAD是10μm。CHIRALPAKAD-H能代替CHI

8、RALPAKAD并且CHIRALPAKAD-H柱效更高。Q：手性柱谱图中异构体的分离度下降了，这可能是什么原因，该怎么办？A：分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化，或者色谱柱受损柱效发生了变化。首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分离度下降，如果排除了各种外在因素就有可能是分析柱本身的柱效下降导致的。如果分离度在短时间内急剧下降伴随柱压上升，可能是有强极性溶剂损害了柱子；如果分离度在长时间内慢慢下降，