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时间:2018-08-06
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1、酿酒酵母的发酵过程优化戴璐(常熟理工学院生物与食品工程学院,常熟215500)摘要:该文以酿酒酵母为的生产菌,通过发酵过程的优化,重点考察了pH、溶解氧,测定残糖量和生物量的影响,并比较了分批培养、补料分批培养对酿酒酵母生长代谢的影响。发现补料分批培养比分批培养有利于酿酒酵母的生长与繁殖,有较多的细胞生物量的积累。关键词:酿酒酵母;发酵过程WineyeastfermentationprocessoptimizationDailu(ChangshuInstituteofTechnology,BiotechnologyandFoodEngineeringInstit
2、ute,Changshu215500)Abstract:ThefermentationprocessofSaccharomycescerevisiaeisoptimized.Theeffectofsomefermentconditions,includingpH,fermentationofoxygen,determinationofresidualsugarandbiomassareresearched.Andthisexperimentisthepartialtraining,fillingmaterialsforpartialtrainings.cerev
3、isiaegrowthmetaboliceffects.Theresultsshowedthatthepartialtrainingformaterialofs.cerevisiaetrainingtoofthegrowthandreproduction,morecellsbiomassaccumulation.Keywords:Saccharomycescerevisiae;FermentProcess酿酒酵母菌属于真菌界、子囊菌门、不完全子囊菌纲、酵母菌目、酵母菌科、酵母菌属(Saccharomyces)。酵母菌属含有若干种,如酿酒酵母菌(S.cerexis
4、iae)和波兰地酵母菌(S.boullardii,新种未正式命名)[1]。酵母菌是重要的工业微生物与科学研究的模式生物,在食品、医药、能源化工和环境治理等领域有重要应用价值。野生酵母资源的开发利用是发酵工业菌种改良的基石,也是基因多样性的重要来源。其中葡萄酒酵母在葡萄酒酿造过程中起着至关重要的作用,将葡萄汁中的绝大部分糖转化为酒精和二氧化碳,同时生成甘油、高级醇、醛、酯等代谢产物,直接影响葡萄酒的色泽、香气及口感,决定着葡萄酒的质量,对葡萄酒特色的形成至关重要。酿酒酵母菌的发酵特性因菌株的不同而存在明显差异,菌株的不同导致利用的底物不同、生成的化学物质不同,从而
5、使发酵产物的风味物质存在差异,赋予产品独特的风味[2]。1材料与方法1.1材料1.1.1试验菌株酿酒酵母1.1.2培养基PDA(斜面、平板培养基):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15-20g,水1000ml,自然pH。制法:马铃薯去皮后,切成小块,加水煮烂(煮沸20-30min,能被玻璃棒戳破即可),用4层纱布过滤,再加糖和琼脂,加热溶化后在补足水分至1000ml,121℃灭菌20min。种子培养基(YEPD培养基):酵母粉10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,蒸馏水1000mL,pH6.0,121℃湿热灭菌20min。发酵培养基:YEPD培养基。1.1.3器
6、皿电子天平,烧杯,锥形瓶,量筒,试管,玻璃棒,培养皿,移液管等。1.2酿酒酵母发酵工艺1.2.1分批发酵将培养好的种子液以10%(v/v)接种量接种到发酵罐培养基中,180r/min,30℃培养14h,调节通气量为3L/min。从发酵开始,每隔2h在线读取发酵罐中发酵液pH,及溶解氧量。1.2.2补料分批发酵将培养好的种子液以10%(v/v)接种量接种到发酵罐培养基中,180r/min,30℃培养14h,调节通气量为3L/min。在细胞生长的对数生长期中后期一次性添加20g葡萄糖到发酵罐中。每隔2h在线读取发酵罐中发酵液pH,及溶解氧量。1.3酿酒酵母发酵液残糖
7、量测定1.3.1葡萄糖标准曲线的测定:DNS法3,5-二硝基水杨酸试剂:甲液:溶解6.9g结晶酚于15.2ml10%氢氧化钠溶液中,并用水稀释至69ml,在此溶液中加6.9g亚硫酸氢钠。乙液:称取255g酒石酸钾钠加到300ml10%氢氧化钠溶液中,再加入880ml1%3,5二硝基水杨酸溶液。将甲乙二溶液混合既得黄色试剂,储于棕色瓶中备用。在室温放置7-10天以后使用。葡萄糖标准溶液的配制:准确称取100mg分析纯的无水葡萄糖(预先在105℃干燥至恒重),用少量蒸馏水溶解后,定量转移到100ml容量瓶中,再定容到刻度,摇匀。浓度为1mg/ml。取9支25mm×2
8、50mm的试管,分别按下
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