温度和培养基在申克孢子丝菌酵母相转化中的作用研究

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1、作者：张静，黄怀球，薛汝增张晓辉冯佩英李美荣【摘要】 【目的】探讨不同温度和培养基在申克孢子丝菌酵母相转化中的作用。【方法】将4株临床分离菌株分别接种于SDA、PDA、BHI、50mg/kg羊血BHI及5mg/kgGSBHI5种培养基平皿上，每种培养基接种5个平皿，分别置于25℃、35℃、36℃、37℃及38℃含体积百分数为5%CO2的恒温箱中培养。观察菌落生长情况并计算酵母细胞转化率。【结果】在38℃，平皿转化率为25%(只有1株菌发生了转化);在35℃和37℃时，平皿转化率分别是60%和85%;而在36℃时平皿转化率仅为45%。使用50mg/kg羊血BHI和0.5%GSBHI培养基培养，

2、65%培养皿上的菌株发生了酵母相转化，使用BHI培养基培养，45%培养皿上的菌株发生了酵母相转化，而使用SDA和PDA培养基培养，只有20%培养皿上的菌株发生了酵母相转化。37℃时，有3株菌在BHI、50mg/kg羊血BHI和5mg/kgGSBHI培养基上的酵母细胞转化率均达到90%，1株菌在SDA、PDA和BHI培养基上的转化率均低于10%。【结论】温度是影响申克孢子丝菌酵母相转化的关键因素，培养基的营养成分亦是影响转化效果的重要因素。【关键词】 申克孢子丝菌;酵母相转化;温度;培养基　Abstract：【Objective】Toinvestigatetheeffectoftemperat

3、ureandmediaonmycelium-to-yeasttransformationofSporothrixschenckii.【Methods】Theclinicalisolates4wereinoculatedonplatesofmediaafterreactivation.EachisolatewasinoculatedonplatesofSDA，PDA，BHI，50mg/kggoatbloodBHIand5mg/kgGSBHI，and5platesofeachmediawerepreparedbecauseisolatesofeachmeidawereincubatedat25℃

4、，35℃，36℃，37℃，and38℃.GrowthofSporothrixschenckiiwasobservedandratesoftransformationwerecalculated.【Results】At38℃，thetransformationsrateswere25%(theonlyoneStrainconvertedyeast).At35℃and37℃，thetransformationsrateswere60%and85%，respectively.At36℃，thetransformationsrateswere45%.Therewere13of20platesconv

5、ertingyeastwhen5%goatbloodBHIand0.5%GSBHIwereused，9of20plateswhenBHIwasused，4of20plateswhenSDAandPDAwereused.At37℃，transformationratesof3isolatesreached90%onmediumofBHI，50mg/kggoatbloodBHI和5mg/kgGSBHI;However，thetransformationratesof1isolatewerelessthan10%onSDA，PDA，andBHI.【Conclusion】Temperatureist

6、hekeyfactorthataffectsmycelium-to-yeasttransformationofSporothrixschenckii，nourishmentsofmediamayalsobenecessaryfortransformation.　　申克孢子丝菌属于双相型真菌，在自然界或室温培养为菌丝相，在体内或37℃培养为酵母相。申克孢子丝菌感染可导致孢子丝菌病，不仅可以引起皮肤组织的病变，还可侵犯内脏器官引起系统性病变，严重危害着人类的健康[1-2]。酵母相是申克孢子丝菌的致病相，申克孢子丝菌在体内从菌丝相到酵母相的转化是致病的一个关键步骤[3-4]。目前关于酵母相转化的研

7、究多集中在基因水平[5-6]，而对于与致病性同样紧密相关的生化特点研究较少。本文研究了不同温度和培养基在申克孢子丝菌酵母相转化中的作用。　　1材料与方法　　1.1实验菌株　　菌株SUMS0382、SUMS0383、BMU02035和BMU00471经形态学和分子生物学鉴定为申克孢子丝菌。SUMS0382和SUMS0383分离自我科淋巴管型孢子丝菌病患者，BMU02035和BMU00471由北京大学真菌和真菌病