高产植酸酶菌株的选育和培养条件的研究-微生物学专业论文

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1、优秀毕业论文西北大学硕士学位论文高产植酸酶菌株的选育和培养条件的研究姓名：张卫兵申请学位级别：硕士专业：微生物学指导教师：郭爱莲20040601精品参考文献资料优秀毕业论文摘要从200多个自然样品中，分离、筛选出一株产植酸酶的曲霉，其植酸酶产量为5．868IU／ml。经鉴定后定名为黑曲霉Px。对黑曲霉Px原生质体的形成和再生条件进行了研究。结果表明：在液体培养条件下培养18小时的菌丝，用O．3％B一巯基乙醇与酶液同时处理，采用pH5．0的混合酶(蜗牛酶：纤维素酶=7：3)；在34。C酶解2．5h；用O．7mol／L的氯化钠为渗透压

2、稳定剂时，原生质体形成数和再生率均达到最高，分别为9．7X105个／rot和28．2％。对黑曲霉Px的粗酶液的性质作了研究：该酶作用的最适温度为45℃；最适pH为5；该酶在55。C、pH为3～7时，相对酶活大于80％；金属离子zn2+、AL”、Mn2+、Cu2+等对该酶有较强的抑制作用，而M92+则有一定的激活作用。以黑曲霉Px为出发菌株，分别对其孢子和原生质体进行诱变，选育出高产菌株Py的植酸酶产量为9．274IU／ml，是出发菌株的1．58倍。利用Plackctt—Burman设计筛选出黑曲霉Py培养基中的重要影响因素，然后利

3、用正交试验设计和响应面分析法对这些重要因素进一步优化，得出其优化培养基成分为：蛋白胨O．3％，葡萄糖2．57％，州H4)2S040．299％，MgS04·7H200．05％，MnS047H200．003％，FeS04·7H20O．003％，KCl0．05％，植酸钠O．236％。在此基础上对其产酶条件进行优化的结果为：pH5．6，温度31．1℃，时间4．7d。经以上优化后，黑曲霉Py的植酸酶产量为15．73IU／mL。植酸酶的去磷实验表明，粗酶液对植酸钠的去磷率在4小时时可达到88％。关键词：黑曲霉植酸酶原生质体He-Nc激光RSM

4、Plackett—burman设计蒜经作者、导师阋簟膏全文公措精品参考文献资料优秀毕业论文ABSTRACTAnAspergillusstrainwithhighyieldofphytasewasisolatedandselectedfrommorethan200naturalsamples，theyieldofphytaseis5．868IU／mL，whichwasidentifiedandnamedAspergillusnige，Px．Secondly,theformationandregenerationoftheprotop

5、lastfromAsperigitlusnigerPxwithhi曲yieldofphytasewasstudied．Thehighestyieldofprotoplastandthehighestregenerationratiowere9．7x105／m1and28．2％，respectively，whenthemyceliagrowingontheconditionandliquidculturefor18hoursweredealtwith0．3％3-mercaptoethanolaandcompoundenzymetog

6、etherbyusingO．7mol／LNaCIastheosmoticpressurestabilizerfor2．5hoursat34。C．Thecompoundenzymewascomposedofsnailaseandcelluaseatthebestconcentrationratioof7：3，pHvalue5．0．Theproprietiesofenzymesolutionwerestudiedatthesametime．TheoptimaltemperatureandoptionalpHwere45"Cand5，r

7、espectively．Whentheenzymeisdisposedattemperature556CorpH3．0-7．0，therelativeenzymeactivityisabove80％．TheenzymeactivityisgreatlyinhibitedbyZn”、AL3+、Mn2+、cu2+．butM92+hasactivationeffectonphytaseactivityatcertainconcentration．TheprotoplastsandsporesoftheoriginstrainPxwast

8、reatedbylaserandUVradiationtoobtainmutantstrainwithhighphytaseactivity．StrainPywasobtainedandenzymeactivityofphytasewas9．274