大脑中动脉缺血再灌注大鼠脑组织par1表达与炎症反应的关系

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1、大脑中动脉缺血再灌注大鼠脑组织PAR1表达与炎症反应的关系作者：周青珍，王华梅，吴家幂【摘要】目的:研究脑缺血再灌注（CIR）后脑组织中蛋白酶激活受体1(PAR1）的表达及其与炎症反应的关系。方法:40只雄性SD大鼠线栓法建立大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，再灌注后于3、6、12h及1、2、3、7d取脑，免疫组化法和脑组织匀浆法检测PAR1、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。结果:缺血再灌注后脑组织PAR1表达增加（P＜0.01），MDA含量增多（P＜0.01），SOD

2、活性降低（P＜0.01）；PAR1表达与MDA含量正相关（r1=0.844,P＜0.05），与SOD含量负相关（r2=-0.901,P＜0.01）。结论:CIR后PAR1表达增多可加重脑组织炎性反应。【关键词】大脑中动脉;栓塞；蛋白酶激活受体1Abstract:ObjectiveToinvestigatethecorrelationbetweenproteaseactivatedreceptor1(PAR1)expressionandinflammatoryreactionofbra

3、intissueaftercerebralischemiareperfusion(CIR).MethodsFourtySDratswererandomlydividedintoeightgroups:shamgroup,CIR3h,CIR6h,CIR12h,CIR1d,CIR2d,CIR3d,andCIR7dgroup(n=5).Toestablishmiddlecerebral8arteryocclusion(MCAO)modelwithLonga'methods.Attheindicated

4、timepoint,theratwassacrificedanditsbrainwasremoved.PAR1wasdetectedwithimmunohistochemistry,SODandMDAcontentsinbrainhomogenateweremeasured.ResultsComparedwithshamgroup,PAR1expressionwasincreasedobviously（P＜0.01）.ContentsofMDAwereincreasedwiththetime

5、ofCIRprolonged（P＜0.01）,andtherewaspositivecorrelationbetweenPAR1expressionandMDAcontent（r1=0.844,P＜0.05）,butSODactivitywasdecreased（P＜0.01）,andnegativelycorrelatedwithPAR1expression（r2=-0.901,P＜0.01）.ConclusionIncreasedPAR1expressionmayaggravatein

6、flammatoryreactionofbraintissueinratsafterCIRwithMCAO.Keywords:Middlecerebralartery;Occlusion;Proteaseactivatedreceptor1近年来研究发现中性粒细胞的聚集、黏附和浸润，以及炎性因子的大量产生是缺血再灌注损伤的重要因素[2]。脑缺血再灌注（cerebralischemiareperfusion,CIR）后中性粒细胞在凝血酶作用下趋化于缺血组织周围，通过激活蛋白酶激活受体-1（pr

7、oteaseactivatedreceptor1,PAR81）导致细胞内Ca2+升高，刺激小胶质细胞的活化和增生[3]，促进炎症因子表达，活化的白细胞释放自由基，引起脑缺血后脑组织损害。本实验通过建立大脑中动脉栓塞（Middlecerebralarteryocclusion,MCAO）模型,了解CIR后脑组织中PAR1表达与代表自由基水平的超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）之间的相关性，以探讨PAR1在CI

8、R后脑组织炎症反应中的作用。1材料和方法1.1实验动物与分组健康雄性SD大鼠40只，体重270～320g(南京青龙山实验动物养殖中心提供），随机分为8组：假手术组，缺血再灌注3、6、12h及1、2、3、7d组（n=5）。1.2脑缺血再灌注模型的制备选用日本产钓鱼尼龙线，直径0.2mm，每段长4cm，头端烧成杵状备用。参照ZeaLonga报道的线栓法[1]建立大鼠大脑中动脉栓塞MCAO模型。术后2h，外拉尼龙线，使其球端回至颈外动脉残端，恢复大脑中动脉供血，实现再灌注，于上述不同时间点断头取脑；假