小鼠室旁核内雌激素受体与催产素、加压素表达的免疫组化研究

《小鼠室旁核内雌激素受体与催产素、加压素表达的免疫组化研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、小鼠室旁核内雌激素受体与催产素、加压素表达的免疫组化研究作者：赵承军，邓其跃，张东梅，蔡文琴，阮怀珍，张吉强【摘要】目的研究雌激素的核受体ERα和ERβ以及催产素、加压素在成年雌性小鼠下丘脑室旁核内的表达。方法采用硫酸镍铵增强显色的免疫组化SP法检测ERα、ERβ、催产素和加压素在室旁核内的表达。结果雌激素的两种核受体在室旁核内都有表达，但是以ERβ为主（P＜0.001），其免疫阳性产物均在细胞核内，未见核外免疫阳性反应。催产素的免疫阳性产物主要在细胞核周围的胞浆即核周质内，而加压素的免疫阳性物质除了在核周质内有很强的反应外，在突起内也可见很强的免疫反应。ERα的免疫阳性胞体主

2、要在大细胞部内侧，而ERβ、催产素和加压素的免疫阳性胞体主要在背侧帽部或大细胞部的外侧。结论室旁核内两种雌激素受体可能都参与了对催产素和加压素的调节，但ERβ可能发挥了主要的调节作用。【关键词】雌激素受体；催产素；加压素；室旁核；小鼠Abstract:ObjectiveTostudytheexpressionsofthetwoestrogenreceptors(ERαandERβ),oxytocinandvasopressinintheparaventricularnucleus(PVN)ofmice.MethodsThe9expressionsofERα,ERβ,oxytoc

3、inandvasopressinweredetectedusingnickelammoniumsulfateintensifiedimmunohistochemicalSPmethod.ResultsBothofthetwoERs(ERαandERβ)immunoreactivitiesweredetectedinthecellnucleiofthePVN,whileERβshowedstrongerstaining.Positivestainingofoxytocinandvasopressinwereinthecytosoloftheneuronsandtheformergave

4、lessintensity,manypositivevaricositiesforvasopressinwerealsonoticedinneurite.MostofERαwerefoundinthemagnocellularpart,andotherswerefoundoutthemagnocellularpartordorsalcupofthePVN.ConclusionBothERsmightinvolvetheaccommodationofPVN,butERβmightbethepredominantERinmediatingthisERdependantregulation

5、.Keywords:estrogenreceptor;oxytocin;vasopressin;hypothalamicparaventricularnucleus;mouse已有的研究表明雌激素可以调节下丘脑室旁核的神经内分泌活动尤其是催产素（oxytocin，OT）和加压素（vasopressin，VP）的分泌，但是其机制尚不清楚［12］。我们此前研究了雌激素β受体（estrogenreceptorβ，ERβ）在小鼠室旁核（paraventricularnucleus，PVN）内的发育学表达，以及在妊娠、哺乳鼠PVN的表达［394］，本文拟对PVN内两种雌激素受体ERα和ER

6、β，以及OT和VP的表达进行初步研究，以期为阐明雌激素受体介导的雌激素调节室旁核神经内分泌活动的机制提供新的资料。1材料与方法1.1主要试剂兔抗ERα、兔抗VP和鼠抗OT购自Chemicon公司；兔抗ERβ购自Zymed公司。生物素标记的羊抗兔或马抗小鼠以链霉卵白素标记的辣根过氧化物酶复合体（SPHRP）均购自北京中杉生物技术公司。其它试剂如硫酸镍铵为分析纯。1.2实验动物及标本制备正常成年昆明雌性小鼠（体重25～28g）由第三军医大学实验动物中心提供。经阴道涂片鉴定为动情间期者共选取5只。动物用5%水合氯醛腹腔麻醉，开胸，经左心室插管到主动脉，剪开右心耳，先后灌注生理盐水200m

7、L和4%多聚甲醛溶液300mL。灌注后取出大脑组织，分离下丘脑，放入4%多聚甲醛溶液继续后固定过夜。Leica1860型冰冻切片机行冰冻切片，片厚30μm，切片漂于PBS中备用。91.3免疫组化染色硫酸镍铵增强显色的免疫组化技术按文献［5］进行。简述如下：切片经3%H2O2封闭15min，PBS漂洗后用正常血清封闭30min，然后加入一抗（ERα1∶1000；ERβ1∶1000；OT1∶8000；VP1∶8000）于