室旁核内微量注射催产素对大鼠胃缺血-再灌注后胃黏膜胃泌素表达的影响

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1、室旁核内微量注射催产素对大鼠胃缺血/再灌注后胃黏膜胃泌素表达的影响【摘要】目的研究室旁核（paraventricularnucleus，PVN）内微量注射催产素（oxytocin，OT）对大鼠胃缺血/再灌注(gastricischemia/reperfusion，GI/R)后胃黏膜细胞胃泌素表达的影响。方法采用夹闭大鼠腹腔动脉30min，去除动脉夹再灌注1h的GI/R损伤模型，于单侧PVN微量注射OT。肉眼计数胃黏膜损伤指数，并运用免疫组化实验技术观察了PVN微量注射OT对胃黏膜细胞胃泌素蛋白表达的影响。结果PVN微量注射OT可明显减轻

2、GI/R损伤；PVN内微量注射OT能明显减少GI/R后胃黏膜细胞胃泌素的表达，侧脑室给予OT特异性拮抗剂atosiban后阻断OT对大鼠GI/R损伤的保护作用并使胃泌素的表达增加。结论PVN微量注射OT后对GI/R损伤具有显著的保护作用，这种保护作用在脑内是由OT受体介导的，在胃黏膜局部与抑制胃黏膜细胞胃泌素的表达有关。【关键词】胃缺血/再灌注室旁核催产素胃泌素Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofmicroinjectionofoxytocin(OT)intoparaventricularnucl

3、eus(PVN)ongastricischemia/reperfusion(GI/R)injuryandgastrinexpression.MethodsGI/Rinjurypingtheceliacarteryfor30minandthenreperfusingfor1h.AcannulaicroinjectionofOT.Thegastricmucosalinjuryindexucosainedbyimmunohistochemistry.ResultsMicroinjectionofOTintoPVNattenuatedthega

4、stricmucosalinjuryrelatedtoGI/R,andsignificantlydecreasedtheexpressionofgastrinproteiningastricmucosa.TheptotectiveeffectsofOTcouldbeblockedbypretreatmentediatedviaitsreceptors.Thelocalmechanismatthegastricmucosamayinvolvetheinhibitionofgastrinexpression.Keyia/reperfusio

5、n;paraventricularnucleus;oxytocin;gastrin胃泌素是一种具有广泛的生理和病理作用的胃肠激素，由胃窦区G细胞释放，能够刺激壁细胞分泌胃酸增多，刺激肠嗜铬样（enterochromaffin-like，ECL）细胞释放大量组胺引起组织炎症和血管通透性增加，胃泌素还可抑制幽门括约肌的紧张性，使其功能失调而引起胆汁返流，从而引起胃肠黏膜的炎症和溃疡等损害。但胃泌素有时也具有生长因子的作用，促进胃黏膜的生长［1］。大鼠胃缺血/再灌注（gastricischemia/reperfusion，GI/R）是目前常用

6、的一种研究胃损伤的模型，其发生与多种因素有关，如胃黏膜内氧自由基生成过多、内皮素水平升高、胃微循环障碍、白细胞浸润、一氧化氮释放、胃酸分泌增多、前列腺素合成减少等［2］，而有关胃泌素在其中作用的研究较少。此外，下丘脑室旁核(paraventricularnucleus，PVN)对胃酸分泌、胃运动、胃电活动均有广泛的调节作用。PVN内包含多种神经元，可分泌多种神经递质，其中包括催产素（oxytocin，OT）能神经元及其受体。PVN以及OT能神经元及其受体参与对胃黏膜损伤的调节［3］，刺激PVN及PVN内微量注射OT能够减少胃酸分泌，减轻

7、胃溃疡［4］;我们以前的研究发现电刺激PVN可减轻GI/R损伤［5-6］。那么，PVN内微量注射OT对GI/R损伤是否有影响呢？这种影响是否通过胃黏膜局部胃泌素所介导呢？因此，本研究通过建立GI/R模型，应用核团微量注射、免疫组化等方法，探讨了PVN内微量注射OT对GI/R损伤的影响及胃泌素在其中的作用机制。1材料和方法1.1试剂OT购自上海第一生化药业有限公司；atosiban购自深圳翰宇生物工程有限公司；胃泌素兔多克隆抗体、Pog/kg腹腔注射)固定于脑立体定位仪上，按照Paxinos和OD)、累积光密度（integratedopt

8、icaldensity，IOD）作为分析指标。对照实验以PBS缓冲液代替一抗。每例3张间断切片，每张切片随机选取10个视野，取平均值。1.7统计学处理数据以±s表示，多组间比较采用完全随机设计方差分析法（A