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时间:2018-08-02
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1、二苯乙烯苷对Aβ2535致NG10815损伤的保护作用作者:黄忠仕,农嵩,谢海渊,张树球,李韬,李曙波【摘要】 目的观察二苯乙烯苷对Aβ2535诱导损伤的NG10815细胞生长、分化的影响。方法以Aβ2535诱导NG10815细胞建立痴呆细胞模型后加入二苯乙烯苷培养,观察NG10815细胞的生长状态、存活率、突起率及突起平均长度。结果与细胞模型组相比,二苯乙烯苷组能在一定程度上抑制Aβ2535对痴呆细胞的损伤作用,细胞生长状态良好,细胞存活率、突起率及突起平均长度与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或
2、P<0.01)。结论二苯乙烯苷对Aβ2535诱导的NG10815细胞损伤具有保护作用。【关键词】二苯乙烯苷老年性痴呆β淀粉样蛋白NG10815细胞 【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectsofTSGonthegrowthanddifferentiationofNG10815cellswhichwereinjuredbyAβ2535.MethodsNG10815cellswereculturedbyAβ2535toestablishcellmodelofAlzheimer's
3、disease(AD)andthenwereculturedwithTSG.Thegrowthstate,survivalrate,neuriteoutgrowthandaveragelengthofoutgrowthofNG1081015cellswereobserved.ResultsTSGcouldprotectNG10815cellsfromAβ2535damage.Comparedwithmodelgroup,themorphology,survivalrate,neuriteoutgrowthandave
4、ragelengthofoutgrowthofNG10815cellsweresignificantdifferencefromTSGgroup(P<0.05orP<0.01).ConclusionTSGcanprotecttheNG10815cellularinjuryinducedbyAβ2535. 【Keywords】2,3,5,4’tetrahydroxystilbene2OβDglycoside(TSG);Alzheimer'sdisease(AD);βAmyloidprotein;NG1
5、0815cells 二苯乙烯苷(2,3,5,4’四羟基二苯乙烯βD葡萄糖苷,TSG)是何首乌中的主要水溶性成分。近年来发现二苯乙烯苷对神经具有保护作用,其作用机制可能通过钙通道拮抗、抗氧化、胆碱脂酶抑制剂、调节细胞凋亡等途径而起作用的,因此对老年性痴呆(Alzheimer’sdisease,AD)等神经退行性病变的防治具有很好的应用价值,可开发研制为治疗老年性痴呆的新药物[1~3]。本实验以Aβ2535诱导NG10815细胞建立痴呆细胞模型,并观察二苯乙烯苷对该模型的影响,现报道如下。 材料和方法10
6、 1.实验材料 ①实验细胞株:NG10815细胞由广西中医学院钟振国教授惠赠。②试剂与仪器:主要试剂有二苯乙烯苷(由本教研室根据有关文献[4]提取);Aβ2535片段,cAMP,PenicillinG,硫酸链霉素,MTT(以上试剂由Sigma公司提供);HAT(次黄嘌呤/胸腺嘧啶核苷/氨甲喋呤)(Gibco公司提供);胎牛血清(FBS),DMEM培养基(Hyclone公司提供)。主要仪器为CO2培养箱(ThermoForma公司);倒置显微镜(南京江南光电股份有限公司);酶标仪(Metertech公司)。 2.培养
7、方法 将细胞培养分为三组,①正常对照组:以5ûS培养,不加Aβ2535;②模型组:以5ûS培养,加Aβ2535;③TSG组:以5ûS培养,加TSG(25、50、100μmol/L)+Aβ2535。细胞增殖培养时,将NG10815细胞加入细胞增殖液(5ûS+DMEM+1%HAT+1%双抗)悬浮细胞,离心,去上清液,分装至50ml培养瓶,10%CO2、37℃培养。待细胞基本长满后,用细胞增殖液将细胞数稀释至约3万/ml,传到96孔培养板,每孔150μl。继续培养1天后,
8、去掉原培养液,更新增殖液,同时模型组、TSG组每孔加入Aβ2535至终浓度为5μΜ,继续培养48小时。将上述在50ml培养瓶中长满的NG1081015细胞用细胞分化液(5ûS+1%HAT+1%双抗+1mMcAMP+DMEM)稀释至约3万/ml,按每孔150μl传到96孔培养板培养。分化液
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