大鼠肾阴阳虚模型建立方法

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1、大鼠肾阴阳虚模型建立方法【摘要】复制大鼠肾阴阳虚模型。方法：甲状腺抑制剂丙基硫氧嘧啶（PTU）大鼠灌胃，甲状腺素片灌胃。结果：大鼠出现中医肾阴阳虚证候的临床表现，肾阳虚组大鼠cAMP/cGMP比值较阴虚组下降，阴虚组比值较空白组明显升高。结论：利用丙基硫氧嘧啶制造大鼠肾阳虚模型，用甲状腺素片制造阴虚大鼠模型是可行的。【关键词】模型动物大鼠肾阴虚肾阳虚　　近年来随着中医药事业的迅猛发展，在中医药科研中模拟中医临床证候的动物病理模型的建立越来越重要。最早建立的肾阳虚模型是祁广教授的氢化可的松动物模型，其后各种中医证候模型的建立方法相继出现，本实验主要是研

2、究甲状腺激素抑制剂丙基硫氧嘧啶建立肾阳虚动物模型，甲状腺素片建立肾阴虚动物模型的可行性。1实验材料1.1实验动物Wistar大鼠SPF级30只，雄性，体重(200±20)g［北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：SCXK（京）2002-0003］。1.2实验药品8丙基硫氧嘧啶(德国瑞姆斯制药股份公司赫尔布兰德分部生产，50mg/片，进口药品注册号H20060262)，甲状腺素片(天津君安生物制药有限公司生产，40mg/片，批准文号：国药准字H12020111)。2.2金银冠心汤加生脉饮制剂对Iso诱发小鼠急性心肌缺血常压耐缺氧存活时间的影响取

3、18～22g雄性小鼠54只，随机分为6组：正常对照组、模型组、金银冠心汤加生脉饮高剂量组、中剂量组、低剂量组、脑心安组，每组9只，给药方法同2.1。　　于末次给药45min后，除正常对照组外，其余各组均皮下注射Iso0.015g/kg制备小鼠急性心肌缺血模型。Iso给药15min后，将每只小鼠分别放入盛有20g钠石灰的250mL密闭容器中，观察死亡情况，并记录小鼠存活时间，以呼吸停止为指标。2实验方法2.1给药将大鼠分为3组，空白组、阴虚组、阳虚组，每组10只，于每日9：00开始灌胃，其中阳虚组用丙基硫氧嘧啶100mg/kg［12］配制成5mg/mL

4、悬混液灌胃，阴虚组用甲状腺素片150mg/kg［3］配制成10mg/mL悬混液灌胃，空白组给相同剂量的生理盐水灌胃。2.2方法实验开始第1d测大鼠体重并开始灌胃，每天定量给水给食以便纪录248h饮水量以及食量。每日20：30观察大鼠的一般状态实验，纪录各组大鼠一般状态的变化。实验共4周，每周测体重1次，纪录大鼠体重变化，前3周各测大鼠肛温1次。第4周股动脉放血处死，测试各项指标。3实验结果3.1一般状态的变化通过4周的实验观察，第1周3组大鼠一般状态基本无差异，第2周阳虚组大鼠饮水量较空白组稍减少，夜间活动也较空白组减少，第3周阳虚组大鼠出现弓背倦怠，

5、毛发枯泽，爪甲颜色较空白组稍浅，大便较空白组稀软，第4周阳虚组大鼠明显较空白组大鼠出现了毛发无泽，弓背倦怠，较阴虚组大鼠易于抓取，饮食饮水量下降，大便清稀多尿，爪甲颜色变淡，尾巴发凉等症状。阴虚组大鼠第1周与空白组无明显差异，第2周出现多动，烦躁，饮水量增加，进食量增加，体温上升，大便干燥，第3周出现毛发干枯，不易抓取，易激动，第4周出现阴虚症状较前3周更为明显。空白组大鼠除体重增加外其余较以前无变化。3.2体重变化实验周期4周，每周进行称重，从4次测得大鼠体重可以看出，阳虚组体重增长明显慢于空白组。大鼠体重比较见表1。表13组大鼠体重比较注：第4周与

6、空白组比较，两组体重均明显下降△P<0.058从数据可以看出空白组大鼠体重一直在增长，而2个模型组第4周大鼠体重较第1周都有下降，结果符合中医阴虚阳虚证候的临床表现。3.3肛温变化见表2。表23组大鼠肛温比较注：第3周与空白组比较，阳虚组较空白组降低#P<0.05，阴虚组较空白组明显升高##P<0.01。　　结果分析：数据显示第3周时各组肛温出现差异，其中阳虚组较空白组降低P<0.05，阴虚组较空白组明显升高P<0.01，阳虚组较阴虚组明显降低P<0.01。实验结果符合中医阴虚、阳虚证候的临床表现［4］。3.4T3、

7、T4比较［5］甲状腺激素其基本作用是诱导新生蛋白质包括特殊酶系的合成，调节蛋白质、碳水化合物和脂肪，以及水、盐和维生素的代谢。甲状腺激素过量使用可致医源性甲亢，甲亢临床典型表现：急躁，哆嗦，怕热，多汗，口干多饮，多食，消瘦，心悸，心音有力；该药可使动物免疫功能低下，部分免疫器官出现病理改变；能造成下丘脑—垂体—8肾上腺轴、甲状腺轴、性腺轴不同程度的功能紊乱；使动物自主神经功能出现紊乱，躁动，易激惹，出汗多，怕热；使物质代谢、能量代谢增强，而上述这些表现符合临床肾阴虚证病理改变的结果，所以运用甲状腺素造阴虚动物模型是可行的。　　甲状腺机能减退者体内的代谢

8、普遍减慢，基础代谢率降低，中医辨证甲减患者大多具有脾肾阳虚症状，以温肾补阳药治疗，临床症状好转