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1、反相高效液相色谱法测定头孢米诺的血药浓度【摘要】目的探讨人血浆中头孢米诺浓度的反相高效液相色谱法的检测。方法高效液相色谱法，固定相为C18柱,pH4.5醋酸铵缓冲液：甲醇（85：15）为流动相,扑热息痛为内标，检测波长273nm。结果头孢米诺在3.71～118.89μg/ml检测浓度范围内呈良好线性关系（r=0.9999）;高、中、低3种浓度的日间RSD≤4.90%、日内RSD≤1.73%;平均回收率为74.58%。最低检测限为3.49μg/ml。结论方法简便、稳定、准确,适用于临床头孢米诺血药浓度的测定。【关键词】头
2、孢米诺;反相高效液相色谱法;血药浓度DeterminationofcefminoxinhumanplasmabyRP-HPLCmethodHANFang-xuan,HUANGChun-xin.HainanProvincialPeople’sHospital,Haikou570311,China【Abstract】ObjectiveToestablishaRP-HPLCmethodfordeterminingcefminoxinhumanplasma.MethodsChromatographicconditionsinc
3、ludedDiamonsilC18（250mm×4.6mm,5μm）,ammoniumacetatebuffer（pH4.5）:methanol（85：15V/V）asmobilephase,paracetamolasinternalstandard.Thedetective7wavelengthwas273nmandtheflowratewas1.0ml/min.ResultsThecalibrationcurvewaslinearintheconcentrationsrangingfrom3.72to118.89μ
4、g/ml（r=0.9999）.Thelowestdetectableconcertrationwas0.1μg/ml.Therecoveryratewas（100.02±0.23）%.Thewithin-daysRSDwaslessthan1.73%andbetween-dayRSDwaslessthan4.90%.ConclusionThemethodissimple,sensitive,accurateandsuitablefordeterminationofcefminoxinhumanplasma.【Keywo
5、rds】cefminox;RP-HPLC;plasmadrugconcentration头孢米诺（CefminoxSodium）为头霉素衍生物,对β-内酰胺酶高度稳定,对革兰阳性菌和革兰阴性菌有广谱抗菌活性，对呼吸系统及泌尿系统感染有较好的疗效,且副作用较少。本文建立RP-HPLC谱法测定头孢米诺钠的血药浓度，专属性强，操作较简便,线性关系和精密度均好，结果准确。1材料1.1仪器日本岛津液相色谱仪,LC-10AT泵,SPD-10A紫外检测器,SePu3000色谱工作站（杭州谱惠科技有限公司）。71.2试药头孢米诺钠对照
6、品（中国药品生物制品检定所）,头孢米诺钠样品（海南思迈药业有限公司，批号040501）,扑热息痛原料（汕头金石制药总厂，批号060901）甲醇（HPLC级）,冰醋酸（AR）,醋酸铵（AR）,三氯乙酸（AR）,注射用水。1.3色谱条件迪马C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为pH4.5醋酸铵缓冲液（醋酸铵7.7g,加水溶解,加冰醋酸6ml加水至1000ml）∶甲醇（v：v=85：15）,内标溶液：1.0mg/ml扑热息痛流动相溶液；流速1.0ml/min；柱温：室温；检测波长:273nm。测得头孢米诺空白血
7、浆、标准品、内标品色谱图见图1。头孢米诺保留时间为8.5min，内标物扑热息痛保留时间为16.3min，头孢米诺、内标物与血浆内源物都得到良好的分离。2.1样品的预处理取血浆200μl，加入内标40μl，振荡，加入10%三氯乙酸溶液100μl，旋涡混匀3min，以13000r/min的高速离心4min，取上清液20ul进样。2．2标准曲线的配制2．2．1标曲贮备溶液的配制精密称取头孢米诺标准品10mg，加蒸馏水定溶于10ml容量瓶中，得到1.0mg/ml头孢米诺标准储备液。72．2．2内标溶液的配制精密称取扑热息痛10
8、mg，加少量甲醇溶解，加流动相稀释定容至10ml，作为内标储备液。准确的移取内标液1.00ml，置10ml量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，即为内标溶液：1.0mg/ml。2．2．3血浆标准曲线的配制以健康人空白血浆加头孢米诺标准液适量，配制成118.89μg/ml、59.44μg/ml、29.72μg/ml、14.86μg/ml、
